4-保健食品功效成分检测技术与方法

保健食品功效成分检测技术与方法提纲一．保健食品的检验有关要求二．保健食品理化检验及常用的分析方法介绍三．保健食品功效成分的检测四．保健食品功效成分检测其它有关问题一、保健食品的检验有关要求1、检验依据2、检验要求1、主要检验依据保健食品管理办法（1996年卫生部46令）保健食品注册管理办法卫生部健康相关产品检验机构认定与管理办法（卫法监发［1999］第76号）卫生部发布的与保健食品相关的文件保健食品通用卫生要求（1996年）保健（功能）食品通用标准（GB16740）保健食品检验与评价技术规范（2003年版）食品国标GB/T5009——2003企业标准2、检验要求保健食品检验机构CDC系统药检系统检验要求1.保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成分或特征成分，申报时须检测配方中主要原料所含的功效成分或特征成分。检验要求1.保健食品评审专家委员会可根据产品的具体配方、工艺等相关资料，要求申报单位检测指定的项目。2.检验机构受理保健食品检测时，申报单位应提供该产品的配方、工艺及企业标准等相关资料。3.保健食品的功效成分检测工作应在SFDA和卫生部原来认定的检测机构进行。检验要求1.功效成分或指标性成分、含量及其检验方法根据产品及原料确定，应与申报的功能有一定的关系功效成分或指标性成分、含量及其检验方法应分别列出依据以下二方面确定产品的功效成分（或标志性成分）并说明理由与申报保健功能有关的功效成分代表产品特性的标志性成分按标准（规范）规定的检测方法检测无标准检测方法的，应用比较权威的检测方法，并标明方法的出处无相关检测方法的，申请人应提供详细的检测方法和方法学研究及验证结果。研究及验证结果包括检验方法、线性范围、精密度、准确度和至少5批加样回收率等内容及验证报告检验要求功效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应根据其产品适用的方法学范围选择以下进行测定：国家标准卫生部部颁标准行业标准国际上权威分析方法检验要求1.在没有相应的标准方法时，企业应建立自己的企业标准。自主开发研究的分析方法，申报单位需向检测机构提供方法学研究的相关资料。检验要求1.质量标准质量标准中文文本编写格式须符合GB／T1.1－2000标准化工作导则第一部分：标准的结构和编写规则的规定内容须包括资料性概述要素（封面、目次、前言）、规范性一般要素（产品名称、范围、规范性引用文件）、规范性技术要素（技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输、储存、规范性附录）以及质量标准编写说明附录中列出检验方法和原料的质量标准检验要求1.质量标准（续）功效成分标示范围，具体标示方法一般性功效成分（或标志性成分）按≥指标值标示，如总氨基酸、粗多糖、膳食纤维等功效成分（或标志性成分）需要限定范围的，可按指标值±x%作为限定范围，如总蒽醌、芦荟苷等。X值依据研制产品的检测资料确定对于每日摄入量需严格控制的化合物，如褪黑素等，其指标范围上限折算成每日摄入量不得大于允许摄入量营养素补充剂中维生素类按指标值的0.8-1.8倍确定其指标范围，矿物质按指标值的0.75-1.25倍确定其指标范围质量标准编制说明中应详细提供功效成分（或标志性成分）指标值的确定依据及理由二、保健食品理化检验及常用的分析方法介绍1、保健食品常见的检验项目2、保健食品检验常用的分析方法1、保健食品常见的检验项目1.感官指标（性状）2.水分3.灰分4.净含量与负偏差5.崩解时限6.微生物限度7.重金属（Pb、As、Hg）8.农药残留量（六六六、滴滴涕）9.功效成分10.其它2、保健食品检验常用的分析方法1.感官检查法2.物理检查法3.化学分析法4.物理化学分析法感官检查法1.主要依靠人的感觉器官，即视觉、嗅觉、味觉等来鉴定被检物质的外观、颜色、气味和滋味等。感官检查在对某些保健食品进行卫生学评价时具有重要的意义。物理检查法1.测定被测物的物理性质，如密度、旋光、折光率等，用以判定物质的纯度。不溶性固形物物。化学分析法1.定性分析化学反应的颜色、沉淀2.