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第十四章中药及其制剂分析概论中药及其制剂分析概论第一节概述中医阴阳五行脏腑经络辩证论治理法方药中医药基础理论用药原则中药制剂是以中药为原料，按中医药学理论基础配伍、组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂，一般又称为中成药。中药是以中医药理论体系的术语表述其性味、功效和使用规律，并且按中医药学理论指导其临床应用的传统药物。¾中药及其制剂的发展现状：Chp(2005年版)收载中药1146种(新增154种、修订459种)难以确定中药及其制剂的质量评价指标化学物质基础不清★药效物质基础不明作用机制不清现代分析技术在生产与质量控制中应用广泛1.质量不稳定性，影响因素众多中药制剂——药材、工艺、贮藏条件等中药材——生长环境、采收时间、贮藏条件等中药材生产质量管理规范GAPGMPGSP中药制剂的质量控制对各环节有很高要求益母草水苏碱营养期含量最高益母草碱营养期含量最低薄荷脑秋季叶变黄时含量最高丹参酮11、12月份含量最高麻黄东北→西北（-）麻黄碱含量↑（+）麻黄碱含量↓中药药效的发挥是多种成分协同作用的结果，因此应从整体上来控制中药的质量2.成分复杂，有效成分难以确定鞣质地榆（止血）其他（无药效）有效←→无效丸、散、片、锭、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等3.剂型繁多，辅料干扰大注：一般需要预处理（提取、纯化和浓缩）检验方法要求专属性强、灵敏度高、分离效率高1）化学成分的提取2）溶剂的选择3）提取工艺4.不同的提取方法对测定结果影响大例三黄泻心汤干浸膏有效成分与浓缩干燥方法的关系(%)常压减压逆浸透成分浓缩浓缩喷雾大黄酸葡萄糖苷41.151.696.8小檗碱34.537.594.5黄连碱6.312.093.7黄岑苷77.477.698.5丸散膏丹¾中国药典（2000年版）I部收载二十六种，按物态分为：口服液、胶囊剂、颗粒剂、注射剂等现代制剂技术的开发中药材及其炮制品液体制剂半固体制剂固体制剂中药材及其炮制品（饮片、提取物等）中药材及其炮制品的质控是中药制剂生产的首要环节现有研究基础较薄弱，难以建立真正有效的质控体系液体制剂1.合剂与口服液——汤剂的改进剂型•合剂是药材用水或其它溶剂提取，提取液经浓缩制成的内服液体制剂(口服液是单剂量包装的合剂)用药材提取物制备的液体制剂（无植物组织与细胞，故无显微鉴别）pH装量相对密度微生物限度一般检查项目2.酒剂与酊剂酒剂酊剂含乙醇量（GC）甲醇量检查（GC）总固体装量微生物限度一般检查项目药材用蒸馏酒提取制成的澄清液体制剂药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液体制剂3.注射液•以药材中提取的有效物质制成的可注入人体内的灭菌溶液、乳状液及供临用前配成溶液的无菌粉末或浓溶液•分析、质控与化学药品注射剂有同样要求半固体制剂（无植物组织与细胞，故无显微鉴别）药材提取液的浓缩液药材用水煎煮、去渣浓缩后，加炼蜜或糖制成的半流体制剂1.煎膏剂(膏滋)相对密度不溶物检查项目应无焦臭、异味，无糖结晶析出2.流浸膏剂与浸膏剂（半/固）1ml流浸膏——1g原药材1g浸膏——2~5g原药材•用适宜的溶剂浸出药材中的有效成分后蒸去全部溶剂，浓缩成稠膏状或块、粉状为浸膏剂蒸去部分溶剂，调整至规定浓度为流浸膏剂固体制剂1.丸剂•药材细粉或药材提取物加适宜的粘合剂或辅料制成的球形或类球形制剂药材提取物、药材粉末加赋形剂制备而成（有植物组织与细胞，可做显微鉴别）检查项目水分、重量差异(按丸或重量)装量差异(按一次剂量分装的)溶散时限2、散剂一种或多种药材混合制成的粉末状制剂，分内服和外用散剂检查项目均匀度水分装量差异3、颗粒剂药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂检查项目粒度水分溶化性装量差异4、片剂药材提取物加药材细粉或药材细粉与适宜辅料混匀压制而成的园片状或异形片状的制剂，分为浸膏片、半浸膏片和全粉片检查项目