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实验四放线菌和真菌形态的观察放线菌和真菌形态的观察•目的要求•实验材料•实验程序•思考题目的要求•学习观察放线菌和真菌形态的基本方法•加深理解放线菌和真菌的形态特征实验材料•放线菌和真菌培养物1.放线菌培养物：青色链霉菌（Streptomycesglaucus）或“5406”产生菌（St.microflacus）四天培养物。2.啤酒酵母（Saccharomycescervisiae）24至28h液体培养物或斜面培养物。3.黄曲霉（Aspergillusflavus）4d平面培养物。4.各种真菌示范片。•显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊子等。•乳酚油、碘液、酒精、蒸馏水等。实验程序Ⅰ•观察放线菌链霉菌的形态•观察酵母菌的形态•观察霉菌的形态•看录象实验程序Ⅱ（观察放线菌链霉菌的形态）•个体形态直接观察法：观察菌丝和孢子丝自然生长的性状，其中包括气生菌丝（较粗），基内菌丝（较细）和孢子丝的形状，如分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘图说明。•印片染色法：印片微热固定石炭酸复红染色1min水洗晾干镜检。（示范片）实验程序Ⅲ（观察放线菌链霉菌的形态）•插片染色法：280C插片培养4—6d，轻轻取出盖玻片，进行固定、染色、水洗、晾干、镜检。观察方法同“直接观察法”，观察基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的卷曲状况，及分生孢子的形状，绘图加以说明（本实验采用青色链霉菌接种后观察）。放线菌的形态•特征：丝状分枝、固体基质基内菌丝分生孢子孢子丝多细胞核气生菌丝“根”“枝”“花”多核、单细胞（细胞核之间没有分隔）“种籽”实验程序Ⅳ（观察酵母菌的形态）•观察酵母菌形态和无性繁殖：用高倍镜观察啤酒酵母的形态和出芽繁殖。•酵母肝糖染色法：在洁净的载玻片上滴一小滴路哥氏碘液（Lugol），取一环酵母菌液与碘液混匀，盖上盖玻片，镜检，菌体呈淡黄色，肝糖粒呈红褐色。在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、肝糖粒，并绘图。•酵母脂肪粒染色法：在洁净的载玻片上加一滴，取一环啤酒酵母与福尔马林混匀，静止5min，加1滴美兰染色液，10min后再加一滴苏丹Ⅲ染色液，盖上盖玻片，镜检。原生质呈兰色，脂肪粒呈粉红色，而液泡无色。（示范片）实验程序Ⅴ（观察霉菌的形态）•观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子）：在洁净载玻片中央加一滴酒精，用接剖针挑取黄曲霉培养物少许放入其中，再加入酒精和蒸馏水各一滴（重复一次），使分生孢子分散，便于观察。倾去酒精和蒸馏水，加一滴乳酚油（防止细胞变形和气泡产生，又可防止干燥以保持较长时间），盖上盖玻片，镜检、观察、绘图。•用同样方法制取青霉（Penicilliumsp.）封片，示范片，观察菌丝有无分隔和分生孢子梗、小梗、及分生孢子排列方式，并绘图。•用同样方法制取镰刀霉（Fusariumsp.）封片，示范片，观察孢子丝和着生部位的构造，并绘图。实验程序Ⅵ（观察霉菌的形态）•取黑曲霉（Rhizopusniger）5d平板培养物，用其皿盖，在低倍镜下观察菌丝体形态（假根、匍匐菌丝、孢囊梗及孢囊等）并绘图。更好的是采用载片培养法，可制成永久的封片，更便于保存。•做蘑菇切片。观察担子菌担子着生情况及其孢子的形态等，示范片，并绘图。•观察梨头霉（Absidiasp.）或根霉的接合孢子，示范片，并绘图。1.毛霉属2．根霉属（假根处分枝）3．镰刀霉属•镰刀—孢子囊形状呈镰刀形、长柱形、球形，有多细胞与单细胞之分。新月藻4．木霉属（又称绿霉菌）•木—分解纤维素和木质素的能力较强•分生孢子梗对生的或互生的分支，还可二级或三级分支。提问：用途？发酵产纤维素酶5．交链孢霉属•交链—孢子囊链式相连•单个孢子呈纺锤形，有横和竖的隔膜将孢子分隔呈砖壁状。霉腐、致癌、过敏性鼻炎6．地霉•——节孢子，单个或连接成链•应用：白地霉饲料•菌体蛋白营养价值高，可食用或作饲料；•处理酒糟废水思考题•在用放线菌菌苔直接观察气生菌丝和孢子丝的形态时，要注意些什么？•在制取酵母菌的水浸片时，要注意哪些要点？•制取酵母水浸片时为什么不用水，而用乳酚油？实验四结束