氯霉素效价

氯霉素效价第一大组选取药物：氯霉素滴眼液规格：8ml20mg国药准字H44020212批号130115菌种：藤黄微球菌（Micrococcusluteus）分工菌种复苏与计数:李慧氯霉素滴眼液梯度稀释：孙晓郑灵珠氯霉素标准品梯度稀释：肖莉雯王超菌液稀释：冯雄珍莫丹平板制作：陈诚菌液制备1、菌种复苏100mL营养肉汤藤黄微球菌冻干粉（37℃,24h）摇床培养2、计数1mL1mL1mL1mL1mL1mL1mL1mL1mL1mL生理盐水10-410-510-61无法计数86192无法计数6423平均菌落数无法计数75212、结果结论：由稀释梯度至10-6，细菌总数计数表可知，10-5为我们所需要的梯度。管碟法（预试验）1、样品稀释2500u/mL1mL氯霉素滴眼液+9mL3号培养基1+95+55+55+55+51.56u/mL3.12u/mL6.25u/mL12.5u/mL250u/mL25u/mLA1:100D1:800C1:400B1:200E1:1600A1:100B1:200A1:100C1:400B1:200A1:100D1:800C1:400B1:200A1:100E1:1600D1:800C1:400B1:200A1:1002、标准品稀释1mL+7mL3号培养基1+95+55+55+55+51.56u/mL3.12u/mL6.25u/mL12.5u/mL250u/mL25u/mL一1:100四1:800三1:400二1:200五1:1600称取氯霉素标准品（每mg为997u)102.39mg定容至50mL,经计算得2041.6u/mL一1:100二1:200三1:400一1:100二1:200四1:800三1:400一1:100二1:200五1:1600四1:800三1:400一1:100二1:2003、平板的制作2mL生理盐水凝固后放置牛津杯50mLⅱ号培养基第二层：5mL第一层：20mLⅱ号培养基4、加样AB二一CD四三每个牛津杯中加对应浓度的试剂，加至液面与牛津杯杯沿平行。EE五五5、结果观察1:1001:2001:4001:8001:1600第一批＋＋＋－－＋＋＋－－抗菌效价（u）25u12.5u6.25u3.12u1.56u备注：“－”表示无抑菌圈，“＋”表示有抑菌圈试管法（预试验）1mL氯霉素滴眼液+9mL3号培养基1+95+55+52500u/mL250u/mL25u/mL12.5u/mL1.56u/mL6.25u/mL5+50.1mL10-5菌液5ml的培养基5ml的培养基+0.05的菌液5+53.12u/mL1、样品E1:1600D1:800C1:400B1:200A1:1001mL氯霉素标准品+7mL3号培养基1+95+55+52041.6u/mL250u/mL25u/mL12.5u/mL1.56u/mL6.25u/mL5+50.1mL10-5菌液5ml的培养基5ml的培养基+0.05的菌液5+53.12u/mL2、标准品五1:1600四1:800三1:400一1:100二1:2003、结论管号1:1001:2001:4001:8001:1600阴性阳性1－－－＋＋－＋2－－－＋＋－＋备注：“－”表示澄清，“＋”表示浑浊1、样品稀释1mL氯霉素滴眼液+9mL3号培养基1+95+55+55+1.255+1.254u/mL5u/mL6.25u/mL12.5u/mL250u/mL25u/mL二1:600一1:5005+1.25三1:7003.2u/mL管碟法2、标准品稀释1mL+7mL3号培养基1+95+55+55+1.255+1.254u/mL5u/mL6.25u/mL12.5u/mL250u/mL25u/mL称取氯霉素标准品（每mg为997u)102.39mg定容至50mL,经计算得2041.6u/mLB1:600A1:5005+1.25C1:7003.2u/mLA一CB二C三三3、加样1：700与1：8001：6005、结论1：5001:5001:6001:700样品---标准品---注：-表示无抑菌圈。试管法1mL氯霉素滴眼液+9mL3号培养基1+95+55+52500u/mL250u/mL25u/mL12.5u/mL4u/mL6.25u/mL5+1.250.1mL10-5菌液5+1.255u/mL1、样品B1:6005+1.25A1:5003.2u/mLC1:600试管法1mL+7mL3号培养基1+95+55+5250u/mL25u/mL12.5u/mL4u/mL6.25u/mL5+1.250.1mL10-5菌液5+1.255u/mL2、标准品B1:6005+1.25A1:5003.2u/mLC1:600称取氯霉素标准品（每mg为997u)102.39mg定容至50mL,经计算得2041.6u/mL3、结论1:5001:6001:700阳性阴性样品+++++++-标准品+++++++-注：++表示浑浊，+表示浑浊度比较低，—表示无浑浊。