实验动物学 总结2

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1.定购实验动物时需要了解:品种,品系,近交系、封闭群,级别,包装,年龄、体重,性别2.生命科学研究必备的四大支撑条件AEIR:动物animal,设备equipment,信息information,试剂reagent3.实验动物是指经人工培育的、遗传背景清楚、对其携带微生物和寄生虫实行控制、用于科学实验、教学、检定及药品、生物制品生产的动物。4.实验用动物(experimentalanimals)包括:实验动物(Laboratoryanimals),家畜(Farmanimals),野生动物(Wildlifeanimals),伴侣动物(Pets)5.实验动物学是研究实验动物及其应用的科学,以生物学、动物科学、动物医学、医学、药理学、毒理学等学科为基础,综合发展形成的一门覆盖面极广的边缘学科。6.实验动物科学内容:实验动物、实验动物医学、比较医学、动物实验7.1988年,国家科委发布《实验动物管理条例》;1996年10月,《北京市实验动物管理条例》出台8.实验动物科学发展趋势:基因修饰技术运用,实验动物福利,“3R”原则,实验动物商品化、社会化,SPF动物广泛应用9.实验动物福利:实验动物的一种康乐状态。在此状态下,其基本需求得到满足,而痛苦被减至最小。10.实验动物五项基本福利一,提供适当的清洁饮水和保持健康和精力所需要的食物,使动物不受饥渴之苦二,提供适当的栖息场所,能够舒适地休息和睡眠,使动物不受困顿不适之苦三,做好防疫,预防疾病和给患病动物及时诊治,使动物不受疼痛、伤病之苦四,保证拥有良好的条件和处置(包括安乐死),使动物不受恐惧和精神上的痛苦五,提供足够的空间、适当的设施以及与同类动物伙伴在一起,使动物能够自由表达正常的习性11.动物实验需要考虑实验动物伦理的几个环节:实验目的确定和必要性评估实验设计遵循3Rs原则实验操作过程避免或减轻动物疼痛及恐惧日常饲养及护理安乐死12.《关于善待实验动物的指导性意见》CRO:ContractResearchOrganization:Clinicaltrial&PreclinicalresearchAAALAC认证(国际实验动物管理评估和认证协会)软硬件要求实验动物微生物与寄生虫控制•按微生物控制程度分类1.普通级动物(ConventionalAnimal,C.V)2.清洁级动物(CleanAnimal,C.L)3.无特定病原体动物(SpecificPathogenFree,SPF)4.无菌动物(GermfreeAnimal,G.F)普通级动物:饲养在普通环境中,不携带人畜共患病和动物烈性传染病病原体的动物。应排除的病原体:鼠痘病毒,流行性出血热、狂犬病、猴B病毒,沙门氏细菌、志贺氏细菌、结核分枝杆菌,皮肤真菌,弓形体等(如鼠肝炎)清洁级动物:饲养在屏障环境,除普通级动物应排除的病原体外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。无特定病原体动物:饲养在屏障环境,无特定病原体的动物。无菌动物:饲养在隔离环境,体内外无任何可检出的生命体已知菌动物:动物体内外所携带的生命体是已知的,也可叫已知菌动物。悉生动物是由无细菌动物植入已知细菌而得到的。广义的悉生动物包括:无菌动物(GermfreeAnimal)单菌动物(MonognoxenicAnimal)双菌动物(DignoxenicAnimal)多菌动物(PolygnoxenicAnimal)实验动物遗传性控制1.按遗传学控制分类:近交系、封闭群(远交群)、杂交群2.近交系(InbredStrain):经连续20代以上的全同胞兄妹交配或亲子交配,近交系数大于99%,品系内所有个体都可追溯到第20代或以后代数的一对共同祖先。近交系数:群体中某个体通过遗传携带两个同源等位基因的概率。近交系命名:BALB,DBA,TA1,C3H等3.亚系(Substrain):由同一个近交系分离出来的有不同特性的分支,这些分支间有遗传差异,称为该品系的亚系。