味精的制作生工四班杜宣刘欢刘亚楠谭钰娇味精,又名“味之素”,学名“谷氨酸钠”。成品为白色柱状结晶体或结晶性粉末,是目前国内外广泛使用的增鲜调味品之一。其主要成分为谷氨酸钠。谷氨酸是由谷氨酸棒杆菌以葡萄糖为原料生产的一种呈味氨基酸,其代谢机理为:葡萄糖先经EMP途径生成丙酮酸,丙酮酸经氧化脱氨基作用生成乙酰辅酶A,乙酰辅酶A进入三羧酸循环生成α-酮戊二酸,α-酮戊二酸再经氨基化作用生成谷氨酸。由于谷氨酸棒杆菌为生物素缺陷型突变株,因此在发酵过程中要控制生物素亚适量(2-5μg/L)。CO2谷氨酸合成途径实验材料仪器:量筒、烧杯、三角瓶、广口瓶、酸式滴定管、摇床、发酵罐、高速离心机、干燥箱、显微镜、分光光度计、恒温水浴锅、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、电炉、电子天平、具塞刻度试管等菌种:谷氨酸棒杆菌培养基:1.斜面培养基:葡萄糖0.1%,牛肉膏1.0%,蛋白胨1.0%,氯化钠0.5%,琼脂2.0%,PH7.0-7.22.种子培养基:葡萄糖2.5%尿素0.2%硫酸镁0.04%磷酸氢二钾0.15%玉米浆3.0%PH7.03.发酵培养基:葡萄糖14%尿素0.5%硫酸镁0.06%磷酸氢二钾0.12%玉米浆0.2%糖蜜0.2%PH7.0味精生产工艺流程斜面菌种培养→摇瓶种子培养→转入发酵罐培养→提取谷氨酸→味精实验步骤一、谷氨酸发酵1.配制种子培养基,在高压灭菌锅中灭菌,灭菌条件121℃,20min2.用1000ml三角瓶装入培养基250ml,灭菌冷却后接入斜面菌种(注意无菌操作),置摇瓶振荡培养12小时,培养温度32℃,恒温控制,转速150r/min3.配制发酵培养基,将配制好的培养基加入到发酵罐中,先用夹套加热到95℃,然后改用直接蒸汽加热到121℃,保温20min。再关闭蒸汽,改用自来水冷却至32℃。4.将三角瓶中的种子接入发酵罐,接种量为10%,开始进行发酵。工艺条件如下:①温度控制:0-5h温度32-33℃,之后每隔5小时升一度,后期可控制到37-38℃,其中谷氨酸合成的最适温度为34~37℃。②PH控制:用氨水流加的方式控制PH,发酵前期PH7.5,中期7.2,后期7.0,在发酵结束前6小时停止流加氨水,放罐时PH约6.5-6.8③OD净增控制:总ΔOD控制在0.75-0.8④溶氧控制:开始通风比1:0.08ΔOD0.25,通风比1:0.15ΔOD0.50,通风比1:0.18ΔOD0.65以上,通风比1:0.24,保持10小时以上残糖量下降至3.5%以下时第一次降风,通风比1:0.2残糖量下降至2.5%以下时第二次降风,通风比1:0.13残糖量下降至1.2%以下时第三次降风,通风比1:0.09,至放罐。⑤泡沫控制:在发酵产生一定泡沫时,流加一定量的消泡剂,每次流加约40mg/m3,切忌不要多加。⑥放罐指标:发酵周期32-35小时,残糖1.0%以下,GA含量6.5%以上。5.发酵过程中间分析和记录①从发酵4小时开始,每隔2小时测定OD,PH,糖含量②从发酵12小时开始,除测定上述指标外,每隔4小时测定GA含量③OD用分光光度计测定,PH在线测定,糖含量用菲林滴定法测定,GA用分光光度计测定④镜检:每隔6小时检测菌体的生长状况,要求无杂菌和噬菌体。附:各种指标的测法OD值的测法:发酵液稀释20倍,采用分光光度计于600nm测吸光值还原糖的测法:亚铁氰化钾快速法谷氨酸含量测法:茚三酮法革兰氏染色法:取干净载玻片一张放在染色架上,滴发酵液一滴,干燥加热固定。待涂片冷却后,滴结晶紫染色1min,水洗;碘液媒染1min,水洗;95%的酒精脱色,20-30秒(严格控制时间);番红复染2-3min,水洗,干燥,镜检。二、谷氨酸提取等电点提取谷氨酸的工艺流程:35%HCL35%HCL↓↓发酵液→起晶中和点(PH4-4.5)→育晶2h→中和到PH3.0-3.2→等电点搅拌(25-35min,搅拌转速20-35r/min)→静置沉降6h→离心分离→粗谷氨酸三、味精制备味精制备流程:Na2CO3Na2S↓↓粗谷氨酸+水+活性炭→中和(ph6.2-6.4)→除铁→压滤→脱色(活性炭)→压滤→减压浓缩→结晶(65℃)→离心分离(60℃,1000r/min)→干燥→味精