重量差异崩解时限原粉片≤30′浸膏片≤1h薄膜衣片≤1h5、胶囊剂硬胶囊剂软胶囊剂肠溶胶囊剂检查项目水分装量差异崩解时限¾提取方法：萃取法冷浸法回流提取法连续回流提取法水蒸气法超声提取法超临界流体萃取¾纯化方法：萃取法柱色谱法（一）提取方法1、萃取法两种互不相溶的溶剂正丁醇——用于皂苷类醋酸乙酯——用于黄酮类氯仿——用于生物碱类乙醚、石油醚——用于挥发油（1）萃取溶剂的选择（2）水相pH的选择酸性成分——比其pKa低1~2个pH单位碱性成分——比其pKa高1~2个pH单位（3）仪器和提取次数（4）酒剂和酊剂——先挥去乙醇（5）防止和消除乳化分液漏斗鉴别——1次含量测定——3~4次2、冷浸法样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间适宜易溶出的组分适宜遇热不稳定的药物费时（8~24小时）特点适用范围适宜植物性粉末不宜动物性粉末3、回流提取法样品置有机溶剂中加热回流加快溶出速度，省时适宜受热稳定的药物适宜较难溶出的组分特点仪器普通回流装置通过更换溶剂，使提取更完全4、连续回流提取法样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管节省溶剂，提高提取效率适宜受热稳定的药物费时特点仪器索氏提取器5、水蒸气蒸馏法适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油6、超声提取法超声波振荡器（超声波清洗器）简便省时提取率高利用超声波的助溶作用进行提取原理超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐射，出现“空化”现象（气泡的形成、产生及破裂现象），形成超过1000个大气压的冲击力连续回流提取超声波提取水蒸气蒸馏7.超临界流体萃取（SFE法）超临界流体是一种处于超临界点之上的流体，是介于气体与液体之间的一种物相，兼有气体与液体的一些特性，常用二氧化碳（TC＝31℃，PC＝7.39MPa）SFE工艺流程（1）它具有与液体相似的密度，因而具有与液体相似的较强的溶解能力；（2）溶质在流体中的扩散系数与气体相似，具有传质快，提取时间短的优点；（3）超临界流体的表面张力为零，易渗透到样品中，带走测定组分；与化学法萃取相比，SFE萃取的主要优点：（4）超临界流体在通常状态下为气体，萃取后溶剂可立即变成气体而逸出，易达到浓集的目的；（5）CO2是一种不活泼的气体,萃取过程不发生化学反应，且属于不燃性气体，无味、无臭、无毒，故安全性好；（6）CO2价格便宜，纯度高，容易取得，且在生产过程中循环使用，从而降低成本；（7）该技术易与其他仪器联用实现自动化（二）纯化方法1、萃取法利用药物与杂质溶解性能的不同进行分离例弃去水层含生物碱样品↓→→⎯⎯→⎯+H生物碱盐↓⎯⎯⎯←游离生物碱氯仿U氨水H2O2、柱色谱法（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶剂洗下组分（2）保留杂质于柱上常用固定相硅胶氧化铝大孔吸附树脂第二节中药制剂分析的一般程序取样鉴别含量测定检查提取纯化检验记录¾取样代表性：均匀、合理按规定的取样方法严格操作•取样前，检查包装；一.中药材取样法：•同批药材包件中抽取样品的原则：100件以下——5件；100～1000件——5％；超过1000件的——超过部分按1％取样；不足5件或贵重药材——逐件取样•破碎、粉末状或大小在1cm以下的药材，可用采样器取样，每件至少在不同部位抽取2～3个样品；包件少的抽取总量应不少于实验用量的3倍；包件多，每包件取样量一般为：普通药材100～500g粉末状药材25g贵重药材5～10g个大的药材根据实际情况取样•样品混合均匀得总样品，采用四等分法反复数次直至最后余量足够供检验用，得平均样品。平均样品的量至少为完成全部检验项目必须量的3倍，其中1/3供实验分析，1/3供复核，1/3为留样保存和备查，保存期至少一年二.中药制剂取样法：取样量至少为完成全部检验项目必须量的3倍，贵重药可酌情取样。•粉状中药制剂（散、颗粒剂）：在包装的上、中、下3层或间隔相等部位取样，一般取100g。