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气相色谱基础知识1、概述色谱法是一种分离方法，它利用物质在两相中分配系数的微小差异进行分离。当两相做相对移动时，使被测物质在两相之间进行多次分配，这样原来的微小差异产生了很大的效果，使各组分分离，以达到分离分析及测定一些物理化学常数的目的。理解色谱法(GasChromatography)主要有2点：一是要有两相，二是要有差异。两相：固定相和流动相具体到气相色谱：固定相就是色谱柱(column)，流动相就是气体或者称为载气(carriergas)。差异就是指分配系数的差异。1、概述色谱过程示意图待分离组分，和载气ABCD1、概述易溶解——难脱附——速度慢——时间长不易溶解——易脱附——速度快——停留时间短2、气相色谱的定义与分类定义：气相色谱法是以惰性气体(N2、Ｈe、Ar、H2等)为流动相的柱色谱分离技术,其应用于化学分析领域,并与适当的检测手段相结合,就构成了气相色谱分析法。分类：根据固定相的状态不同，可将其分为气固色谱和气液色谱。载气系统色谱柱进样系统检测系统记录及数据处理系统气相色谱构成示意图气相色谱仪一般流程载气由高压钢瓶中流出，经减压阀降压到所需压力后，通过净化干燥管使载气净化，再经稳压阀和转子流量计后，以稳定的压力、恒定的速度流经气化室与气化的样品混合，将样品气体带入色谱柱中进行分离。分离后的各组分随着载气先后流入检测器，然后载气放空。检测器将物质的浓度或质量的变化转变为一定的电信号，经放大后在记录仪上记录下来，就得到色谱流出曲线。根据色谱流出曲线上得到的每个峰的保留时间，可以进行定性分析，根据峰面积或峰高的大小，可以进行定量分析。3.气路系统气路系统是指流动相----载气连续运行的密闭系统,它包括气源钢瓶、净化器、气体流速控制和测量装置。通过该系统，可以获得纯净的、流速稳定的载气。它的气密性、载气流速的稳定性以及测量流量的准确性，对色谱结果均有很大的影响，因此必须注意控制。常用的载气有氮气和氢气，也有用氦气、氩气。载气的净化，需经过装有活性炭、分子筛或硅胶的净化器，以除去载气中的水、氧、油等不利的杂质。辅助气：氧气或空气典型的气相色谱色谱柱流量控制器稳压器空气氢气载气分子筛脱水管固定进样口检测器电子部件PC限流器3.气路系统3.1气流调节阀通常在减压阀输出气体的管线中还要串联稳压阀，用以稳定载气（或燃气）的压力。当用程序升温进行色谱分析时，由于色谱柱柱温不断升高引起色谱柱阻力不断增加，也会使载气流量发生变化。为了在气体阻力发生变化时，也能维持载气流速的稳定，需要使用稳流阀来自动控制载气的稳定流速。3.2净化器氧气捕集器微量的氧气会破坏色谱柱，特别是对毛细管柱。氧气捕集器应连接在分子筛干燥器和仪器安装设备的进样口之间。烃类捕集器（活性炭）捕集小分子烃类物质水分捕集器（硅胶、分子筛）须使用GC专用铜管或不锈钢管。塑料管会渗透O2和其它污染物。还可能会释放其它可被检测到的干扰物。管子使用前确保洁净，否则先用甲醇冲洗，载气吹干。根据工厂的推荐，每用完3瓶气，应更换捕集器，以防止发生气体的污染。每隔一定时间，应对所有外加接头进检漏（大约每隔4-6个月。3.3管路和净化器注意事项组成：进样系统包括进样装置和汽化室两部分。作用：是将液体或固体试样，在进入色谱柱之前瞬间气化，然后快速定量地转入到色谱柱中。进样的多少，进样时间的长短，试样的气化速度等都会影响色谱的分离效果和分析结果的准确性和重现性。4.进样系统液体样品的进样一般采用微量注射器。气体样品的进样常用色谱仪本身配置的推拉式六通阀或旋转式六通阀定量进样,也可采用气密性针进样(手动进样)4.1进样器为了让样品在气化室中瞬间气化而不分解，因此要求气化室热容量大，并不使样品分解。为了尽量减少柱前谱峰变宽，气化室的死体积应尽可能小。常用金属块制成汽化室、外套加热块，为消除金属表面的催化作用，在汽化室管内有石英衬管,衬管有分流与不分流之分。衬管是可以清洗的。