定量分析重量分析挥发法、萃取法、沉淀法容量分析中和法、氧化还原法、沉淀法、络合滴定法物理化学分析法1.比色和分光光度法2.原子吸收分光光度法3.荧光分析法4.原子荧光光谱法5.电位分析法6.层析法7.气相色谱法8.高效液相色谱法物理化学分析法1.IR2.HPCE3.HPLC-MS/MS4.GC-MS/MS5.ICP-MS三、保健食品功效成分的检测（一）、保健食品原料（二）、保健食品功效成分类别和相应检测指标（三）、保健食品功效成分检测方法（四）、保健食品分析方法的建立和析方法学验证（五）、实例分析（一）、保健食品原料1.普通食品2.植物类（中草药）3.动物类4.真菌类5.益生菌类6.核酸类7.新资源食品8.营养素9.其他（三）保健食品类别和功效成分检测指标1、增强免疫力功能多糖（灵芝、虫草、香菇等）、腺苷、氨基酸、人参皂苷类、花粉、党参、黄芪、伏苓、枸杞、人参、阿胶、大枣、灵芝、灵芝孢子粉、桑葚、西洋参、螺旋藻、冬虫夏草、蜂王浆、铁皮石斛、蜂胶、牛初乳、杜仲、银耳、牛膝等2、辅助降血脂功能黄酮类、鱼油（EPA、DHA、DPA）、亚麻酸、亚油酸、绞股蓝皂苷、卵磷脂、山楂、芦荟、丹参、牛磺酸、茶多酚、苦荞粉、钝顶螺旋藻、决明子、维生素E、银杏叶、荷叶、月见草油、沙棘油、红曲制剂、甲壳素、植物甾醇、γ-谷维素等保健食品类别和功效成分检测指标3、辅助降血糖功能苦瓜总苷、三价铬、多糖类、黄酮类、红曲、三七、葛根、泽泻、田七、何首乌、黄芪、黄精、人参、乌梅、知母、生地、决明子、山药、山楂、红花、甘草、有机铬、苦瓜、魔芋精粉、麦芽糖醇、木糖醇、山梨酸糖醇、异麦芽糖醇、乳糖醇、蜂胶、桑叶、D-甘露、糖醇、百合4、抗氧化功能茶多酚、黄酮类、维生素C、硒保健食品类别和功效成分检测指标5、辅助改善记忆功能EPA、DHA、DPA、Ve、磷脂、牛磺酸6、缓解视疲劳功能B-胡萝卜素、叶黄素、维生素类7、促进排铅功能N-葡萄糖基L-半胱氨酸、谷胱甘肽、牛初乳粉、珍珠粉、维生素C、葡萄糖酸锌、酪蛋白磷酸肽、牛磺酸、木糖醇8、清咽功能金银花、胖大海青果、冰片、薄荷脑9、辅助降血压功能黄酮类保健食品类别和功效成分检测指标10、改善睡眠功能褪黑素、松果体素、低聚糖11、促进泌乳功能12、缓解体力疲劳功能人参、西洋参皂苷类、多糖类、维生素类、淫羊藿苷13、提高缺氧耐受力功能角鲨烯、维生素E、角鲨烯、沙棘籽油、枸杞子、黄精、冬虫夏草、螺旋澡、胶股蓝、茶多酚、珍珠粉、牛初乳、党参、红景天、马鹿葺、川芎、当归、刺五加、灵芝、黄芪、三七、银杏叶、红花保健食品类别和功效成分检测指标14、对辐射危害有辅助保护功能红景天、茶多酚、维生素C、当归、蜂胶、原花青素、灵芝、银耳、维生素E、螺旋藻、壳聚糖、枸杞、银杏叶、女贞子、黄芪、香菇、番茄红素、刺五加、β-胡萝卜素等15、减肥功能决明子、芦荟、黄芪、山楂、番泻叶、黄酮、肉碱、大黄酸、茶多酚、荷叶等保健食品类别和功效成分检测指标16、改善生长发育功能钙、锌、Vd、Vb6等17、增加骨密度功能钙、牛磺酸、Vd、Vc18、改善营养性贫血功能Fe，芦荟19、对化学性肝损伤有辅助保护功能黄酮、多糖保健食品类别和功效成分检测指标20、祛痤疮功能栀子、丹皮、银花、薄荷、芦荟、野菊花21、祛黄褐斑功能芦荟、山药、茯苓、薏米22、改善皮肤水份功能23、改善皮肤油份功能保健食品类别和功效成分检测指标24、调节肠道菌群功能益生菌、低聚糖类25、促进消化功能(成人和儿童)山楂、麦芽、鸡内金、山药、党参、莱服子、扁豆、陈皮、伏苓、大枣、木香、神曲、佛手、生地、低聚果糖、牛磺酸、乳酸锌、果寡糖、微晶纤维素、膳食纤维、低聚半乳糖、大豆低聚糖保健食品类别和功效成分检测指标26、通便功能制何首乌、火麻仁、决明子、枳实、莱菔子、桃仁、百合、玉竹、阿胶、芦荟、黄芪、膳食纤维、大豆膳食纤维、低聚果糖、低聚半乳糖、大豆低聚糖、螺旋藻、橘皮、蜂蜜、山楂、几丁聚糖、番泻叶、罗汉果、大黄、甘草、郁李仁、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、燕麦、桑椹、乳酸菌、决明子胶、瓜尔豆胶、阿拉伯胶27、对胃黏膜损伤有辅助保护功能部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