棒状杆菌属

第十四章棒状杆菌属夏佩莹陈登宇棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌，菌体形态特征是在其一端或两端常呈棒状膨大，故名，归属放线菌科。棒状杆菌属概述棒状杆菌属种类繁多，主要有：白喉棒状杆菌（C.diphtheriae）假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum）干燥棒状杆菌（C.xerosis）化脓棒状杆菌（C.pyogenes）溃疡棒状杆菌（C.ulcerans）假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis）溶血棒状杆菌（C.haemolyticum）J-K群棒状杆菌（C.jeikeium-CDCgroupJK）G+杆菌、一端或两端膨大成棒状染色不均匀，两端浓染或有异染颗粒无鞭毛、无芽胞排列不规则，呈栅栏状白喉棒状杆菌——致病菌类白喉棒状杆菌——条件致病菌第一节白喉棒状杆菌C.diphtheriae致病物质(一)白喉外毒素毒力强，130ng/kg可使人死亡抗原性强编码外毒素的tox基因——β-棒状杆菌噬菌体一、临床意义作用机制：A亚单位可使细胞延伸因子-2（EF-2）灭活，影响蛋白质的合成作用特点：毒性作用大，1分子能杀一个细胞作用于多种细胞，心肌、神经细胞均有毒素受体肿瘤细胞对此毒素敏感（二）索状因子细菌表面的一种糖脂，能破坏细胞的线粒体，影响细胞的呼吸与磷酸化（三）K抗原--细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白--抗吞噬--有利于细菌在黏膜表面的定植所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病传染源：患者及带菌者传播途径：飞沫或污染临床表现细菌------上呼吸道粘膜，生长繁殖，产生毒素细菌与毒素共同作用引起局部炎症：炎性渗出，坏死，纤维蛋白→→假膜→→窒息毒素→→血液→→全身中毒症状外周N---N炎：膈肌麻痹---呼吸困难声带麻痹---声音嘶哑软颌麻痹---吞咽困难心肌---心肌炎白喉假膜抗毒素免疫感染后机体可获得牢固的免疫力机体还可通过其它方式获得免疫力：六月以下婴儿---------母亲成人---------------------隐性感染、人工主动免疫易感者：1~5岁儿童成人---也有可能免疫性：锡克试验（Schicktest）（白喉外毒素皮内试验）调查人群在感染或预防接种后对白喉是否产生免疫力根据外毒素与抗毒素中和的原理，以少量白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素缺点—观察时间长、操作繁琐，不易进行广泛测试《致敏红细胞凝集试验》测定血清中抗毒素水平0.1ml血清，倍比稀释+外毒素致敏红细胞37℃、1h敏感度可达10-4单位，简便快速•防治原则：--人工主动免疫——白喉类毒素DPT混合疫苗：白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风类毒素--人工被动免疫——白喉抗毒素+白喉类毒素--治疗：抗毒素+抗生素早期足量注射白喉抗毒素，使毒素在与细胞结合以前被抗毒素中和二、生物学特性形态与染色:G+细长微弯的杆菌一端或两端膨大呈棒状常排列呈V、L、X等文字形异染颗粒——形态上的鉴别特征无荚膜、无芽胞、无鞭毛白喉棒状杆菌异染颗粒1000ו培养特性：需氧或兼性厌氧，最适温度35～37℃营养要求高，在含血液、血清、鸡蛋的培养基上生长良好•吕氏（Loeffler)血清斜面或鸡蛋斜面：生长最快，6h即生长，10～12h长出灰白色、湿润、有光泽的光滑型菌苔/菌落，菌体形态典型、异染颗粒明显，连续传代可保持形态和产毒性能不变BAP中菌落•BAP：•菌落灰白色、光滑型、直径1～2mm、有狭窄β溶血环（轻型）•多次传代后菌体变为球型•亚碲酸钾BAP：选择鉴别培养基•黑色菌落——鉴别依据•不同菌型还原能力不同，呈现黑色或灰黑色菌落•根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为：重型、中间型、轻型白喉棒状杆菌在亚碲酸钾BAP中菌落•液体培养基：生长较好，但菌型不同其生长特点也不相同•生化反应：分解葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、果糖产酸不产气，不分解乳糖、甘露糖，一般不分解蔗糖，吲哚（-）、硝酸盐还原（+）、触酶（+）、氧化酶（-）、明胶液化（-）尿素（-）重型能分解淀粉、糖原、糊精，迟缓分解蔗糖•抵抗力：对干燥、寒冷和日光抵抗力较其他无芽胞细菌强，在干燥的假膜中可生存3个月对湿热和消毒剂敏感，5%石炭酸、1：1000升汞1min，100℃1min、60℃10min均可灭菌对青霉素、红霉素等敏感，对磺胺不敏感三、微生物学检验分离出白喉杆菌，并证明其毒力标本采集：分泌物取双份如不能及时检验，标本浸于无菌生理盐水或15%甘油生理盐水保存毒力试验患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等直接涂片染色镜检（单染或G染色+异染颗粒染色）吕氏血清斜面35℃12～18h亚碲酸钾BAP、35℃24～48hBAP35℃16-18h涂片染色镜检(G染色和异染颗粒染色）观察菌落特点吕氏血清斜面生化反应涂片染色镜检检验程序直接涂片染色镜检：--2～3张涂片→G染色、异染颗粒染色镜检——初报“直接涂片检出形似白喉杆菌”——早期诊断--用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本，37℃10h，涂片染色镜检——提高阳性率•分离培养：吕氏血清斜面：37℃、8～12h→→涂片染色镜检--检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断亚碲酸钾BAP：37℃、24～48h，黑色菌落BAP：轻型有β溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别•鉴定：形态染色、菌落特点、生化反应糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原—鉴别棒状杆菌属不同的种白喉：葡萄糖（+）、麦芽糖（+）蔗糖（-）•毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据）体外法：琼脂平板毒力试验（Elek平板毒力测定）SPA协同凝集试验对流电泳琼脂平板毒力试验-Elek平板对流免疫电泳•体内法：用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验第二节类白喉棒状杆菌（二）结膜干燥棒状杆菌（C.xerosis）（三）化脓棒状杆菌（C.pyogenes）（四）溃疡棒状杆菌(C.ulcerans)（五）假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis）（六）溶血棒状杆菌（C.haemolyticum）（七）杰克群棒状杆菌（C.jeikeium-CDCgroupJK）（一）假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum）共同特点：--大多不产生外毒素--菌体较粗短，着色较均匀，很少有异染颗粒--大多寄生在人或动物的鼻腔、咽喉、外耳道、外阴、泌尿道和皮肤等处--条件致病菌，可引起心内膜炎、菌血症、肺炎、泌尿生殖道感染等--鉴别——生化反应