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消毒与灭菌技术第一节必备知识一、控制有害微生物的重要性■控制病原微生物，阻断病原传播■有效控制微生物，有利于国民经济发展■有效控制微生物防止药源性疾病的发生■控制微生物传播，可避免污染及有害菌传播二、基本概念灭菌杀灭物体上所有微生物的方法消毒杀死物体上病原微生物的方法,并不一定杀死芽胞或非病原微生物防腐防止或抑制体外微生物生长繁殖的方法无菌在一定范围内，不存在活的微生物物理热力消毒灭菌照射消毒灭菌过滤消毒1.燃烧灭菌法2.干热灭菌法3.微波消毒灭菌4.煮沸消毒法5.低温蒸汽消毒法6.压力蒸汽灭菌法1.日光暴晒法2.紫外线灯消毒法3.臭氧灭菌灯消毒法4.电离辐射灭菌法浸泡法擦拭法喷雾法薰蒸法二、消毒与灭菌方法简介化学化学方法常针对消毒而言，主要用于杀灭病原微生物和抑制微生物生长繁殖。高浓度：消毒剂低浓度：防腐剂消毒剂选择原则●杀菌效果明显●使用方便●对人、畜毒害小●价格低廉类别作用机制常用种类酚类蛋白变性，细胞膜损伤3%~5%石炭酸醇类蛋白变性75%乙醇重金属盐氧化、蛋白酶变性2%红汞、0.1%硫柳汞氧化剂氧化、蛋白沉淀0.2%~0.3%过氧乙酸、2%~2.5%碘酒0.1%高锰酸钾表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤新洁尔灭染料干扰氧化、抑制繁殖龙胆紫常用消毒剂种类甲醛熏蒸加热熏蒸酒精灯加热40%甲醛溶液氧化熏蒸取高锰酸钾：甲醛=1：2，混合反应后密闭保持12小时以上。再取与甲醛等量氨水中和，同时敞开门窗放出有刺激性气体。高温杀灭細菌焚烧——最彻底的灭菌方法污染纸张、垃圾及动物尸体烧灼——直接用火焰灭菌方法可直接加热器皿注意体用酒精灯外焰加热干烤——160-170℃加热2小时第二节干热灭菌技术干热灭菌的使用方法把待灭菌的物品包好，放置入干燥箱内，不要堆放过挤。接通电源，按下开关，旋转干燥箱顶部调气阀，打开通气孔，排出箱内冷空气；待干燥箱内温度上升至100～150℃时，旋转调气阀，关闭通气孔。继续加热，调节电热干燥箱温度至所需温度。愠温所需时间一般为：160～170℃2h以上；170～180℃1h以上；250℃45min以上。灭菌完毕，切断电源，待箱内温度降到60℃，再打开干燥箱门，取出灭菌物品。有包扎的器皿在使用前才能除去包扎物。干热灭菌注意事项器皿要先洗净，控干水，不能沾有油脂等有机物。排列不可过密，不能靠近干燥箱壁。一定不能把箱内温度探头挡住。对纸张、棉花、凡士林及粉剂等物品可用140℃，持续3小时。用纸包扎的待灭物品，不可紧靠箱壁，以防着火。灭菌结束时要等温度降至60℃左右再开启箱门，以免玻璃因聚冷而破碎。干燥箱内有焦味应立即关闭电源。高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法121℃0.11Mpa15~30分钟流通蒸汽消毒法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽100℃15~30分钟(杀灭营养体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌第三节湿热灭菌技术湿热灭菌是指利用湿热蒸汽比干热空气穿透力大，易使菌体蛋白变性而使微生物死亡的方法。高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器：卧式压力蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌注意事项使用高压蒸汽灭菌器应注意仪器内水量充足，加水达到标识线灭菌器皿要耐高温高压并应疏松排列在高压蒸汽灭菌器内，保证空气畅通拧紧灭菌器盖，检查放气阀和安全阀，设置好温度、时间加压前先排除仪器内冷空气，待灭菌器内有白色蒸汽持续冒出时，关上放气阀（全自动装置可忽略此环节）对于不能耐受121℃的物品，可用116℃，持续40min或更长时间达到灭菌目的灭菌结束时不要急于打开锅盖，要等压力表中的压力降为零，温度降到80℃以下再打开锅盖，以免锅内液体喷溅伤人及灭菌器皿破裂第四节其他灭菌技术一、低温抑菌法大多数微生物在低温条件下，代谢活动逐渐减慢，但仍能维持生命，低温只能抑制微生物的生长。4℃～10℃存活几个月-2℃～-70℃可长期生存二、巴氏消毒法63℃30min；74℃30s三、煮沸法杀死营养体：煮沸15～30min杀死芽胞：煮沸1～2小时微生物在四、辐射法1.紫外线杀菌法杀菌机理：波长200~300nm(256~266nm)的紫外线具有杀菌作用干扰DNA的复制与转录1、紫外线穿透力较弱2、对皮肤黏膜有损伤2、不耐热物品的表面消毒特点：应用范围：1、空气、手术室、传染病房、微生物实验室消毒紫外线辐射灭菌装置2.微波消毒波长为1-1000mm的电磁波热效应原理是微波通过介质时，使极性分子快速运动，摩擦生热，里外温度同时上升。微波不能穿透金属表面。3.60Co照射灭菌被灭菌的物质一般仅约升温5℃，又称“冷灭菌”。必须有专门的辐射源和相应的防护设备。4.干燥引起生物体内脱水，盐类物质浓度升高而导致微生物死亡。五、渗透压法高渗透压下，细胞脱水，发生质壁分离，使微生物生长受抑制甚至死亡。六、机械除菌法细菌过滤器：直径为0.2～0.45µm的醋酸纤维素滤膜。适用于加热易被破坏物质的灭菌。用于滤过除菌的各式滤器观看教学影片