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复习回顾：准备好：课本、辅导书、学案8、9•1、动物细胞工程常用的技术手段有哪些？技术基础是？•2、动物细胞培养的概念、原理、条件？二氧化碳、氧气的作用分别是？培养基的成分有哪些？保证无菌、无毒的环境所采用的措施有哪些？•3、动物细胞培养过程中两次用到胰蛋白酶的作用？•4、动物细胞培养的应用有哪几个方面？•5、动物体细胞核移植的概念、种类、原理、应用？学案8讲评•对点训练1、4•课下作业3、7、8、9、10(1)(1)(2)(2)(3)(4)植物体细胞杂交过程示意图（1）（2）（3）（4）ABCDE分别表示什么？复习回顾ABCDEA一、动物细胞融合（细胞杂交）P521、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2、结果：形成单核的杂交细胞3、原理：细胞膜的流动性4、诱导方式物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒5、动物细胞融合过程使病毒失去感染能力，但不破坏其抗原结构6、意义7、应用不同DNA的两个细胞灭活病毒诱导细胞融合（使病毒失去感染能力，但不破坏其抗原结构）融合后的细胞进行有丝分裂5、动物细胞融合过程6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体1、抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？传统获得抗体的方法及缺陷？复习回顾：2、一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？如何获得大量的单一抗体呢？一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，但是不能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生抗体动物细胞融合技术杂交瘤细胞动物细胞培养技术单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞二、单克隆抗体（单个细胞分裂产生的细胞群体分泌抗体）1.设计思路阅读课本53—54页单克隆抗体的制备，结合图2—24，尝试描述单克隆抗体制备过程的简要步骤。注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合（只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体检验阳性细胞单克隆抗体注射到小鼠体内体外培养2、单克隆抗体的制备过程第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞。该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。杂交瘤细胞有何特点？产生多种B淋巴细胞2.诱导其融合的方法有哪些？3.怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点?原因？1.注射抗原的目的是什么?4.大量增殖杂交瘤细胞和获得单克隆抗体的方法?B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养基第一次筛选杂交瘤细胞（B-瘤细胞）克隆化培养专一抗体检测第二次筛选特定杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体2、单克隆抗体的制备过程(3).单克隆抗体的应用：课本54页a、单克隆抗体的优点：b、单克隆抗体的用途:①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合优点：准确、高效、简易、快速②用于运载药物：制成“生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗特异性强、灵敏度高、产量大一种诱导细胞融合的新方法一种新细胞灭活病毒杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞A2..动物细胞融合的目的中最重要的是----------------（）A.克服远缘杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新品种D.生产杂种细胞3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A.诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段基本相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成杂种细胞BD4.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成D5.实际操作中如何经过两次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞？有限稀释法稀释多次稀释将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。