检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质

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资源描述

一、实验原理某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:①.还原糖的鉴定:还原糖+②.脂肪的鉴定:脂肪+脂肪+③.蛋白质的鉴定:蛋白质+④淀粉+斐林试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ橘黄色苏丹Ⅳ红色双缩脲试剂紫色碘液蓝色水浴加热(一)还原糖的检测和观察书P181、常用材料:2、试剂:苹果和梨(含糖量较高,白色或接近白色的植物组织)斐林试剂甲液:0.1g/mL的NaOH乙液:0.05g/mL的CuSO4斐林试剂与可溶性还原糖反应本质:在水浴加热条件下,Cu(OH)2被还原糖的醛基还原成Cu2O3、方法步骤:读书P18选材含量高,颜色为的植物组织,例如苹果和梨。糖白色或接近白色制备组织样液制浆过滤取液注入2mL苹果组织样液注入1mL刚配制好的斐林试剂水浴加热约2min产生砖红色沉淀50----650C的温水甲乙液等量混匀振荡、混合摇匀呈现蓝色呈色反应一层纱布过滤结论5.注意事项:①还原糖有。②试剂:.(甲液:0.1g/ml的,乙液:0.05g/ml.)甲乙液必须后再加入样液中,。③必须。葡萄糖果糖麦芽糖乳糖半乳糖用水浴加热斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀现配现用④颜色变化:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀⑤还原糖鉴定不能用的材料不能用番茄、胡萝卜----颜色是红色或深色不能用甘蔗、甜菜----非还原糖2、脂肪的检测和观察:圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。方法一:待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色取材:花生种子(浸泡3~4h),将子叶削成薄片方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况。制片①取最理想的薄片②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液(2~3min)③去浮色(用50﹪酒精)④制成临时装片观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察结论:注意事项:①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。②酒精的作用是:。③唯一需要显微镜观察④使用不同的染色剂染色时间不同。⑤颜色变化:脂肪苏丹Ⅲ染液苏丹Ⅳ染液橘黄色红色洗去浮色(三)蛋白质的鉴定书P191、常用材料:2、试剂:3、颜色变化:鸡蛋清、黄豆组织液、牛奶蛋白质双缩脲试剂紫色双缩脲试剂1、常用材料:2、试剂:4、方法步骤:读书P19蛋白质的肽键在碱性溶液中与Cu2+作用形成紫色络合物。3、蛋白质的检测和观察:选材应该选择含丰富的豆浆或鸡蛋清溶液。(避免材料自身的颜色对实验变化颜色的掩盖)蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液呈色反应组织样液2mL双缩脲试剂A液1mL双缩脲试剂B液4滴摇匀后变成紫色结论:说明组织样液中存在蛋白质。(3)注意事项:①试剂:。(A液:0.1g/ml的;B液:0.01g/ml的)先加,再加。B液要求量适中,否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。双缩脲试剂A液1mlB液4滴NaOHCuSO4蛋白质的检测结果②用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免实验后粘住试管壁,不易洗刷斐林试剂与双缩脲试剂的比较:A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4紫色物质生成砖红色沉淀先加A液,再加B液,不需加热甲液与乙液先混再用,且现配现用,需加热蛋白质还原性糖试剂组成检验结果试剂用法检测对象双缩脲试剂斐林试剂4、淀粉的检测和观察:取材:马铃薯匀浆检测组织样液2mL碘液2滴结论:说明组织样液中存在淀粉。注意:常用材料:马铃薯试剂:。颜色变化:。碘液变蓝摇匀后变成蓝色1.在淀粉酶溶液中加入双缩脲试剂,其结果应该是()A.产生气泡B.溶液呈蓝色C.溶液呈紫色D.产生砖红色沉淀C2.下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是A.用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定B.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴C.鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液D.用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现配现用B【典例4】.(2013·江苏高考)在1、3、5号试管中分别加入2mL蒸馏水,2、4、6号试管中分别加入2mL发芽的小麦种子匀浆样液,然后在1~4号试管中滴加适量斐林试剂,5、6号试管中合理滴加双缩脲试剂,摇匀。预期观察到的实验现象是()A.1、3、5、6号试管内都呈蓝色B.3组实验中甲组和乙组的实验结果相同C.4号试管内呈砖红色,其余试管内都呈蓝色D.4号试管内呈砖红色,6号试管内呈紫色D

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