4.2汽化室1)分流/不分流进样口(SSI)2)隔垫吹扫填充柱进样口(PPI)3)冷柱头进样口4)程序升温汽化进样口(PTV):进样口的加热丝可程序升温，适合多组分难分离的物质分离5)顶空进样6)微相固萃取进样4.3进样口类型4.4进样口的日常维护更换隔垫清洗或更换进样针进行泄漏测试和维修清洗或更换衬管/内插件更换O-形环清洗或更换分流平板和金属垫片(SSI)500次更换进样垫100次更换一般为1:10吸咐不被气化的物质N2尾吹★进样口温度过低，将导致高分子量化合物气化不完全，并且不能有效转移到色谱柱中。(样品气化不完全)★进样口温度过高，导致热稳定性差的化合物分解。(样品分解)★样品从进样针注入时，不同组分的气化程度不同，高沸点组分残留量比例高。一般情况下进样速度必须很快，因为当进样时间太长时，试样原始宽度将变大，色谱峰半峰宽随之变宽，有时甚至使峰变形。一般地，进样时间应在1s以内。4.5进样口的日常维护注意事项5.分离系统：分离系统是指把混合样品中各组分分离的装置，它由色谱柱组成。色谱柱的分类：1)填充柱由不锈钢、玻璃和聚四氟乙烯等材料制成，常用的为不锈钢柱，柱管内径为2-６mm，柱长1-５m。柱形有U型和螺旋型二种。2)毛细管柱又叫空心柱，分为涂壁、多孔层和涂载体空心柱。空心毛细管柱材质为玻璃或石英。内径一般为0.2-0.5mm，长度30-300m，呈螺旋型。色谱柱填充柱毛细管柱普通填充柱微填充柱分析填充柱制备填充柱壁涂毛细管柱(WCOT)多孔层毛细管柱(SCOT或PLOT)填充毛细管柱弹性石英毛细管柱(FSOT)壁处理毛细管柱分配型吸附型分配型吸附型普通弹性石英毛细管柱键合相弹性石英毛细管柱5.1色谱柱分类5.2毛细管柱的选择225.2毛细管柱的选择23熔融二氧化硅作为基本材质，表面涂有一层聚酰亚胺做保护层，温度上限提高至360℃甚至400℃5.2毛细管柱的选择24固定相以膜的形式涂布在毛细管柱的内壁表面，大部分是胶状的高分子，且具有高热稳定性的聚合物，如聚硅氧烷，聚乙二醇5.2毛细管柱的选择25一般有0.53，0.32，0.25，0.20mm四种规格，内径小分离效果好，内径大处理量大，但过大的内径会导致担体不能均匀地分布在色谱柱中5.2毛细管柱的选择26柱管增长，可改善分离能力，短则组分馏出的快柱长级别数值应用短柱10~15m对分离度要求不高的应用，筛查性实验，或样品中各个组分的化学性质差异较大，少于10个组分中长柱20~30m分离10~50个组份的样品长柱50m以上分离50个组份以上的样品5.2毛细管柱的选择27薄液膜：0.1-0.2μm标准液膜：0.25-0.33μm厚液膜：0.5-5μm薄液膜负荷量低，高温下流失较小，适合高沸点化合物分析，厚液膜负荷量高，高温下流失较大，适合低沸点化合物分析。5.2毛细管柱的选择28基本原则是分析物与固定液具有相似化学性质时会相互作用,白酒样品中所含的醇醛酸酯类物质均为极性化合物，因此选择有极性的聚硅氧烷作为固定液可以得到很好的分离效果5.2毛细管柱的选择29温度上限和温度下限。提高柱温可以缩短样品分析时间，降低柱温可以增大色谱柱的选择性，有利于组分的分离，提高色谱柱稳定性，延长柱寿命5.2毛细管柱的选择30温度上限和温度下限。提高柱温可以缩短样品分析时间，降低柱温可以增大色谱柱的选择性，有利于组分的分离，提高色谱柱稳定性，延长柱寿命目前所使用的色谱柱1、DB-Wax30m×0.320mm×0.25μm（40℃-260℃）2、DB-Wax30m×0.530mm×0.25μm（20℃-230℃）3、CP-Wax30m×0.250mm×0.25μm（40℃-230℃）315.3毛细管柱的安装1.毛细管柱的安装需在加热区处于室温条件下进行。2.安装载气净化装置去除载气中的水、氧气等以延长柱子寿命；并定期更换。3.定期更换进样垫和衬管。4.检查毛细管柱有否断裂或损伤。325.操作时保持柱端向下，套上卡套和石墨垫圈。6.插入柱子进样端到进样口，预留4-5mm的位置。