亚系的形成原因:兄妹交配20-40代时形成的分支;主要原因是残留杂合某分支与其他分支分开繁殖超过100代;主要原因是突变发现一个分支与其他分支的差异。原因为残留杂合、突变或遗传污染4.亚系命名:在品系名称后加一道斜线(/),斜线后标明亚系的符号,亚系的符号可以是以下三种•数字,如DBA/1、DBA/2等。•培育或产生亚系的单位或人的缩写英文名称,第一个字母用大写,以后的字母用小写。使用缩写英文名称应注意不要和已公布过的名称重复。例如:A/He,表示A近交系的Heston亚系;CBA/J,表示由Jackson保持的CBA近交系的亚系。•当一个保持者保持的一个近交系具有两个以上的亚系时,可在数字后再加保持者的缩写英文名称来表示亚系。如:C57BL/6J,C57BL/10J分别表示由美国杰克逊研究所保持的C57BL近交系的两个亚系。•作为以上命名方法的例外情况是一些建立及命名较早,并为人们所熟知的近交系,亚系名称可用小写英文字母表示,如BALB/c、C57BR/cd等。由于遗传污染形成的亚系,通常与原品系之间遗传差异较大,因此对这样形成的亚系应重新命名。例如由GLaxo保持的A近交系在发生遗传污染后,重新命名为A2G。5.近交系的动物个体具有相同的遗传组成和特性,因而对实验反应极为一致,只需用少量的动物,即可得到非常规律的实验结果;动物个体之间组织相容性抗原一致,异体移植不产生排斥反应;每个近交系都有各自鲜明的生物学特点。6.近交系的名称缩写近交系名称缩写名称C57BL/6B6BALB/cCDBA/2D2C3HC37.常用亚系符号N或NIH:美国国立卫生研究院J或Jax:TheJacksonLaboratoryHe:美国NCI的W.E.Heston博士An:美国国立肿瘤研究所(NCI)Jie:日本实验动物中央研究所Ola:英国牛津郡实验动物场8.近交系动物命名实例DBA/1fC57BL/6J:DBA:小鼠品系名,1:亚系名,f:表示代乳,C57BL:代乳母鼠品系名称,6:亚系,J:亚系名9.特殊类型的近交系(所有定义、命名)重组近交系(RecombinantInbredStrain)重组同类系(RecombinantCongenicStrain)同源突变系(CoisogenicInbredstrain)同源导入系(CongenicInbredStrain)•重组近交系(RI)定义:由两个近交系杂交后,经连续20代以上兄妹交配育成的近交系。命名:由两个亲代近交系的缩写名称中间加大写英文字母X。•重组同类系(RC)定义:由两个近交系杂交后,子代与两个亲代中的一个进行数次回交(通常2次),通过不对特殊基因进行选择的近亲交配而育成的近交系。命名:两个亲代近交系缩写名称中间加小写字母c。•同源突变系定义:两个近交系,除了一个指明位点等位基因不同外,其遗传基因全部相同的品系。命名:由发生突变的近交系名称后加突变基因符号(用英文斜体印刷体),二者之间以连接号分开。如:DBA/Ha-D•同源导入系定义:通过杂交、互交或回交等方式将一个基因导入到近交系中,所形成的新的近交系只在一个很小的染色体片段上的基因不同,也称同类系。命名:由以下三部分组成:a.接受导入近交系缩写名称;b.提供导入基因的近交系缩写名称并与a之间用英文句号分开;c.导入基因符号(英文斜体),与b之间用连字符分开。如:B10.129-H-12b,表示该同类系背景为C57BL/10,导入基因为H-12b,基因提供者为129。10.封闭群(ClosedColony)定义:以非近亲交配方式进行繁殖生产的实验动物种群,在不从外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上,称为一个封闭群,或叫远交群。命名:封闭群由2-4个大写英文字母命名,种群名称前标明保持者的英文缩写名称,第一个字母须大写,后面字母小写,一般不超过4个字母。保持者名称与种群名称之间用冒号分开。如N:NIH美国卫生研究院(N)保持的NIH封闭群小鼠;Lac:LACA英国实验动物中心(Lac)保持的LACA封闭群小鼠某些命名较早,又广为人知的封闭群动物,名称与上述规则不一致时,仍可沿用其原来的名称。