目产品类型检测项目营养素补充剂产品中标识的营养素(包括维生素和矿物质)五加科参类皂甙蕈类（灵芝、蘑菇等）膳食纤维冬虫夏草菌丝体腺苷红景天类红景天甙部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目芦荟类芦荟甙大蒜类大蒜素螺旋藻类蛋白质、胡萝卜素、维生素B1、维生素B2茶叶类茶多酚魔芋类膳食纤维部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目纤维素类膳食纤维磷脂类（原料）丙酮不溶物、乙醚不溶物等红曲类洛伐它丁植物油类脂肪酸、维生素E动物油类脂肪酸部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目初乳类免疫球蛋白鹿血类蛋白质、氨基酸蚂蚁类锰、蛋白质蚯蚓类蚓激酶（溶纤酶）、蛋白质蛇、蝎等蛋白质、氨基酸部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目角鲨烯角鲨烯蜂皇浆10-羟基癸烯酸蜂花粉、蜂胶总黄酮甲壳质产品脱乙酰度，产品如为复方应检测原料的脱乙酰度蛋白质、氨基酸制品蛋白质、氨基酸褪黑素产品褪黑素产品原料（褪黑素）需提供原料纯度证明并检测（三）保健食品功效成分检测方法1.保健食品中红景天甙的测定2.保健食品中大蒜素的测定3.保健食品中芦荟甙的测定4.保健食品中脱氢表雄甾酮（DHEA）的测定5.保健食品中吡啶甲酸铬的测定6.保健食品中盐酸硫胺、盐酸吡哆醇、烟酸、烟酰胺和咖啡因的测定保健食品功效成分检测方法7.保健食品中肌醇的测定8.保健食品中肉碱的测定9.保健食品中α-亚麻酸、γ-亚麻酸的测定10.保健食品中免疫球蛋白IgG的测定11.保健食品中人参皂甙的高效液相色谱测定12.保健食品中原花青素的测定保健食品功效成分检测方法13.保健食品中核苷酸的测定14.保健食品中洛伐他丁的测定15.保健食品中中药功效成分的鉴别方法16.保健食品中银杏叶总黄酮的高效液相色谱测定17.保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定18.保健食品中金雀异黄素的测定保健食品功效成分检测方法19.保健食品中茶氨酸的高效液相色谱测定20.五味子类保健食品中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的高效液相色谱测定21.保健食品中腺苷的测定22.保健食品中褪黑素的测定保健食品功效成分检测方法23.保健食品中总皂甙的测定24.保健食品中总黄酮的测定25.壳聚糖的游离氨基测定及脱乙酰度的计算26.蚓激酶活性的测定27.红曲产品中桔青霉素的测定（四）保健食品分析方法的建立和析方法学验证•分析方法的选择•分析方法学验证的内容•分析方法建立实例分析分析方法的选择1.根据分析对象的性质选择准确、可靠的方法2.分析方法的科学性，应根据分析方法的评价参数选择可以满足分析需要的分析方法3.分析方法的实用性，方法应简便易行，样品前处理少、操作不费时、适合大批量样品的测定、同时测定成本低、所用试剂和材料不特殊、种类少、稳定性高、环保、毒性小等。4.方法要经过验证和评价分析方法学验证的内容1.精密度2.准确度3.灵敏度4.检测限5.检测上限6.定量限7.方法的适用范围8.最佳测定范围9.选择性和专属性10.耐用性11.不确定度评估精密度(precision)1.在一定条件下对同一被测物多次测定的结果与平均值偏离的程度。精密度反映了随机误差的大小。常用标准差（S）或相对标准偏差（RSD）表示。平行性（replicability）相同分析方法、样品、实验室、分析人员、分析设备、分析时间重复性（repeatability）相同分析方法、样品、实验室，但分析人员、分析设备、分析时间中至少有一项不同再现性（reproducibility）相同分析方法、样品，但实验室，分析人员、分析设备、分析时间均不同精密度平行性重复性再现性备注方法√√√样品√√√地点√√×人员√√××时间√√××分散设备√√××浓度水平333样品（n）999室内室间准确度（accuracy）1.是用一个特定的分析