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真菌荧光染色液FungalFluorescenceStainingSdution江苏莱芙时代生物科技有限公司LIFETIMELIFETIME1疾病介绍2诊断方法3产品介绍4图文对比目录P03P18P31P125专家评价P57疾病介绍1疾病介绍LIFETIME真菌广泛存在于自然界，而致病性真菌约有400余种。随着器官移植的大量开展及免疫抑制剂、肿瘤患者化疗药物、糖皮质类固醇激素的广泛使用，人类免疫缺陷病毒感染的高流行趋势、体内有创检查的大量开展，人口老龄化和糖尿病等慢性疾病患者的增多，真菌发病率和死亡率逐年增加，对人类健康的危害日趋严重。由于临床对很多真菌感染的微生物特性了解较少，加之真菌感染的临床表现多种多样，通常会出现误诊、漏诊，导致病情加重甚至危及生命。这就需要确实有效快速的早期诊断方法。浅部真菌感染•主要引起皮肤、黏膜的真菌感染•侵犯皮肤、黏膜、毛发、指甲•慢性，对治疗有顽固性•繁殖能力和传染能力强深部真菌感染•侵害人体内脏、皮下组织，引起全身感染•可侵犯全身内脏，严重的可引起死亡，临床上危害很大。•侵袭性真菌病LIFETIME真菌感染分类浅部真菌感染1.1常见的浅部真菌病皮肤癣菌病马拉色菌毛囊炎甲真菌病念珠菌病等等浅部真菌病面癣体癣（犬小孢子菌）头癣浅部真菌病案例深部真菌感染－侵袭性真菌病1.2•定义：深部真菌病是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜和内脏，感染器官所引起的感染性疾病，其中以白色念珠菌为主。•致病特点：慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死。•深部感染致病真菌较常见的有念珠菌、曲霉、隐球菌、组织胞浆菌、肺孢子菌、毛霉、马尔尼菲青霉及镰刀菌病。念珠菌属对皮肤、黏膜、指趾甲及内脏均可侵犯。•导致条件性真菌感染增高的因素：HIV、肿瘤化疗、干细胞或器官移植、抗生素使用等。LIFETIME深部真菌病念珠菌：死亡率第一位，院内血源感染第四位。曲霉：死亡率高达60%-90%，第二位最常见深部真菌病。LIFETIME深部真菌病目前临床常用真菌诊断方法2•KOH湿片法直接镜检•真菌分离培养•血清学检查•分子生物学方法LIFETIME临床常用真菌诊断方法优点缺点成本低，易操作，仅需普通显微镜。真菌检测的金标准。依赖于检验人员的技术水平。背景杂质干扰导致阳性检出率低。1KOH湿片法直接镜检2分离培养法优点缺点漏检率低，可通过真菌的生物学特性来判断菌种，有利于指导用药所需时间长，少则1周，多则2～3周，操作要求高，易污染。目前对真菌感染血清抗原检查的方法主要有：1，G试验（Β－葡聚糖试验）2，GM试验（半乳糖甘露聚糖试验）3，隐球菌乳胶凝集试验，念珠菌乳胶凝集试验等3血清学方法优点缺点速度较分离培养更快，敏感性高，主要用于深部真菌感染诊断。1、不同方法适用于不同真菌，需要对原理和影响因素准确掌握；2、对采血时期和选择敏感的方法有很高要求；3、需要连续动态观察；4、可能会有假阳性。4分子生物学方法优点缺点特异性好，敏感度高，可以鉴定到种需要特殊设备，检测成本高，反应时间长，操作难度大，对检测人员要求高。产品介绍3【名称】：真菌荧光染色液（酶联荧光法）【规格】：200T【适用范围】：各类疑似真菌感染的临床样本【预期用途】：真菌荧光染色液是一款新型的快速检测真菌感染的产品，适用于各类临床样本组织中可能存在的各类真菌结合发出荧光，包括念珠菌，组织胞浆菌，曲霉菌以及各类地域性变异真菌菌丝。