白带常规及检验技术•1、标本采集•2、外观•3、PH•4、清洁度•5、病原微生物一、标本采集•阴道分泌物主要来自宫颈腺体、前庭大腺,此外还有子宫内膜、阴道粘膜的分泌物等。•阴道标本采集前24小时,禁止性交,盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部用药等,以免影响检查结果。一般在阴道深部或阴道穹后部、宫颈管口等处取材,制备成生理盐水涂片或染色。二、外观•在生量状态下,女性生殖系统由于阴道的组织解剖学和生物化学特点足以防御外界病原微生物的侵袭。青春期后,由于雌激素的影响,阴道的上皮由单层变为复层。上皮细胞内底层外,均含有不同量的糖原,上皮细胞受卵巢功能的影响,有周期的变化及脱落,脱落后细胞破坏放出糖原,借阴道杆菌作用,将糖原转化为乳酸,使阴道PH保持在4-4.5之间,只有阴道杆菌能在此环境中生存。因此,阴道本身有自净作用,形成自然防御功能。当外来病原生物感染,破坏这种平衡就会引起感染。外观检查•正常阴道分泌物为白色稀糊状,一般无气味,量多少不等与雌激素水平高低及生殖器官充血情况有关,于近排卵期白带量多,清澈透明、稀薄似鸡蛋清,排卵期2-3天后白带混浊粘稠、量少、行经前量又增加。妊娠期白带量较多。白带异常的表现•白带异常可表现为色、质、量的改变:•1.大量无包透明粘白带常见于应用雌激素药物后及卵巢颗粒细胞瘤时。•2.脓性白带:黄色或铜绿色有臭味,多为滴虫或化脓性细菌性感染引起的;泡沫状脓性白带,常见于滴虫性阴道炎;其它脓性白带见于慢性宫颈炎、老年性阴道炎、子宫内膜炎、宫腔积脓、阴道异物等。3.豆腐渣样白带:为念珠菌阴道炎所特有,常伴有外阴瘙痒。•4.血性白带:应警惕恶性肿瘤的可能,如宫颈癌、宫体癌等,有时某些宫颈息肉、子宫粘膜下肌瘤、老年性阴道炎、重度慢性宫颈炎和宫内节育器引起的副反应也可在白带中见到血液。•5.黄色水样白带:常发生于子宫粘膜下肌瘤,宫颈癌、子宫体癌、输卵管癌等。三、PH•ph值——青春时期后因为卵巢性激素的刺激,使粘膜上皮细胞内富含动物淀粉,经阴道杆菌分解后变为乳酸,使阴道内分泌物质呈弱酸性,可预防病原菌在阴道内繁殖,阴道正常ph值为4.5,患有滴虫性或细菌性阴道炎时白带的ph值升高,可大于5-6。四、清洁度•正常情况下阴道内有需氧菌与厌氧菌形成正常阴道菌群,其中阴道乳酸杆菌占优势。阴道与这些菌群形成一种平衡状态。阴道分泌物检验显示以杆菌为主,另外可有少量上皮细胞及白细胞。当外来病原生物感染,机体免疫力低下,内分泌水平变化或其他某种因素破坏这种平衡就会引起感染,出现大量上皮细胞、白细胞,使阴道清洁度下降。所以清洁度主要以白细胞、上皮细胞、阴道杆菌与杂菌的多少来划分。•1度只有多量阴道杆菌及上皮细胞,无杂菌、白细胞,视野干净,系正常阴道分泌物。•2度阴道杆菌及上皮细胞中量,少量白细胞及杂菌属基本正常阴道分泌物,多见于阴道口松弛的经产妇。•3度少许阴道杆菌及鳞状上皮,较多杂菌及白细胞。提示炎症,如阴道炎宫颈炎。•4度无阴道杆菌,只有少许上皮细胞,又大量白细胞及杂菌。多见于严重阴道炎,如淋球菌阴道炎、滴虫性阴道炎等。•上皮细胞、阴道杆菌是以底倍镜下1/4,2/4,3/4,满视野来定+,++,+++,++++•白细胞1、有高倍镜下1/4,2/4,3/4,满视野来+,++,+++,++++。2、高倍镜下:10-20,20-30,30-40,40以上来定+,++,+++,++++。阴道清洁度判断标准清洁度杆菌上皮细胞白细胞杂菌意义I++++++++0-5/HP_正常II++++5-15/HP_正常III--15-30/HP++炎症IV--30/HP++++炎症五、病原微生物检验滴虫滴虫呈梨形,后端尖,约为白细胞的2~3倍大小。虫体顶端有鞭毛4根,体部有波动膜,后端有轴柱凸出。它能消耗或吞噬阴道上皮细胞内的糖原,阻碍乳酸生成,改变了阴道酸碱度,破坏阴道防御机制。致病•滴虫性阴道炎表现•阴道会产生黄绿色泡沫状或米糠状有恶臭的分泌物,有时会有外阴瘙痒或是下腹部轻微疼痛的症状,严重会导致阴道黏膜肿胀、发红、充血。真菌•真菌性阴道炎在阴道抵抗力减低时容易发病,真菌性阴道炎以找到真菌为诊断依据,阴道真菌多为白色假丝酵母菌,偶见阴道纤毛菌、放线菌等。当阴道内糖原增多、酸性增强时,真菌迅速繁殖引起炎症,多见于孕妇、糖尿病患者及接受大量雌激素治疗者。真菌检验•采用悬滴法于低倍镜下可见到白色丝假酵母菌的卵圆形孢子和假菌丝。如取阴道分泌物涂片并时行革兰氏染色后油观察,可见芽孢、孢子或与出芽细胞相连接的菌丝,成链状及分支状。•致病•真菌性阴道炎•症状•外阴瘙痒或灼痛为主要症状,急性期白带增多,外因性排尿困难,外阴地图样红斑。分泌物呈乳凝块或豆腐渣样。细菌•加德纳氏菌•寻找阴道分泌物中的线索细胞,是诊断加德钠菌性阴道炎病的重要指标。线索细胞为阴道鳞状上皮细胞粘附多数加德钠菌所致。生理盐水涂片可见该细胞边缘呈现锯齿状。细胞已有溶解,核模糊不清,其上附着大量加德钠菌及厌氧菌,使其表面毛糙。检验•1、线索细胞•2、匀质,稀薄的阴道分泌物。•3、阴道PH4.5(PH多为5.0-5.5)•4、胺臭味试验阳性,取阴道分泌物少许放在玻片上,加入10%氢氧化钾1-2滴,产生一种烂鱼肉样腥臭味即为阳性。淋球菌•淋球菌检验•分泌物呈粘液脓性或脓性。染色后油镜检查,革兰氏阴道性双球菌,形似肾或咖啡豆状,凹面相对,除散在于白细胞之间外,还可见其被吞噬于中性粒细胞胞质之内,因淋病奈瑟菌对各种理化因子抵抗力弱,涂片法可被漏诊,必要时可进行淋病奈瑟菌培养,且有利于菌株分型和药过敏试验。注意事项•检验前停用影响结果的药物•送检及时(阴道毛滴虫生长繁殖最适温度为25°C-42°C,故湿片送检过程中注意保温)•涂片厚薄适宜•生理盐水定期更换,防止污染•火焰固定以玻片贴手背不觉烫,火焰反复固定三次,染液和生理盐水要新鲜、无污染,脱色干净,冲洗防止涂膜脱落,严格按染色操作规程,熟悉所检病原体的形态特征等诸方面的培训和实践•真菌检查时的光线不能太强•报告方式统一:清洁度分级报,滴虫、真菌按+/-报