然后混匀按四分法处理；•液体中药制剂（除注射液）：摇匀后，一般取200mL；•固体中药制剂（丸剂、片剂、胶囊剂）：片剂一般取200片，未成片前颗粒可取100g；丸剂一般取10丸；胶囊剂一般取不少于20个胶囊，内容药物净重100g•注射液：一般取已封好的安瓿瓶200支，分两次取样•其它剂型：根据具体情况确定方案¾鉴别性状鉴别——又称感官鉴别；显微鉴别——显微组织鉴别；光谱鉴别——紫外、红外及荧光法；理化鉴别——显微化学反应；色谱鉴别——最常用薄层色谱方法¾检查杂质检查与剂型相关的一般项目检查一般理化检查有机溶剂和农药残留量限度检查¾含量测定中药成分复杂，药效成分不明确，因此有效成分含量测定应用不普遍有效成分明确——测定有效成分含量；有效成分类别清楚——测定某一类成分的总含量；有效成分不明确的中药及中成药：•选择适当的生物效价或其它化学方法•选择加工炮制、制备、贮藏过程中易损失的成分；•测定药物的总固体量间接控制质量；•选择认为可能的主要成分或有效成分作为标示性成分；•检测成分应尽量与中医用药的功能主治相近；•应首选君药及贵重药建立含量测定方法；¾检验记录内容包括：送检单位、送检日期、检品名称与规格、批号、检验项目、检验方法、检验者、审核者及检验日期要求原始资料真实、详细、整洁显微或电镜检验得到的图像应真实描绘并注明放大倍数及说明所用仪器应标明型号；由于很多中药的有效成分尚未确定，质控指标难以选择，因此鉴别就成为中药制剂质量控制的重要环节。第三节中药及其制剂的定性鉴别方法常用的鉴别方法包括：性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、光谱和色谱鉴别（一）性状鉴别主要以中药及其制剂的外观性状及感官性质作为鉴别依据，多靠鉴别者的经验鉴定有临床疗效的已知成分利用显微镜来观察药材及含原药材粉末的中成药（丸剂、片剂、散剂）的组织构造、细胞性状和化合物的特征来鉴别特点：（二）显微鉴别选择原则：1.应选有专属性的特征进行鉴别2.多来源的药材应选择共有的特征进行鉴别快速，简便，覆盖面大1、水牛角浓缩粉2、麝香3、珍珠4、朱砂5、雄黄6、黄连7、栀子8、郁金9、黄芩安宫牛黄丸（三）理化鉴别利用药材中所含特定成分的性质，采用专属性化学反应鉴别。常用方法如显微化学反应、微量升华法等显微化学反应：微量升华法：利用特定成分的理化性质。药材粉末、切片或中成药粉末置载玻片上，滴加反应试剂，加盖玻片，在显微镜下观察反应结果（颜色、结晶物等）用于含有升华性成分的药材和中药材制剂的鉴别显色、↓、↑、荧光⎯⎯→⎯试剂组分TLC法——应用最多（Rf、颜色、荧光）GC法——适用于含挥发性成分的药物HPLC法——常与含量测定同时进行（四）光谱鉴别（五）色谱鉴别利用中药及其制剂中某些成分的光谱特征进行鉴别例：TLC阴、阳对照法阳性对照：将要鉴别的药材按制剂工艺处理，再按鉴别方法提取的溶液阴性对照：把制剂中要鉴别的药材除去，用剩下的各味药按制剂工艺处理，再按鉴别方法提取的溶液OOOOOOOOOO×××阴样阳对品对大补阴丸黄柏的TLC法鉴别样品对照药材小檗碱OOOOO×××例薄层板的选择硅胶G板（可加0.3%-0.5%CMC-Na）——多用氧化铝板——常用于生物碱类药物聚酰胺板——常用于黄酮类及酚类药物纤维素板——常用于氨基酸类药物1.定义：（五）中药鉴别新技术－中药指纹图谱2020世纪世纪7070年代年代————薄层色谱（薄层色谱（TLCTLC））2020世纪世纪7070年代及年代及8080年代年代————薄层扫描仪薄层扫描仪2020世纪世纪8080年代及年代及9090年代年代————GCGC、、HPLCHPLC（（主要手段））中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标定该中药材或中药制剂特性的图谱。指纹图谱技术应用于植物药质量控制——色谱法2.色谱指纹图谱的基本属性整体性整体性：将指纹图谱作为一个整体来分析：将指纹图谱作为一个整体来分析比较它的综合特征以达到鉴别的目的。比较它的综合特征以达到鉴别的目的。模糊性模糊性：强调分析、比较（：强调分析、比较（供试品与对照品）指纹图谱的）指纹图谱的‘‘相似性相似性’’，而不是