7.用手拧紧螺帽，直到柱子刚好不上下滑动。通常再用扳手多拧紧四分之一圈。8.接通载气并调节载气压力以得到合适的流速。9.安装柱子检测端到检测器，喷嘴以下1-2mm位置。10.根据分析方法和测试报告调整分流和隔膜吹扫隔垫流量。11.对进样口和检测器进行检漏。12.进常规标准样品或特定混标检测峰形是否正常。13.校对仪器并进行样品分析。335.4毛细管柱的老化新柱子老化柱污染老化34目的：除去管柱内固定液中的低沸点馏分及易挥发的杂质，同时使固定液更均匀、牢固地分布于管壁上作用：降低由柱流失引起的本底噪声，提高定量的准确度新柱子老化35检查载气检查气密性安装色谱柱老化举例36升温速率℃/min温度℃保持时间min400510060101206010220200柱污染老化如果柱子受到污染，可在推荐的最高色谱柱温度低20度的条件下，老化柱子。一般推荐的老化温度为：Tcond=Tmax/2-Tapp/2+Tapp这里:Tcond=老化温度Tmax=色谱柱推荐采用的最高温度Tapp=应用中使用的最高温度37在老化柱子时，需要将连接检测器那一端放空，同时将检测器用闷头堵上。为什么必须进行色谱柱老化？新色谱柱含有溶剂和高沸点物质，所以基线不稳，出现鬼峰和噪声；旧柱长时间未用，也存在同样问题。一般采用升温老化，即从室温程序升温到最高温度，并在高温段保持数小时。新柱老化时，最好不要连接检测器。每天都要进行老化吗？视仪器基线情况，确定是否需要老化以及老化时间。检测器：是将流出色谱柱的被测组分的浓度转变为电信号的装置，是色谱仪的眼睛。通常由检测元件、放大器、数模转换器三部分组成.被色谱柱分离后的组分依次进入检测器，按其浓度或质量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图；常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器、电子捕获检测器、火焰光度检测器、氮磷检测器。6.检测器又称氢焰离子化检测器。主要用于可在H2-Air火焰中燃烧的有机化合物(如烃类物质)的检测。原理：含碳有机物在H2-Air火焰中燃烧产生碎片离子，在电场作用下形成离子流，根据离子流产生的电信号强度，检测被色谱柱分离的组分。火焰离子化检测器（FID）flameionizationdetector,FID结构：主要为离子室，内有石英喷嘴、发射极（极化极，此图中为火焰顶端）和收集极(1)在发射极和收集极之间加有一定的直流电压（100—300V）构成一个外加电场。(2)氢焰检测器要用到三种气体：N2：载气携带试样组分；H2：为燃气；空气：助燃气。使用时需要调整三者的比例关系，检测器灵敏度达到最佳。A区：预热区B层：点燃火焰C层：热裂解区：温度最高D层：反应区工作过程：来自色谱柱的有机物与H2-Air混合并燃烧，产生电子和离子碎片，这些带电粒子在火焰和收集极间的电场作用下（几百伏）形成电流，经放大后测量电流信号。FID操作——参数的设置推荐流量推荐的检测器温度250℃如果检测器温度＜150℃，火焰将无法点燃检测器温度应高于炉温50℃气体类型推荐的流量范围典型流量氢气24-60ml/min30ml/min空气200-600ml/min300ml/min柱流量与尾吹气加和10-60ml/min25ml/minFID点火故障气体问题空气氢气比例不合适氢气纯度不够尾吹气或载气流量过大硬件问题点火线圈故障喷嘴或线圈堵塞检测器积水安装错误设置问题点火补偿值设置不正确温度设置不正确使用大量的芳烃做溶剂引起火焰熄灭注意事项（一）注意安全防氢气泄漏，切勿让氢气泄漏入柱恒温箱中，以防爆炸。注意以下几点即可：在未接色谱柱和柱试漏前，切勿通氢气；卸色谱柱前，先检查一下，氢气是否关好。。（二）保持FID正常性能1．正常点火点火时，FID检测器温度务必在120℃以上。点火困难时，适当增大氢气流速，减小空气流速，点着后再调回原来的比例。检测器要高于柱温20~5