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专题2细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术2.2动物细胞工程烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？（一）动物细胞培养的概念（P44）就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。一、动物细胞培养一、动物细胞培养（二）动物细胞培养的过程结合图2-16，阅读P44最后一段至P46第一段结束。1、找出关键词并理解它们的含义。2、叙述动物细胞培养的过程。细胞贴壁细胞的接触抑制原代培养传代培养细胞悬液3、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？动物细胞培养的基本原理是什么？不能。只能使细胞数目增多。原理：细胞增殖通常取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官因为其分化程度低、增殖能力强，更容易培养。说明细胞与细胞间的主要物质是蛋白质1.动物细胞培养对培养的材料有要求吗？3.用胰蛋白酶处理，组织就会分散成单个细胞，说明了什么？2.为什么在培养前要将组织分散成单个细胞？分散后能与培养液充分接触，更易进行物质交换。4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。5.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？保存10代以内的细胞，保持细胞正常的二倍体核型。1．根据动物细胞培养的过程，思考下列问题：(1)为什么幼龄动物组织比老龄动物组织更易培养？培养前为什么要将动物组织分散成单个细胞？(2)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶作用的对象有何不同？(3)如何区分原代培养和传代培养？如何界定细胞株和细胞系？（三）动物细胞培养条件能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？1、无菌、无毒的环境对培养液和培养用具进行无菌处理；在培养液中添加一定量的抗生素;定期更换培养液；2、营养葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等动物血清、血浆3、温度和pH温度36.5±0.5度，pH7.2～7.44、气体环境O2和CO2（95%空气和5%CO2）O2是细胞代谢所必需的。CO2维持培养液的pH。（四）动物细胞培养技术的应用阅读P46-474．应用(1)生产生物制品：如疫苗、干扰素、等。(2)应用于基因工程：动物细胞是基因工程技术中常用的__________，离不开动物细胞培养。(3)检测，判断某种物质的毒性。(4)用于等方面的研究，如筛选抗癌药物等。病毒单克隆抗体受体细胞有毒物质生理、病理、药理获得细胞或细胞产物细胞的全能性原代培养、传代培养脱分化、再分化培养过程获得新的植株或组织培养结果葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较复习：2、叙述动物细胞培养的过程。5、动物细胞培养的条件。1、动物细胞工程常用的技术手段有哪些？3、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？专题2细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术2.2动物细胞工程动物体细胞核移植技术回忆克隆羊“多莉”的培育过程卵细胞Ａ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠融合后的卵细胞2、克隆动物能否用类似植物组织培养的方法获得？为什么？目前不能。因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。目前，用动物体细胞克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。1、什么是克隆？克隆就是无性繁殖，具体地说，是指一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。（一）动物核移植的概念（P47）是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，这个过程即为动物细胞核移植。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。二、动物体细胞核移植（二）动物核移植的类型（P47）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植：胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易；动物体细胞分化程度高，恢复其全能性较困难，移植难度明显高于前者。二、动物体细胞核移植（三）体细胞核移植的过程二、动物体细胞核移植根据图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。供体细胞培养（MⅡ卵母细胞）减数第二次分裂中期将供体细胞注入去核卵母细胞核移植胚胎移植１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？为使核移植动物的核遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。２、为什么为什么选用MⅡ期的卵母细胞？讨论：3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。不是卵母细胞体积大，易操作；其细胞质中含有促使细胞核表达全能性的物质和营养成分，更易支持胚胎的全程发育，用它作受体更容易成功。4、克隆动物的遗传特点？1、克隆动物的性状与细胞核供体生物的性状基本相同，但不完全相同，因为：讨论：①克隆动物的细胞质遗传物质来自于受体卵母细胞的细胞质②生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境影响2、核移植属于无性繁殖，克隆动物基因型不会改变，因为：核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核遗传物质与供体相同（三）体细胞核移植的过程（图2-21）二、动物体细胞核移植（四）动物细胞核移植的原理二、动物体细胞核移植动物细胞核的全能性（五）体细胞核移植技术的应用前景二、动物体细胞核移植1、畜牧业方面：2、医药卫生方面：可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。保护濒危物种，增加其存活数量生产医用蛋白质组织器官的移植3、其他领域了解胚胎发育及衰老过程更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病异种移植供体（六）体细胞核移植技术存在的问题二、动物体细胞核移植1、成功率低2、克隆动物存在健康问题3、克隆动物食品的安全性问题争议【例题1】下列对动物核移植技术的描述不正确的是（）A．哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植B．体细胞核移植的过程中可通过显微操作去核法去除卵母细胞中的核C．体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞D.通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制D【例题2】下列有关体细胞核移植技术的说法不正确的是（）A.体细胞核移植技术在多种动物中获得了成功，成功率非常高B.克隆技术的各个环节有待于进一步改进C.大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题D.克隆动物食品的安全性问题仍然存有争议A(4)该实验的成功说明了__________，已分化的耳朵细胞的细胞核中含有与_____一样的全套基因，这种繁殖方式属于_______________。(5)若研究发现该高产奶牛线粒体发达，故它的产奶量高，则小牛d成年后具有这一优良性状吗？_______。你的依据是_____________。【例题3】美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛，年产奶量达30.8t，我国奶牛产量年平均水平仅为3～4t。某人用该高产奶牛的耳朵细胞，采用核移植技术获得高产奶牛(如图)。(1)目前完成①的普遍方法是_________________________。(2)③过程中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是_________(3)④过程所利用的技术是___________，其原理是____________。