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尿生成的影响因素及药物对尿生成的影响实验目的1.掌握输尿管插管技术，学习尿量的记录和测量方法；2.观察神经体液因素及药物对尿生成的影响，并分析其作用机制。实验原理尿生成的过程包括：肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌。凡是影响尿生成过程的因素均可引起尿量的改变。尿生成的调节包括肾内自身调节、神经调节、体液调节。本实验分别对实验动物施加不同因素，观察尿量及其成分的变化。尿生成的生理基础肾小管肾小体肾小囊肾小球远端小管近端小管髓袢细段近端小管直段近曲小管髓袢升支细段髓袢降支细段远曲小管髓袢升支粗段肾单位原理：终尿生成＝滤过液（原尿）－重吸收量＋分泌（比较少，可不考虑）有效滤过压＝毛细血管压－胶体渗透压＋囊内压凡能影响上述过程的因素都可影响尿的生成，从而引起尿量的改变有效滤过压＝毛细血管压－胶体渗透压＋囊内压本实验用两道同步记录1道记录血压2道记录尿量实验对象：家兔实验器材和药品RM-6240多道生理记录仪、压力换能器、兔手术器械1套、刺激电极、膀胱插管、尿液记滴器、生理盐水、20%葡萄糖、1：10000肾上腺素、抗利尿激素、呋塞米、0.5%肝素、25%乌拉坦、尿糖试纸步骤（一）麻醉、固定（25％乌拉坦4ml/kg）（二）颈部手术1．做颈部切口，逐层分离皮肤、皮下组织、肌肉（钝性分离），暴露气管。2．气管插管。3．分离右侧迷走神经，穿线备用。4．分离左侧颈总动脉并行动脉插管，描记动脉血压。（三）尿液收集方法：输尿管插管在耻骨联合上缘作4～6cm正中切口，用湿生理盐水的纱布衬垫后，将膀胱翻至体外（勿使肠断外露，以免血压下降）。在膀胱底部找出两侧输尿管，细心分离（莫损伤伴行血管），各穿两条线备用，分别将输尿管近膀胱端结扎，在结扎线的远离膀胱端剪开一个斜口（可先用玻璃分针探一下），把预先充满生理盐水的细塑料管向肾脏方向插入输尿管（1cm左右），用线结扎固定。手术完毕后用温生理盐水纱布将切口盖住。尿液收集方法：膀胱插管腹部剪毛，耻骨联合上方正中剪口3-5cm，沿腹白线剪开腹壁，将膀胱向尾侧移至体外，辨认膀胱和输尿管的解剖部位，用针筒抽取尿液6ml，装入两只试管。在膀胱顶部剪一丛行小口，插入膀胱插管，穿线结扎固定，（注意：结扎线不要堵住插管的两个入口，插管最好正对着输尿管在膀胱的入口处，不要紧贴膀胱后壁，以免堵塞输尿管。）用浸有38℃生理盐水的纱布覆盖创面。（四）连接换能器和记滴器动脉插管已连在血压力换能器，1道记录血压变化膀胱插管与记滴器相连，使膀胱内引流出的尿液滴在记滴器的两个电极之间，构成一个完整的电通路，2道记录通道会记录下来一次尿滴。观察项目手术和实验装置安装完毕后，记录正常血压和尿量曲线，然后依次进行下列实验，观察血压和尿量的变化。1.记录正常血压、尿量。2.取尿液做尿糖定性实验。从记滴器下方接一滴尿于尿糖试纸上，放置20~30秒，对比试纸颜色和标准颜色。3.按10ml/Kg静脉快速输入生理盐水，观察血压和尿量变化。4.静脉注射抗利尿激素2U，观察血压和尿量变化。5.静脉注射20%葡萄糖（4ml/Kg），5min内注完，观察血压和尿量变化。在尿量明显增多时，取尿做尿糖定性实验。6.静脉注射1：10000肾上腺素0.2~0.3ml，观察血压和尿量变化。7.静脉注射呋塞米5mg/Kg，观察血压和尿量变化。8.切断右侧迷走神经，用阈上刺激连续刺激其外周断，使血压降至50mmHg左右，观察血压和尿量变化。实验结果观察项目血压尿量10ml/Kg生理盐水抗利尿激素2U20%葡萄糖（4ml/Kg）1：10000肾上腺素0.2~0.3ml呋塞米5mg/Kg刺激右侧迷走神经结果分析一次快速注射10ml/Kg生理盐水，使血容量增加，会引起下列情况：（1）血液被稀释，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，肾小球有效滤过率增加，尿量增加。（2）血容量增加，肾小球血浆流量增加，使尿液滤过增多，也促使尿液增加。（3）血容量增加，刺激左心房及胸腔大静脉容量感受器，冲动沿迷走神经上传到下丘脑的视上核和室旁核，使抗利尿激素（ADH）的分泌与释放减少，远曲小管，集合管对水的重吸收减少，尿液增多。结果分析抗利尿激素antidiuretichormone，ADH来源：下丘脑视上核和室旁核神经元分泌，神经垂体贮存、释放作用：①提高远曲小管和集合管对水的通透性；②增加髓质组织间液的溶质浓度机制：ADH→V2→GS→AC→cAMP→PKA→使AQP-2镶嵌在管腔膜上形成水通道，增加水的重吸收结果分析20%葡萄糖4ml/Kg注入后，可见尿量立即大量增加因为加入后肾中滤过的葡萄糖超过了肾的肾糖阈，经肾小球滤出的大量葡萄糖不能被肾小管上皮细胞全部重吸收，致使小管液中出现较多的葡萄糖，使肾小管液中的渗透压增加，防碍水的重吸收，于是水随葡萄糖一起排出，尿量增加。此称为渗透性利尿。此时尿液作生化实验，可检测出尿糖。结果分析静注大剂量肾上腺素后，血压上升（使与外周小动脉平滑肌中的α受体相结合，使之收缩）尿量减少机制：肾小球毛细血管血压高低既受全身动脉血压的影响，又受肾小球入球小动脉和出球小动脉的口径比例（也就是血管平滑肌舒缩程度）的影响，而后一种因素比前一种因素更为重要。可使肾小球入球小动脉收缩，，使肾小球毛细血管中血流量降低，滤过率减少，尿量减少。因此在临床上抢救休克病人，使用大剂量的肾上腺素时一定要注意患者尿量的变化。髓袢升支粗段:对水不通透小管液上皮细胞血液2Na+3K+钠泵K+K+、Na+2Cl-Mg2+Ca2+呋塞米K+Cl-Cl-结果分析皮质髓质原尿髓质高渗尿液稀释尿液浓缩结果分析刺激迷走神经心输出量减少尿量减少迷走兴奋思考题：1.试分析尿生成的主要环节，讨论各因素影响尿生成的机制。2.一次性口服大量清水和静脉大量生理盐水时，尿量变化有何异同？其作用机制如何？