如:Wistar大鼠,日本的ddy小鼠等把保持者的缩写名称放在种群名称的前面,二者之间用冒号分开,是封闭群动物与近交系动物命名中最显著的区别11.封闭群动物的特点:遗传组成具有很高的杂合性具有类似于人类群体遗传异质性的遗传组成具有较强的繁殖力、生活力和抵抗力突变种所携带的突变基因通常导致动物在某方面的异常,从而成为生命科学研究的模型12.常用封闭群动物昆明小鼠(KM)、NIH小鼠、ICR小鼠、Wistar大鼠、SD大鼠Hartley豚鼠日本大耳白兔、新西兰白兔、青紫蓝兔Beagle狗13.杂交群(Hybrids)定义由不同品系或种群之间杂交产生的后代杂交一代动物(F1代):两个不同近交系或种群杂交所生的第一代动物命名:雌性亲代名称在前,雄性亲代名称居后,二者之间以大写英文字母“X”相连,将以上部分用括号括起,再在其后标明杂交的代数(如F1、F2等)品系或种群的名称可使用通用的缩写名称例如:(C57BL/6XDBA/2)F1=B6D2F1,表示以C57BL/6为母系,DBA/2为父系杂交后生育的杂交一代,可简写为B6D2F1.14.F1动物的特征和应用:遗传和表型上的一致性:表型变异率低,对周围环境变化适应性较强,实验反应高度均一;杂交优势:具较强的生命力和对疾病的抵抗能力,寿命较长,适合于保存某些有害基因和长期慢性致死实验,也可作为代乳动物以及卵、胚胎和卵巢移植的受体;杂合的遗传组成:同时具有两个亲本品系的特点,可接受两个亲本品系的细胞、组织、器官和肿瘤移植。15.如何保持实验动物遗传稳定?严格的繁育制度,按期进行遗传监测常用实验动物小鼠(mice)1.小鼠的一般特性•性情温顺、胆小易惊,对外来刺激敏感•昼伏夜出,傍晚开始活跃•喜欢啃咬,非同窝雄鼠好斗•雄鼠可分泌醋酸铵臭气•白化小鼠怕强光•不耐饿、不耐热2.小鼠解剖学特点•门齿终身生长,需经常磨损来维持恒定•无汗腺,尾有四条明显的血管•胃容量小,约1-1.5ml•淋巴系统发达,外界刺激可使淋巴系统增生•雌性为双子宫,成Y型•有褐色脂肪组织,参与代谢和增加热能•雄鼠生殖器官中有凝固腺,分泌物在交配后凝固与雌性阴道和子宫颈内形成阴栓•雄鼠脾脏比雌鼠明显大,可达到50%大鼠(rats)1.大鼠的一般生物学特性•性情温顺•嗅觉发达,味觉很差,对营养缺乏非常敏感(特别是VA)•喜安静环境,噪音对其繁殖影响很大•对环境中的粉尘、氨气和硫化氢等极为敏感,会引起肺大面积坏死•对湿度极为敏感,太低易致环尾症2.大鼠解剖学特点•门齿终生生长,需磨损维持其恒定;•食道与十二指肠相距很近,胃中有一条皱折,收缩时会堵住喷门口;•肝脏再生能力强,无胆囊,来自各叶的胆管形成总胆管,开口于十二指肠的乳突;•汗腺极不发达。•肺结构特别。左肺为1个大叶,右肺分成4叶•心脏和外周循环与其他哺乳动物不同。心脏的血液供给既来自冠状动脉,也来自冠状外动脉•无扁桃体•眼角膜无血管•有棕色脂肪组织3.生理学特点•寿命为3-3.5年•2月龄时性成熟,为全年多发情动物•妊娠期19-23天•不能呕吐4.大鼠在生物医学中的选择应用•生理学研究•营养学研究•药理学和毒理学研究•肿瘤研究•环境污染与人类健康的研究•口腔医学研究•心血管疾病研究豚鼠1.豚鼠的一般生物学特性•草食性•胆小、温顺、对外界刺激极为敏感。不伤人,不打斗,喜欢安静、干燥、清洁的环境•喜群居,有专制型社会行为,1-2雄鼠处于统治地位•听觉发达,能识别多种不同的声音,当有尖锐的声音刺激时,常表现耳廓微动,称为普莱厄反射或听觉耳动发射•有食粪癖,食软粪补充营养,幼子从母鼠粪获取正常菌丛2.豚鼠解剖学特点•耳蜗网发达,听觉敏锐,音域广•上唇分裂,嚼肌发达•胸腺在颈部,位于下颌骨角到胸腔入口之间•盲肠极大,占腹腔容积三分之一•阴茎端有两个特殊的角形物,呈圆锥状•雌性有阴道闭合膜,一对乳腺3.豚鼠生理学特点•性成熟早,雌鼠30-45日龄,雄鼠70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