【有效期】：两年【储存条件】：常温、避光；切勿冷冻【厂家信息】：公司名称：江苏莱芙时代生物科技有限公司地址：江苏省泰州市陶弘景路12号6幢联系电话：0523-86200530莱芙特敏TM荧光染色法是一种利用重组几丁质酶来检测人体各种标本中是否存在真菌有形成分的方法。真菌荧光染色液中，经过特殊荧光素标联的重组几丁质酶可以高亲和力与真菌细胞壁上的几丁质结合并发出荧光，在荧光显微镜下可以清楚的观察到真菌形态。荧光染色法原理适用范围痰液、尿液毛发甲屑皮屑耳鼻喉科样本肺泡灌洗液妇科样本组织切片LIFETIME产品适用范围操作步骤或者组织切片脱蜡复水0175%乙醇消毒患者皮损部位，使用钝头刀从皮损的边缘向外刮取。如鳞屑量较少，可使用透明胶带法取材。0275%乙醇消毒病甲，从甲变色、萎缩或变脆的部位，健甲与病甲交界处取材，保证一定深度。对伴有甲沟炎患者取材，应采用棉拭子，75%乙醇局部消毒后，沾取损害分泌物。0375%乙醇局部消毒，选择无光泽毛发或毛囊口折断的毛发，用镊子将毛发从头皮处拔除，尽量保留毛根部。04口腔黏膜可用钝刀刮片或拭子取材，阴道黏膜可用拭子取材，一般不用浸湿。皮屑甲屑毛发黏膜取材方法05痰液标本取自病人清晨漱口后的第一口晨痰，标本存入无菌痰液容器中保存。02尿液标本取自病人的早上的第一次清洁尿，使用无菌容器收集保存，离心后取沉渣作镜检。03胸水及其他体液标本需要无菌采集于无菌试管中，离心后取沉渣作镜检。痰液尿液胸水及其他体液取材方法荧光染色法与KOH湿片法在真菌直接镜检中的应用比较2014年英国甲真菌病管理指南2014年英国甲真菌病管理指南荧光显微镜图文报告显微镜配置清单（CX31）显微镜配置清单（CX23）荧光染色照片4粪便标本痰液标本粪便标本荧光显微镜检查（×400）荧光显微镜检查（×400）荧光显微镜检查（×400）由北京大学第一医院提供真菌荧光染色和KOH染色效果对比图皮屑标本（×400）普通光源下紫外光光源下由复旦大学附属华山医院提供真菌荧光染色和KOH染色效果对比图甲屑标本（×400）普通光源下紫外光光源下由复旦大学附属华山医院提供黏膜标本（×400）普通光源下紫外光光源下由复旦大学附属华山医院提供同一视野，普通光源下孢子菌丝隐约可见，紫外光光源下见发荧光的孢子、菌丝普通光源下紫外光光源下（×400）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×400）荧光显微镜检查（×400）真菌显微镜检查（普通光+荧光染色）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×400）荧光显微镜检查（×400）真菌显微镜检查（普通光+荧光染色）由华西医院冉玉平教授提供B1B2荧光染色-荧光显微镜（×400）B1（白光光源）：病发内外可见孢子、菌丝？B2（荧光光源）：与B1同一视野，病发内外可见孢子、菌丝发出亮蓝色荧光。由华西医院冉玉平教授提供荧光染色-荧光显微镜（×400）B1B2荧光光源下，病发内外仍可见孢子、菌丝发出亮蓝色荧光由华西医院冉玉平教授提供荧光显微镜（×1000）B1（白光光源）：病发内外可见孢子、菌丝？B2（紫外光光源）：与B1同一视野，病发内外可见孢子、菌丝发出亮蓝色荧光。B1B2由华西医院冉玉平教授提供荧光染色-荧光显微镜（×400）B1B2荧光光源下，病发内外仍可见孢子、菌丝发出亮蓝色荧光由华西医院冉玉平教授提供荧光染色-荧光显微镜（×1000）B1B2荧光光源下，病发内外仍可见孢子、菌丝发出亮蓝色荧光由华西医院冉玉平教授提供荧光染色-荧光显微镜（×1000）B1B2荧光光源下，病发内外仍可见孢子、菌丝发出亮蓝色荧光由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×1000）荧光显微镜检查（×1000）真菌显微镜检查（普通光+荧光染色）由华西医