实验四体液因素及药物对离体心脏活动的影响[实验目的]学习斯氏离体蛙心灌注法,观察强心苷对离体蛙心收缩强度、频率和节律的影响。[实验材料]蛙或蟾蜍、蛙板、蛙心夹、手术器械、探针、斯氏蛙心套管、张力换能器、电脑、双凹夹、长柄木夹、任氏液、低钙任氏液、0.2%去乙酰毛花苷丙(西地兰)等。[实验方法]1、取蛙或蟾蜍一只,左手握蛙,用食指下压头端,拇指按压背部,使头前俯。用探针破坏脑及脊髓,背位固定于蛙板上,剪开胸部皮肤、肌肉及胸骨,打开胸腔,剪破心包膜,暴露心脏。2、在主动脉分支处下穿一根线,以备结扎套管用。在左主动脉上剪一V型切口,插入盛有任氏液的蛙心套管,见到套管内的液面随心搏上下波动后,将线扎紧并固定在套管的小钩上。在插管过程中要及时用滴管吸去套管内血液,以免血块堵塞。3、结扎右主动脉,剪断两根动脉,持套管提起心脏,用线自静脉窦以下把其余血管一起结扎(勿伤及或结扎静脉窦),分离周围组织,在结扎处下剪断血管使心脏离体。4、用任氏液连续换洗,直至无血色,使套管内保留1.5ml左右的任氏液。将蛙心套管固定在铁支架上,用带有长线的蛙心夹在心舒期夹住心尖,将长线与张力换能器连接。5、打开电脑,点击桌面中的BL-410图标,由输入信号,选择做张力的有关内容和相关标记内容。观察项目1、记录一段正常心搏曲线后,注意观察心跳频率、强度及心室的收缩和舒张成度。2、把蛙心插管内的任氏液全部换成为0.65%氯化钠溶液,观察心跳变化。3、吸出0.65%氯化钠溶液,用任氏液换洗2次,待曲线恢复稳定状态后,再在任氏液内加入3%氯化钙溶液0.2ml,观察心跳变化。4、将含有氯化钙的任氏液吸出,用任氏液换洗2次,待曲线恢复稳定状态后,在任氏液中加入3%氯化钾0.2ml,观察心跳的变化。5、将含有氯化钾的任氏液吸出,用任氏液换洗2次,待曲线恢复稳定状态后,在任氏液中加入1:10000的肾上腺素溶液0.2ml,观察心跳的变化。6、将含有肾上腺素的任氏液吸出,用任氏液换洗2次,待曲线恢复稳定状态后,在任氏液中加入1:10000的乙酰胆碱溶液0.2ml,观察心跳的变化。7、将含有乙酰胆碱的任氏液吸出,用任氏液换洗2次,待曲线恢复稳定状态后,再在任氏液中加入1%乳酸溶液0.2ml,观察心跳的变化。8、换低钙任氏液,当心肌收缩显著减弱时,向套管内加入5%洋地黄溶液0.1~0.2ml,观察心跳的变化。报告要点打印或描记心脏的收缩曲线,标记加药、换药的情况。注意事项:1、本实验以青蛙心脏为好。因蟾蜍皮下腺体有强心苷样物质,可降低蛙心对强心苷的敏感性。2、在整个实验过程中应保持套管内液面高度不变,以保证心脏固定的负荷。3、在实验过程中,基线的位置、放大倍数、描记速度应始终一致。4、在实验中以低钙任氏液灌注蛙心,使心脏的收缩减弱,可以提高心肌对强心苷的敏感性。在本实验中可以看到强心苷的哪些药理作用?