SARS检测实验室生物安全操作指南卫生部临床检验中心申子瑜SARS检测实验室生物安全防护指南•实验类型与实验室安全级别•SARS检测人员个体防护•二级生物安全防护实验室安全操作要点•实验样品转运和包装可依据文件和导则•卫发电[2003]31号《卫生部办公厅关于印发传染性非典型肺炎实验室生物安全操作指南的通知》•InterimLaboratoryBiosafetyGuidelinesforHandlingandProcessingSpecimensAssociatedwithSevereAcuteRespiratorySyndrome(SARS)----美国CDC卫发电[2003]31号《卫生部办公厅关于印发传染性非典型肺炎实验室生物安全操作指南的通知》下列操作必须在三级生物安全防护实验室(P3实验室)中进行l、用细胞培养的方法分离病毒;2、收集或浓缩病毒或其培养产物;3、用活病毒或病毒的全基因接种动物;4、咽拭子样品的诊断检测。下列操作必须在二级生物安全防护实验室(P2)或全排式生物安全柜中进行l、含漱液、血清和血液等样品的诊断检测;2、溶解、固定或用其他方法处理灭活的病毒和(或)无传染性的病毒基因片段;3、常规的细菌和毒素检查;4、可能产生气溶胶的样品处理:5、临床样品的包装、分装;6、离心管和离心机转头的封闭和开启。SARS检测人员防护措施1.佩带N95级口罩,按照操作者鼻部尺寸调整口罩的鼻金属夹,保证呼出和吸入气体确实经过口罩过滤;2.佩带可以遮盖脸部的防护面罩或防护眼罩;3.佩带外科手术帽,并遮盖住双侧耳部;4.佩带2层外科手术乳胶手套。每完成一次可能接触含有病原的样品的操作后,应更换外层手套,再进行下一步操作;5.穿着实验白大衣,在白大衣外再穿外科手术衣或连体隔离服(最好为防水材料),双上肢佩带袖套,并用乳胶手套袖端将袖口覆盖、绷紧;6.双下肢穿着裤套,双脚穿鞋套,并用鞋套上部橡皮筋将裤套下段绷紧。InterimLaboratoryBiosafetyGuidelinesforHandlingandProcessingSpecimensAssociatedwithSevereAcuteRespiratorySyndrome(SARS)----美国CDC•二级生物安全防护实验室•标本处理在生物安全柜中进行•离心管开启在生物安全柜中进行•工作人员有防护措施•加强实验室安全制度建立实验室生物安全防护分级•一级生物安全防护实验室,简称BSL1或P1•二级生物安全防护实验室,简称BSL2或P2•三级生物安全防护实验室,简称BSL3或P3•四级生物安全防护实验室,简称BSL4或P4二级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。二级生物安全防护实验室安全设备和个体防护1.可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行,并使用个体防护设备。2.处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行,并使用个体防护设备。上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心杯,且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料,则可在实验室中进行。3.当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时,为防止感染性材料溅出或雾化危害,必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。4.在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时,防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出,更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒,然后统一洗涤或丢弃。5.当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出,宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。实验室设计和建造的特殊要求1.每个实验室应设洗手池,宜设置在靠近出口处。2.实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙。3.实验台表面应不透水,耐腐蚀、耐热。4.实验室中的家具应牢固。为易于清洁,各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。5.实验室应有可开启的窗户,应设置纱窗。6.应设置实施各种消毒方法的设施,如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理7.应设置洗眼装置。8.实验室门宜带锁、可自动关闭。9.实验室出口应有发光指示标志。10.实验室宜有不少于每小时3~4次的通风换气次数。二级生物安全防护实验室操作要点1.实验室人口须贴上生物危险标志,注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进人实验室的特殊要求及离开实验室的程序;2.禁止非工作人员进人实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入;3.禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物;4.接触微生物或含有微生物的物品后,脱掉手套后和离开实验室前要洗手;5.以移液器吸取液体,禁止口吸;6.制定尖锐器具的安全操作规程;7.按照实验室安全规程操作,降低溅出和气溶胶的产生;8.每天至少消毒一次工作台面,活性物质溅出后要随时消毒;9.所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活,如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭防漏的容器内储存、运输及消毒灭菌;10.如有条件工作人员应接受必要的免疫接种(如卡介苗等);11.必要时收集从事危险性工作人员的基本血清留底,并根据需要定期收集血清样本,应有检测报告,如有问题及时处理;12.将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册,由实验室负责人专门保管,工作人员在进入实验室之前要阅读规范并按照规范要求操作;13.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训,掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训;14.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒;15.人员暴露于病毒时,及时向实验室负责人汇报并记录。安全管理制度•实验室内务管理制度•尖锐器具安全使用制度•实验室消毒防护制度•标本采集运输制度•废弃物处理制度•工作人员防护制度•差错事故处理制度尖锐器具安全使用制度•除特殊情况外,禁止在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。•尽可能应用一次性注射器,用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下,禁止用手直接操作。用过的针头必须直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒,最好进行高压消毒。•尽可能使用无针注射器和其他安全装置。•禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须消毒。实验样品转运-引自卫生部文件•实验样品须标明“SARS病毒”。•必须使用专车,由专人运送。•避免长途转运,如确需空运按照民航检疫部门有关规定办理。实验样品运输时包装--引自卫生部文件•容器能够承受不少于95Kpa压力的高质量的防水包装材料且密封,以防止运输中发生内容物的外泄;•第二层和第三层包装中应使用吸水性好的柔软的物质充填;•几个易碎的容器在同一个包裹中运输时,应分别独立包装并相互隔离,以免互相碰撞。总结•必须具备二级生物安全防护实验室条件•必须有二级以上全排式生物安全柜•加强对SARS检测人员的防护措施•实验室与办公室必须有效隔离•建立严格的实验室安全管理规范•领导负责,检验人员尽可能稳定可参阅文件•国科发农社字[2003]129号《传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法》•卫发电[2003]31号《卫生部办公厅关于印发传染性非典型肺炎实验室生物安全操作指南的通知》•InterimLaboratoryBiosafetyGuidelinesforHandlingandProcessingSpecimensAssociatedwithSevereAcuteRespiratorySyndrome(SARS)•卫生行业标准WS233-2002《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》THEENDTHANKS高效空气过滤工作人员安全无涡流单向流空气实验对象不受污染手套箱式操作口I级有是否否否II级有是是是否III级有是是是是生物安全柜异同return