大鼠一般操作技术

大鼠常规操作技术孙泉首都医科大学实验动物部010-83911344（办公室）[e-mail]11.了解动物实验的目的和意义2.了解实验动物选择和染毒途径。3.掌握大鼠实验的基本操作技术。一、实验目的：231.实验动物的选择2.实验动物的抓取和固定3.性别鉴定4.实验动物编号标记5.实验动物给药途径和方法（灌胃、腹腔、皮下注射、尾静脉注射）6.生物标本的采集（鼠尾取血、心脏采血、眼眶取血）7.实验动物的处死二.实验内容：4实验流程5大鼠的观察、抓取与固定性别的判定、称重、标记编号及分组大鼠灌胃操作（重点）大鼠腹腔注射、尾静脉注、皮下注射大鼠眼眶后静脉丛取血与断尾取血，以及大鼠的处死动物物种选择基本原则：动物的选择6健康动物首先看外观：体形丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，反应行动灵活。有无明显疾病症状体重、年龄外观观察7动物的抓取和固定单手固定双手固定固定器固定板注意抓取动物的手法抓取固定时力量大小适宜8未成熟鼠生殖器发育不明显，肛门与生殖器之间的距离来区分。远——♂、近——♀。成年鼠：雄性卧位可见睾丸，雌性可见腹部有12个乳头。性别鉴定9常用标记，两种染料（苦味酸和中性红或品红）先左后右，先上后下动物的编号标记10穿耳孔法左耳代表十位，右耳代表个位应注意防止孔口愈合，多使用消毒滑石粉涂抹在打孔局部11原则：同一实验中，实验动物的年龄尽可能一致，实验动物体重大致相近；同组、同性别动物体重差异应小于平均体重的10%；不同组间同性别动物体重均值差异小于5%；♀♂动物各半，且♀♂实验结果分开统计、分析。称重编号随机分组实验动物的分组12经口染毒（喂饲、灌胃、吞咽胶囊等）经呼吸道染毒（静式、动式和气管内注入）经皮肤染毒注射染毒（皮下、皮内、肌内、腹腔和鼠尾静脉注射等）其它（直肠内、鼻腔等）实验动物染毒途径和方法13灌胃抓取老鼠时应是鼠成竖直线灌胃成功时，所遇阻力较小灌胃时注意胃容量0.1ml/10g-0.3ml/10g，＜1mL14腹下1/3外侧，避免损伤实质器官30-45°角刺入扎入时有“落空感”，回抽无尿液或血液腹腔注射15酒精擦拭尾部左手食指，拇指配合按住尾端右手持注射器，针尖轻轻抬起与血管平行刺入血管由红变白，按压止血尾静脉注射16俯卧固定，左手拇指和食指捏住颈背部皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮下，进针时感觉有阻力，继续刺入，突然阻力消失，活动针头，确认刺入皮下即可注射药液。皮下注射17俯卧保定，与皮肤平行刺入捏住的皮肤，注射部位局部形成皮丘。为避免药液流出，停留片刻，再将针头拨出皮内注射18血液采集（断尾采血、眼眶采血、心脏采血等）尿液采集粪便采集生物标本的采集19固定→用手轻揉鼠尾→静脉充血后剪尾尖（1-2mm）→用手从尾根向尾尖推挤→采血→干棉止血。每次0.1mL尾尖静脉采血法20左手固定动物→滴少量10%可卡因于动物眼内→右手持消毒过毛细吸管→以抗凝剂湿润内壁→眼睑和眼球间旋转刺入→采血后消毒纱布止血30秒。每次0.2-0.3mL眼眶后静脉丛采血21动物仰卧→固定器固定→剪左侧心区毛→皮肤消毒→小号针头注射器在3-4肋间刺入。可达0.5mL心脏采血法22脊椎脱臼法：用左手按住动物的头部于实验台上，右手抓住尾根部，快速、不间断地向后、略向上使劲拉，使动物的颈椎以致脊椎脱臼死亡。过量麻醉法动物的处死23将动物固定于解剖台上，从耻骨联合至下颌沿正中线切开皮肤，再从耻骨联合至肋骨下缘沿腹正中线切开腹壁肌肉（不要用力过猛，以免切破腹腔脏器，特别是膀胱）。从肋骨下端向脊柱方向，将两侧腹壁剪开，以便观察腹腔内脏器。应注意不可将腹腔内脏器翻乱，应有次序地检查。脏器标本的采集24252627281.抓取与操作动物时小心不要被咬伤，如果被咬伤需立即用清水冲洗并用碘酒消毒。2.抓取动物时用力要恰当,防止动物窒息死亡。3.注射给药时要注意安全，注射器不用时要盖上盖子，不要被扎伤。4.实验动物在做完所有操作后才进行处死，处死后的动物不要与其他垃圾混合丢弃。注意事项：30