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第六章脱毒苗的获取及繁育技术脱毒苗的获取及繁育技术脱毒材料的获取花卉病毒的检测规程无毒体系的保持脱毒材料的获取热处理脱毒茎尖脱毒抗病毒药剂处理脱毒热处理脱毒带毒植株经高温处理后，病毒浓度会降低一种解释认为，由于高温，寄主细胞快速分裂，加剧了寄主细胞与病毒粒子对核酸和蛋白质合成的竞争，打破了病毒粒子合成与降解的平衡，从而减少了病毒粒子含量。另一种解释认为，在高温情况下，用于保护病毒核酸的外壳蛋白的亚基会变得不牢固，并出现暂时的裂缝，易使病毒核酸被降解，从而钝化了病毒活性并降低了病毒含量。热处理脱毒热处理的植株需含丰富的碳水化合物，可在事前对植株进行缩减。处理方法：把适当的材料移入一个热处理室或光照培养箱中，在35—40℃高温下，根据种类特征和材料情况处理数天到数周不等。可采用变温处理，即昼夜或隔日高低温交替处理的方法，来提高脱毒成功率。热处理脱毒局限性一方面并非所有的病毒都对热处理敏感，对大多数病毒而言，热处理只能部分降低植株内病毒的含量，故单独通过热处理难以获得无毒材料。另一方面热处理时间过长，会造成植株代谢紊乱，影响成活率，加大了品种变异的可能性。茎尖脱毒分生组织中不含病毒可能跟以下几点有关代谢活性高病毒的增殖依赖于寄主的代谢，由于分生组织具有很高的代谢活性，病毒无法控制寄主的代谢机制。无维管组织病毒是通过维管组织在寄主的组织中进行快速扩散的，由于分生组织中无细胞分化，那些存在于韧皮部的病毒(如PLRV)就不可能侵染分生组织，而侵染非韧皮部病毒也只能通过胞间连丝进行细胞间传播，但它的速度很慢，难以侵染快速分裂的茎尖细胞。高激素浓度植物的分生组织比其他组织的植物激素浓度高，可以抑制病毒的增殖。具体过程（以香石竹为例）影响茎尖脱毒的因素培养基选择正确培养基，可以显著提高获得完整植株的成功率。茎尖剥离体的大小在最适培养基条件下，茎尖剥离体的大小对其存活率的影响较大。一般被剥取的茎尖越大，越容易产生再生植株。但植株茎尖的脱毒效率与其大小呈负相关，因此被剥取的茎尖应该小到足以能够脱除病毒，但又能够发育成为一个完整的植株。培养条件茎尖的生理状态茎尖最好要从活跃生长的芽上切取取芽的时间抗病毒药剂处理脱毒茎尖培养结合抗病毒剂处理，是观赏花卉脱毒种苗规模化生产的较好选择用于植物脱毒的抗病毒药剂主要包括嘌呤和嘧啶类似物、氨基酸、抗生素等，这些药剂可在某种程序上抑制植物体内或离体叶片内病毒的合成，但尚不能完全抑制病毒使之失活在生产中使用病毒唑处理时特别应注意以下问题：病毒唑浓度处理时间茎尖大小变异测定花卉病毒的检测规程鉴别寄主检测法鉴别寄主的栽种机械接种症状观察ELISA检测无毒体系的保持原原种的无毒保持原原种的保持与扩繁可通过组培方式也可通过栽培方式进行原种的无毒保持采穗圃的无毒保持无毒优质种苗生产程序（图）原原种的无毒保持通过栽培方式进行应注意防虫温室单盆定植器具消毒清洁卫生定期喷药病毒检测原种的无毒保持原种在保持条件上，与原原种基本相同(如仍需防虫温室、基质灭菌、器具消毒、清洁卫生、定期药剂防除等)。仍有不同之处单系种植病毒抽测注：原种的繁殖不能无限制地进行，否则会造成植株退化，生活力下降。采穗圃的无毒保持采穗圃是整个无毒体系的主体之一，也是实现商品价值的重要环节。离地栽培适当稀植母本植株更新与基质消毒定期喷药病毒抽测香石竹脱毒的操作程序无毒优质种苗生产程序结束