18-第18章-体液免疫球蛋白测定

第十八章体液免疫球蛋白测定第一节血清IgG、IgA、IgM测定一、血清IgG、IgA、IgM测定二、血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义第二节血清IgD和IgE测定一、IgD测定及临床意义二、IgE测定及临床意义第三节尿液及脑脊液Ig测定一、尿液Ig测定及临床意义二、脑脊液Ig测定及临床意义第四节血清IgG亚类测定及临床意义第五节M蛋白测定及临床意义第六节轻链测定及临床意义第七节冷球蛋白的检测思考题小结免疫球蛋白（Ig）：抗体活性、化学结构与抗体相似重链性质，Ig分5类：IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε)轻链性质，Ig分2型：κ、λIg占血浆蛋白总量：20%检测意义：反应机体的免疫功能、诊断疾病Ig含量：血清IgG、IgA、IgM：g/L、IgD、IgE：mg/L体液IgG、IgA、IgM：mg/L第一节血清IgG、IgA、IgM测定IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和细胞外液中的主要抗体，也是机体再次免疫的主要抗体。IgA分为血清型和分泌型，是参与黏膜局部免疫的主要抗体，主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中。IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体，也是抗原刺激诱导的体液免疫应答中最早出现的抗体。一、血清IgG、IgA、IgM测定测定方法单向环状免疫扩散法免疫浊度法原理误差主要原因评价单向环状免疫扩散法示意图原理误差主要原因评价单向环状免疫扩散法免疫浊度法直接透射比浊法速率散射比浊法注意点评价二、血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义低Ig血症:先天性低Ig血症（免疫缺陷病）；获得性低Ig血症(蛋白丢失).高Ig血症:多克隆Ig增高（感染）；单克隆Ig增高（免疫增殖病）.第二节血清IgD、IgE测定正常人血清中IgD含量很低，膜结合型IgD(mIgD)构成BCR，是B细胞分化发育成熟的标志。IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌，为亲细胞抗体，引起I型超敏反应；与机体抗寄生虫免疫也可能有关。一、血清IgD测定及临床意义测定方法：放射免疫分析法化学发光免疫分析法免疫比浊法酶联免疫吸附法IgD：生物功能不详增高：类风湿性关节炎、变态反应性疾病、败血症、新生儿溶血病降低：意义不大二、血清IgE测定及临床意义测定方法总IgE测定：放射免疫分析法化学发光免疫分析法免疫比浊法酶联免疫吸附法特异性IgE测定：免疫斑点法酶联免疫吸附法IgE临床意义：增高：变态反应性疾病、寄生虫感染、病毒感染、自身免疫性疾病。降低：意义不大第三节尿液及脑脊液Ig测定正常人尿液中的Ig含量甚微，当机体的免疫功能异常或炎症反应引起肾脏疾病时，可导致肾小球滤过膜分子屏障破坏或电荷屏障受损，从而引起球蛋白及其他大分子蛋白质漏出增多。生理情况下，Ig根据其分子量大小，通过血脑屏障的难易度不同，IgG、IgA、IgM在脑脊液中的浓度递减。病理状态时，脑脊液组分发生改变。一、尿液Ig测定及临床意义尿液：肾小球滤膜受损程度：选择性蛋白尿指数增高有临床意义：肾病、免疫增殖病可根据尿内Ig增高的类型帮助鉴别诊断肾小球疾病的种类二、脑脊液Ig测定及临床意义脑脊液：血脑屏障受损程度：白蛋白商值、CSF-IgG指数增高有临床意义：多发性硬化症、中枢神经系统感染第四节血清IgG亚类测定及临床意义Ig亚类：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降测定方法：单向免疫扩散法免疫比浊法（常用）放射免疫分析法酶联免疫吸附法临床意义：IgG亚类的含量随年龄的不同而变化免疫缺陷病降低明显第五节M蛋白测定及临床意义M蛋白：B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖产生的异常单克隆免疫球蛋白临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等M蛋白测定蛋白区带电泳：经典方法计算蛋白含量和百分比免疫比浊法：免疫球蛋白定量准确性高、快速免疫电泳：M蛋白分型免疫固定电泳：M蛋白分型及鉴定，分辨率高GAMκλIgG-κ型M蛋白Marker免疫固定电泳模式图第六节轻链测定及临床意义本周蛋白的检测样本：尿液方法：免疫电泳、加热沉淀（简便易行）κ–Ig和λ-Ig定量检测样本：尿液、血液方法：单向免疫扩散法、免疫比浊法（常用，准确、快速）应用：M蛋白血症的分型及鉴定第七节冷球蛋白的检测冷球蛋白：在低温下发生沉淀，加温后又复溶的免疫球蛋白在低温时产生冷沉淀的机制尚不十分明确多数冷球蛋白为免疫复合物，其抗原可以是外源性的，也可以是内源性的冷球蛋白的类型及临床意义I型：为单克隆冷球蛋白型，占25%～40%;多见于免疫增生性疾病Ⅱ型：单克隆和多克隆混合型冷球蛋白，占15%～25%;多见于自身免疫性疾病Ш型：多克隆混合型冷球蛋白，约占50%;多见于自身免疫性疾病以及感染性疾病1.免疫应答主要分为哪几个阶段？2.什么是免疫球蛋白?其分子基本结构?3.免疫球蛋白分类及亚类?4.血清免疫球蛋白测定方法有哪些?5.比较单向免疫扩散法和速率散射比浊法优缺点。6.免疫球蛋白IgG、IgA、IgM测定有何临床意义？思考题7.免疫球蛋白IgG亚类测定有何临床意义？8.单向免疫扩散测定中有哪些主要影响因素？9.如何保证速率散射比浊法测定结果准确？10.如何评估肾小球滤过膜破坏程度？11.如何判定血脑屏障受损程度？12.如何正确选择测定M蛋白的实验项目?免疫球蛋白是由浆细胞所产生能与相应抗原特异性结合的球蛋白分为IgG、IgA、IgM、IgE和IgD五类，其相应重链分别称为γ链、α链、μ链、δ链和ε链轻链分为κ型和λ型，两型轻链无功能差异免疫球蛋白定量测定方法：单向环状免疫扩散法、火箭免疫电泳法、ELISA、免疫比浊法、放射免疫分析法小结临床意义：选择性蛋白尿指数来评估肾小球滤过膜破坏程度及观察治疗和预后效果；测定尿液免疫球蛋白含量，来对肾小球疾病类型鉴别。测定脑脊液蛋白质，对判断CSF中蛋白质的来源，区分中枢神经系统疾病类别有着重要意义。临床上常通过白蛋白商值和脑脊液免疫球蛋白指数来反映血脑屏障受损程度。血清IgG亚类测定对研究免疫缺陷病和超敏反应性疾病有重要价值。