2--血栓与止血实验的质量保证

血栓与止血实验的质量保证检测系统测定方法仪器校准物质控物检测方法试剂一、检测系统的选择检测系统选择原则用途经济条件来源技术支持维修能力仪器试剂配套敏感度高校准物质控物配套供货及时InternationalNormalizedRatioINR=ISIISI=InternationalSensitivityIndexPatientPTsecNormalPTsec(MNPT)()MNPT的确定方法标本：多份混合血浆（20份以上）年龄：18~55岁性别：男、女（非妊娠、非经期）各半药物的影响：激素抗生素口服避孕药降压药维生素采血前的要求：勿剧烈运动空腹或只服少量无脂类食物使用高敏PT试剂的优点举例:口服抗凝剂病人的同一份血浆用两种试剂测定ISI=1.0试剂ISI=2.0试剂PT正常平均12sec12secPT病人sec24sec16.9secPT病人INR(24/12)=2.0(16.9/12)=2.0当系统误差是(23/12)=1.92(15.9/12)=1.761秒时的INR(25/12)=2.08(17.9/12)=2.22INR分布范围1.92~2.081.76~2.221212第一代国际参考品，人脑，合成67/40（1976年）第一代国际参考品，牛脑，合成68/434（1978年）第一代国际参考品，兔脑，纯的70/178（1978年）第二代国际参考品，牛脑，合成，0BT/79（1983年）第二代国际参考品，人脑，纯的，BCT/253（1983年）第二代国际参考品，兔脑，纯的，RBT/79（1982年）第三代国际参考试剂（IRR），兔脑，纯的，RBT/90（1995年）第三代国际标准（IS），人脑，重组rTF/95（1996年）INR校准血浆来源：口服抗凝剂（香豆素类）病人血浆人工去因子血浆处理方式：冻干冷冻获得途径：中心机构厂商INR定值方法：直接用IRP或WRP测定多个实验室的INR均值二、仪器的校准（1）校准的概念测试和调整检测系统的过程校准程序文件的建立校准物溯源性校准方法何时进行校准负责人及其职责校准仪器加样器天平有校准物无校准物，有定值质控物何时进行校准？二、仪器的校准（2）离心机二、仪器的校准（3）新仪器在测定常规标本前要建立标准曲线，在更换试剂批号、仪器维修后等情况下应重新建立标准曲线无法定标的测定项目如APTT，可使用配套的定值质控物进行测定，测定结果应在允许范围内三、检测系统的性能评价精密度：批内、批间、日间线性可比性：NCCLSEP9文件抗干扰功能：NCCLSEP7文件加入干扰物的血浆测定值—未加干扰物的血浆测定值×100%未加干扰物的血浆测定值影响度血红蛋白对PT、APTT和Fbg测定结果的影响血红蛋白浓度（mg/L）项目046092013801840230027603220368041404600PT(s)12.812.812.812.912.812.812.913.013.013.113.1影响度(%)0000.8000.81.61.62.32.3APTT(s)28.929.229.429.029.329.229.129.429.428.929.3影响度(%)01.01.70.31.41.00.71.71.701.4Fbg(mg/L)25262526258024742508245824742408245825792492影响度(%)002.1-2.0–0.7–2.7–2.0–4.7–2.72.1-1.3四、室内质量控制目的质控物的选择：定值非定值靶值的确定允许限的确定至少20次测定结果的加权均值（均值±3SD）加权均值在允许范围内加权均值不在允许范围内以加权均值为靶值查找原因确定靶值的程序开始阶段均值±2SD警告限均值±3SD失控限半年以后计算平均CV平均CV乘以靶值得出平均SD均值±2SD警告限均值±3SD失控限允许限的确定五、参考范围的确定参考范围不是操作规程或教科书上订出的简单的固定的范围，而是随着仪器、试剂、年龄、性别以及环境等因素而变化的操作者应学会确定参考值的程序，以根据实际情况确定不同的参考值六、标本的采集真空采血管或注射器取静脉血塑料或硅化玻璃管收集标本用第二管血测定止血带造成血液淤积的时间在1分钟以内采血管加盖颠倒混匀防止肝素的污染六、标本的处理确认标本量：取血量与采血管标示的体积相差≤10%压积≥55%时,调整抗凝剂用量确认有无凝快溶血黄疸脂血离心条件：离心力时间抗凝剂的选择和使用用0.109mol/L的枸橼酸钠作为抗凝剂,全血与抗抗凝剂的比例为1∶9，对于严重贫血和红细胞压积明显增高（55%）的血液标本要调整抗凝剂的量C=1.8510-3(100-H)VC枸橼酸钠的毫升数H压积的百分数V取血量六、标本的保存取血后冷藏保存1小时内分离血浆，血浆在0~8℃保存4小时内完成测定4小时内无法完成测定时，在-20℃或-70℃保存七、测定过程中应注意的问题严格按仪器、试剂说明书的要求进行测定双份测定，取均值报告结果使用非配套试剂时，一般按试剂说明书的要求进行操作手工方法检测应注意的问题（1）恒温器的温度控制（37±1℃）秒表的准确性试剂复溶时水或稀释剂的加量要求准确试剂预温时间不可超过30分钟血浆预温时间不超过10分钟试管等接触血浆的器具均应为塑料或硅化玻璃器具手工方法检测应注意的问题（2）纤维蛋白形成的判别方法加样器的使用单个操作人员检测同一份标本的精密度不同操作人员检测同一标本的可比性Fbg含量大于4g/L时,应稀释血浆后重测低于0.8g/L时,应将血浆改为1∶2或1∶5稀释八、结果的报告PT秒数（s）比率（PTR）国际标准化比率（INR）：口服抗凝药物治疗检测时(预防静脉栓塞2.0~3.0)APTT秒数（s）比值（肝素治疗控制范围1.5~2.5)FbgPT导出纤维蛋白原测定法VonClauss法九、室间质量评价美国CAP的方法国内目前使用的方法存在的问题美国CAP的方法分组统计方法：同时根据使用试剂和仪器的类型进行分组靶值:加权均值评价指标:偏差你室结果—靶值偏差=————————×100%靶值AnalyteTargetValueEvaluationCriteriaPTPeerGroup±15%APTTPeerGroup±15%FbgPeerGroup*±20%国内开展室间质评的方法一般情况分组统计方法评价方法一般情况组织者参加者质评物的选择申请参加质评的程序质评物发放次数质评物发放数量回报表与评价结果的传输方式分组统计方法根据使用试剂和仪器的种类进行分组各组的实验室数在10个以上最近一次质评的分组情况DadeBehring试剂/Sysmex仪器DadeBehring试剂/除Sysmex仪器外的其他仪器IL试剂/IL仪器IL试剂/除IL仪器外的其他仪器Stago试剂/Stago仪器Stago试剂/除Stago仪器外的其他仪器Pacific试剂/各种类型仪器不使用IL、DadeBehring、Stago、Pacific试剂的实验室评价方法靶值：各组的加权均值评价指标：偏差评价标准：PT±15%APTT±15%FIB±20%存在的问题“试剂与仪器未配套组”特别是“其他组”的CV偏大检测异常质评物时,CV偏大一些实验室还未开展室内质量控制一些实验室Fbg回报结果的单位有误