第04章 定量分析样品前处理与分析方法验证复习大纲 (1)

1本章主要学习目的：1、掌握滴定度的定义和计算；2、掌握氧瓶燃烧法；3、熟悉UV、HPLC及GC的定义和特点；4、了解有机破坏的分析方法；5、熟悉测定方法的效能指标。第四章药物定量分析与分析方法验证2药物含量分析的方法：P143•一、容量分析方法•二、光谱分析方法•三、色谱分析方法第一节定量分析方法的分类和特点3•1、滴定度•2、滴定度（T）的计算•3、标示量指该剂型单位剂量的制剂中规定的主要成分含量。通常在该剂型的标签上表示出来，规格mg/片。第一节定量分析方法的分类和特点一、容量分析法P1444（一）紫外分光光度法P147•基于物质分子对紫外光区（波长为200～400nm）和可见光区（波长为400～800nm）的单色光辐射的吸收特征建立的分析测定的方法。•测定原理利用朗伯-比尔定律（Lambert-Beer)。•尽量控制吸收度A（0.3—0.7）。二、光谱分析法（spectrumanalysis）（二）荧光分析法P151•根据物质受紫外光或可见光照射激发后发射出比激发光波长长的光，即荧光。5三、色谱分析法P152定义：1、色谱法的特点(1)高专属性、(2)高效能与高速度、(3)高灵敏度第一节定量分析方法的分类和特点63、色谱法的分类①按物理状态分类②按分离方式分类③按分离原理分类三、色谱分析法P1527（一）高效液相色谱分析（HighPerformenceLiquidChro-matography，HPLC）定义：适用对象：对于稳定性差、相对分子质量大(400以上)、沸点高的物质分析。三、色谱分析法8（2）色谱柱（正相色谱和反相色谱）★★★正相分配色谱用极性物质作固定相，非极性溶剂(如苯、正己烷等)作流动相（宜于分离极性化合物）；★★★反相分配色谱用非极性物质作固定相，极性溶剂(如水、甲醇、己腈等)作流动相（宜于分离非极性或弱极性化合物）。（一）高效液相色谱分析HPLC9（3）检测器常用的检测器有：紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器、蒸发光检测器、差示折光检测器和质谱检测器。最常用的为：紫外检测器，优点：这种检测器对温度和流速不敏感，适宜于梯度洗提。缺点：不能用于对紫外-可见光完全不吸收的试样的检测。（一）高效液相色谱分析HPLC10通常包括理论板数、分离度（大于1.5）、重复性和拖尾因子（0.95-1.05）等四个指标。2、系统适应性试验（一）高效液相色谱分析HPLC11二、气相色谱分析（GasChromatography,GC）定义：适用对象：气相色谱法适用于分析相对分子质量较小、沸点较低、热稳定性好的物质，这些物质约占有机化合物总数的25%～30%。122、气相色谱检测器常用的质量型检测器有：氢火焰电离检测器(FID)、火焰光度检测器(FPD);常用的浓度型检测器有：热导池检测器(TCD)、电子捕获检测器(ECD).二、气相色谱分析（GasChromatography,GC）13含金属或卤素有机药物定量分析前的处理方法有两大类：1.不经有机破坏的分析方法经水解后测定法；经还原后测定法；2.经有机破坏的分析方法湿法破坏；干法破坏。第二节定量分析样品的前处理方法14（一）经水解后测定法一、不经有机破坏的分析方法本法主要适用于含金属有机药物或结合不牢固的含卤素等药物的分析。1、酸水解后测定法硬脂酸镁与定量硫酸共沸、水解生成硬脂酸和硫酸镁，剩余的酸以氢氧化钠滴定。Mg(C17H35COO)2+H2SO4MgSO4+2C17HCOOHH2SO4+NaOHNa2SO4+H2O第二节定量分析样品的前处理方法15二、经有机破坏的分析方法适用于金属原子与碳原子结合牢固的有机金属药物。（一）湿法破坏本法主要使用硫酸作为分解剂，常加入氧化剂作为辅助分解剂。第二节定量分析样品的前处理方法16（二）干法破坏适用于湿法不易破坏完全的有机物以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物。这里分为：a.高温灼烧法b.氧瓶燃烧法二、经有机破坏的分析方法17NaClHClOClCNaOH2溶液点燃适用于含卤素、硫、氮、硒等有机药物的分析。本法特点是简便、快速、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析。2、氧瓶燃烧法P162二、经有机破坏的分析方法（二）干法破坏18（1）仪器装置2、氧瓶燃烧法P162（2）吸收液的选择（3）样品制备19B.吸收液的选择样品吸收液产物吸收前状态含F含Cl含Br含I水水-NaOH水-NaOH-SO2水-NaOH-SO2水-NaOH+溴-醋酸HFHClHBr+Br2→BrHI+HIO3+HIO→I-HI+HIO3+HIO→HIO32、氧瓶燃烧法P16220（5）注意事项①充氧气要充分使样品燃烧完全,一般急速通氧气1~2分钟,燃烧完全时没有黑色炭化物。防护措施:戴防护眼睛；瓶外包湿毛巾②防爆21③吸收完全一般振摇30’,燃烧瓶看不到烟雾。Cl－、F－白色烟雾Br－棕色I－紫色2、氧瓶燃烧法P162（5）注意事项22溴-醋酸的作用：将碘化物全部转为碘酸盐。甲酸的作用：除去过量的溴.22COHBrHCOOHBr2、氧瓶燃烧法P16223验证的内容有:1.准确度2.精密度3.专属性4.检测限5.定量限6.线性7.范围8.耐用性第三节药品分析方法验证24（二）精密度（precision）1.重复性2.中间精密度3.重现性第三节药品分析方法验证25（九）验证内容的验证P1691、非定量分析方法：如鉴别试验和杂质的限度检查法（“专属性”、“检测限”、“耐用性”）；2、定量分析法：如原料药或制剂的含量测定及含量均匀度。溶出度或释放度的测定方法（除不需“检测限”、“定量限”外，其余6项都需验证）；3、微量定量分析法：如杂质的定量测定方法（除“检测限”外其余7项都需验证）。第三节药品分析方法验证26第四章本章作业•1、名词解释：滴定度、准确度、精密度。•2、GC的检测器有哪些类型？其系统适用性试验的四个指标分别是什么？•3、简述氧瓶燃烧法测定药物的实验原理。