两虫如何提高回收率

3980-001©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.隐孢子虫和贾第鞭毛虫培训班如何提高回收率3980-002©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.取样流速控制在1-2L/min清洗容器应使用纯水，不要使用清洁剂3980-003©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.样品浓缩离心机应放在牢固的工作台或地板上，尽量减少晃动离心管连同适配器一起配平，保证误差在0.5g以内，尽量减少摆动离心机设定2000g离心力，工作时间15分钟离心机应选用无刹车系统的（自然停止大约需7分钟）3980-004©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.吸取上清液需要一个蠕动泵也可选用真空泵，最大真空度小于3.3kPa流速控制在200ml/分钟(+/-20ml)应在管进口处装一个移液枪头(例如：5ml移液枪头)来减少进口的真空力度最终留有5-8ml液体(可以预先在需要体积处做好标记)枪头口应该在离心管中心接近液面处吸取上清，以减少沉淀的损失3980-005©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.从离心管内移出液体从离心管吸出所有液体前应先用淘洗液润洗移液管，避免目标菌贴壁加入磁珠前应先涡旋搅拌20秒钟用纯水充分冲洗离心管壁，冲洗两次。例如：如果转移上清液体积为7ml,则进行两次冲洗，每次使用1.5ml纯水每次冲洗后都要涡旋20秒再移出液体3980-006©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.免疫磁分离加入100ul两虫磁珠时需注意：放在搅拌机上搅拌15秒，并且确保底部没有剩留磁珠把L10管放在DYNALMX1混合器上室温15-20RPM转速孵育1小时，此过程不可以停止，如果停止则需要重新定时孵化1小时当L10管放在磁极上呈90度角转动时此动作一定不要过快将L10管内的混合物用1xSLBufferA冲洗两-三次，总体积为1ml，混匀，然后转移到1.5mlEP管中（如果是多个管一起时，要马上加入1xSLBufferA，以免磁珠变干）将MPC-S磁极保持180度转动1分钟，吸出上清液。注意：包括盖子里面的液体也要吸出，完成一个后要摇匀后再吸第二个3980-007©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.酸解使用标准配置的溶液对配置的溶液进行常规的校准，以保证所使用的部分达到正确的中和移液枪在使用之前应校准，以保证移取的体积准确所有的这些步骤都是为了防止酸解离过程中pH不平衡3980-008©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.样品干燥建议样品自然过夜干燥样品应该干燥完全尽量避免使用温箱干燥玻片，除非温箱温度可以准确控制在35˚C(+/-2˚C)3980-009©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.染色应加50μl无水甲醇到玻片上，直至风干完全免疫荧光染色过程应在一个潮湿的容器中，请按照操作手册进行应按照规定准备好所需DAPI试剂免疫荧光染色和DAPI染色后,请务必用PBS(pH7.4)或者染色试剂盒提供的缓冲液冲洗玻片，以除去多余的染料3980-0010©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.可中断的过程及保存时间样品分析步骤最大允许中断时间样品采集、过滤、淘洗72小时离心一个工作日免疫磁分离转移至载玻片样品干燥72小时染色镜检7天（但需封片保存，并放置在避光处）3980-0011©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.Filta-Maxxpress两虫快速法设备维护3980-0012©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.每个样品淘洗完用酒精擦洗QC干体根据《生活饮用水卫生标准》中规定清洗分流调节器和滤器。即用6%次氯酸钠浸泡半个小时后用纯水冲洗干净，晾干待用3980-0013©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.每批样品淘洗前、后请一定用纯水代替淘洗液，按照淘洗步骤清洗设备内部管路3980-0014©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.每天维护用酒精或者实验室消毒剂擦拭仪器内部及内部表面注意：此时空气压缩机需关闭，记得擦拭离心管座及下面的区域3980-0015©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.每月维护注意：如果您一周或者更长时间不使用淘洗装置时，应按以下方法进行清洁所需工具3980-0016©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.使用提供的小六角扳手将淘洗装置的顶盖（红褐色盖子）移开3980-0017©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.使用提供的大六角扳手，将压力舱盖子上4个内六角头螺丝（见下图）拧松3980-0018©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.使用提供的角螺丝刀（绿色把手），找到位于压力舱和压力舱盖子之间的凹痕，撬开盖子3980-0019©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.使用分析乙醇或者6%的次氯酸钠擦拭压力舱内部和压力舱盖子，然后用纯水再擦一遍。3980-0020©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.使用高真空润滑脂润滑压力舱盖子上的O形圈。3980-0021©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.将压力舱盖子放回原处，小心不要损坏O形圈；拧紧四个内六角头螺丝，并将淘洗装置的顶盖安装回原处3980-0022©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.按照清淘洗的步骤，用纯水进行一次或多次淘洗循环。注意：如果您一周或者更长时间不使用淘洗装置时，应按上述方法进行清洁。3980-0023©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.Filta-Maxxpress两虫快速法设备长期不使用如果设备超过一周不使用，需要将设备管路里的水排出、控干3980-0024©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.需要准备：3980-0025©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.将滤芯放在滤器中并连接分流调节器3980-0026©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.将其连接到淘洗设备内3980-0027©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.将离心管放入设备内3980-0028©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.用纯水替代缓冲液按F1完成2遍淘洗，彻底清洗管路内部，将缓冲瓶内纯水倒掉并拧紧盖子3980-0029©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.按F1当进行第2或第3个步骤时按下急停按钮注意：有时设备显示屏会显示“HighFlowError”.此时是由于管内的液体已经被空气所代替。按下紧急按钮“E-Stop”3980-0030©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.管路里的水已经被收集在离心管中，将离心管取出3980-0031©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.Filta-Max手/自动法两虫快速法维护3980-0032©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.维护每次使用前，请检查所有的O型环是否有磨损或者损坏—如有需要请联系爱德士技术人员每次使用前，使用高真空硅油对活塞头O型环进行润滑润滑其他所有的O型环（浓缩管、滤器）以保证它们处于良好状态3980-0033©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.Filta-Max自动法设备维修在移开任何面板或者保险丝盒之前，请确认电源处于断开状态更换保险丝注意：双极/中性保险丝更换保险丝前请拔掉电源线。保险丝位于保险丝盒内，保险丝盒位于电源接口附近（安装在面板后面），使用小的平叶片或者螺丝起子将标签锁松开，打开保险丝盒。保险丝盒会部分弹出来并露出保险丝。这两个保险丝是5mm×20mm，玻璃的，型号2-Amp250V，商标“GMC”BUSS延时断路保险丝。3980-0034©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.清洗淘洗装置--Filta-Max自动法设备在清洁仪器前，请确认拔掉电源线。使用温和的洗涤剂擦拭所有的部件/表面，不要用软管或者高压水冲洗或者浸泡，可用清洁剂瓶手动喷洒清洗不要喷洒后面的面板—它的通风口直接连接到里面的电气元件，后面的面板只能用湿布擦拭3980-0035©2005IDEXXLaboratories,Inc.Allrightsreserved.清洁filta-max手/自动法设备其他配件Filta-Max系统的配件都可以用温水或实验室洗涤剂清洁，清洗完后，用纯水擦拭所有的部件，并干燥。重新润滑所有的O型圈警告—不能使用高压灭菌锅对Filta-Max手/自动设备的任何配件进行灭菌管件暴露在高温下会容易变形以及不透明。若淘洗管变形或变不透明请及时更换新的配件以免造成两虫挂壁，影响回收率