院冉玉平教授提供光学显微镜检查自然光荧光皮肤镜：之字形发荧光染色-荧光显微镜检查辅助诊断头癣由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×400）荧光显微镜检查（×400）真菌显微镜检查（普通光+荧光染色）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×400）荧光显微镜检查（×400）显微镜检查（普通光+荧光染色）毛囊虫（+）真菌孢子（+）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×100）荧光显微镜检查（×100）显微镜检查（普通光+荧光染色）真菌孢子（+）毛囊虫（+）混合光源（×100）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×400）荧光显微镜检查（×400）双光源显微镜检查（×400）真菌显微镜检查（普通光+荧光染色）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜荧光显微镜检查双光源显示（×400）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×1000）荧光染色荧光显微镜检查（×1000）双光源显微镜检查（×1000）由华西医院冉玉平教授提供13899-0061孢子丝菌病普通光学显微镜检查（×1000）荧光显微镜检查（×1000）双光源显微镜检查（×1000）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×1000）荧光显微镜检查（×1000）双光源观察（×1000）由华西医院冉玉平教授提供普通光学显微镜检查（×1000）荧光显微镜检查（×1000）双光源观察（×1000）由华西医院冉玉平教授提供专家评价51、真菌镜检的技术瓶颈•KOH溶解角质需要加热，耗时。•受到细胞重叠、纤维等杂质干扰，菌丝难以辨认。•孢子与气泡、油滴、水滴相似，不易分辨。•美兰、Parker墨水染色不具有特异性。•需要长期经验积累，易出现假阳性和假阴性皮肤科真菌专家评价——华西医院冉玉平教授高特异性、高效率、高灵敏度•大大提高真菌阳性率，避免假阳性•显著缩短真菌镜检时间•精准定位“真养性”，自信确认“真阴性”•变不可能为可能：真菌病快速出结果，可查见孢子丝菌病孢子•快速查毛囊虫•有助于研究真菌学形态•利于患者教育和提高依从性2、真菌荧光染色诊断－革命性技术皮肤科真菌专家评价——华西医院冉玉平教授真菌室专家评价——上海华山医院章强强教授真菌荧光染色液可适用于皮屑、甲屑、毛发、痰液、肺泡灌洗液、尿液胸水等各种标本。在荧光背景下真菌菌丝、孢子清晰可见，检测灵敏度大幅提高。特别是在KOH湿片法中，孢子与脂肪滴有时很难鉴别，而荧光染色法对脂肪滴不产生标记，易于鉴别，且特异性高，其能使少量真菌着染，弥补了传统的KOH湿片法在真菌数量少时检出率不高的不足，并且染色时间短，只需1min，结果直观。根据我们的数据统计与经验，荧光染色法在浅部标本与深部标本的检测中，与KOH湿片法比较有较大优势。北京大学第一医院上海复旦大学附属华山医院天津长征医院沈阳市第七人民医院中国中医科学院西苑医院航空总医院四川省人民医院天津市公安医院大连医科大学附属第一医院沈阳陆军总医院大连皮肤病医院中国医科大学附属第一医院国内使用“莱芙特敏TM真菌荧光染色液”标杆医院中国医学科学院皮肤病医院江苏省人民医院无锡市第二人民医院南通大学附属医院江西省皮肤病医院浙江省皮肤病医院河南省人民医院吉林大学第二医院陕西省人民医院西京医院哈尔滨医科大学附属医院河北省第四人民医院谢谢观赏