血液、病料等样品的采集方法及技术要求采集动物血液是动物疫病采样的一项重要内容,对疫病检测意义重大。采血过程中应严格保持无菌操作。采血前,应用酒精棉对采血部位局部消毒。采血完毕,局部消毒并用干棉球按压止血。采血用的注射器和试管必须保持干燥无菌。在采血,分离血清的过程中,应避免溶血。几种常用的动物采血方法介绍如下:一、禽的采血方法1.雏鸡心脏采血左手抓鸡术者手持采血针平行颈椎从胸腔前口插入,回抽见有回血时,即把针芯往外拉使血液流入采血针。2.成年禽心脏采血成年禽只采血可采用侧卧或侧卧保定。(1)侧卧保定采血助手抓住禽两翅及两腿,右侧卧保定,在触及心搏动明显处,或胸骨脊前端至背部下凹处连线的1/2处消毒,垂直或稍向前方刺入2——3厘米,回抽见有回血时,即把针芯往外拉使血液流入采血针。(2)仰卧保定采血胸骨朝上,用手指压离嗉囊,露出胸前口,用装有长针头的注射器,将针头沿其锁骨俯角刺入,顺着体中线方向水平穿行,直到刺入心脏。3.翅静脉采血在翅下静脉处消毒,手持采血针,从无血管处向翅静脉丛刺入,见有血液回流,即把针芯向外拉使血液流入采血针。也可保定禽只,使翅膀张开。露出腋窝部,拔掉羽毛,用消毒棉消毒。拇指压近心端,待血管怒张后,用装有细针头的注射器,由翼根向翅方向平行刺入静脉,放松对近心端的按压,缓慢抽取血液,采血完毕用棉球按压止血。二.猪的采血方法1.耳缘静脉采血站立保定,助手用力在耳根捏压静脉的近心段,手指轻弹后,用酒精棉球反复涂擦耳静脉使血管怒张。沿血管刺入,见有血液回流,缓慢抽取所需量血液或接入真空采血管,用棉球按压止血。2.前腔静脉采血(1)站立保定,保定器保定让猪头仰起,露出右腋窝,从右侧向心脏方向刺入,回抽见有回血时,即把针芯向外拉使血液流入采血针。(2)侧卧保定,把前肢向后方拉直。一般用装有20号针头的注射器采血。其穿刺部位在胸骨端与基部连线上胸骨端旁开20厘米的凹陷处,向后内方与地卖弄呈60度角刺入2—3厘米,当进入约2厘米时可一边刺入一边回抽针管内芯;刺入血管时即可见血进入针管内,采血完毕,局部消毒。3.股静脉采血法麻醉并仰卧固定动物。用摸脉法在腹股沟找到股静脉,用手指按压静脉上部,使血管怒张,将针头刺入静脉内,有回血,则缓慢抽取所需血液。4.桡头静脉采血在前肢小腿前外剪毛,消毒,用橡皮管勒紧压迫或用手握紧前肢关节以上部位,可见桡骨前侧有充盈隆起的桡骨静脉。左手握紧或稍向下拉进针部位皮肤,使针穿刺皮肤不易活动。5.隐静脉采血在后肢小腿外下1/3处,操作方法同桡骨静脉采血,在隐静脉下端,针头向尾背侧方向刺入。此静脉较桡骨静脉游动性大,因此,手固定要牢固。三、牛、羊的采血方法1.牛、羊颈静脉采血将动物保定,稍抬头颈,于颈静脉沟上1/3与中1/3交界处剪毛消毒,一手拇指按压采血部位下方颈静脉沟血管,促使颈静脉怒张,另一手执针头,于皮肤呈45度角由下向上刺入,血液顺器壁流入容器内,防止气泡产生。待血量达到要求后,拔下针头,用消毒棉球按压针眼,轻按止血。2.牛尾静脉采血固定动物使牛尾上翘,手离尾根部约30厘米。在离尾根部10厘米左右中点凹陷处,先用酒精棉球消毒,然后将采血针头垂直刺入约1厘米深。针头触及尾骨后再退出1毫米进行抽血。采血结束,消毒并按压止血。3.乳房静脉采血奶牛,奶山羊可选用乳房静脉采血,奶牛腹部可看到明显隆起的乳房静脉,消毒后在静脉隆起处,针头向后肢方向快速刺入,见有血液回流,接入真空采血管。四、奶牛尾中动脉采血技术与应用奶牛尾中动脉采血技术在奶牛业发达国家早已在兽医临床上广泛应用,而在我国尚极少应用。笔者通过在奶牛布氏杆菌病诊断过程中500头奶牛的实际应用,取得了较满意的效果。现将奶牛尾中动脉采血技术介绍如下。一、材料与方法(一)奶牛尾中动脉解剖部位:奶牛尾中动脉是荐中动脉向后的延续,沿尾的腹侧面向后伸延,位于皮下,牛的较发达。(二)采血器材的选择:1、5-10毫升玻璃注射器或一次性塑料注射器;2、9号注射针头;3、玻璃试管;4、5%碘酊棉球;5、75%酒精棉球。(三)采血方法:术者和保定者穿好工作衣帽,戴上乳胶手术手套,先由保定者站在奶牛右侧面,一只手将牛尾用力向上抬起,另一只手支在奶牛臀部,然后术者站在牛后面,在尾部腹侧距肛门10-15厘米处(第5-7尾椎处),常规消毒后,术者持带有针头的注射器,在消毒处尾中部凹陷处,垂直刺入2-2.5厘米,轻轻抽动注射器活塞,血液即可被抽入注射器内。根据各种检查需要决定采血量。此后术者将注射器连同针头从尾部抽出,术部常规消毒后,保定者将牛尾放下,术者将注射器内和血液沿玻璃试管壁注入试管内,封盖即可,采血结束。二、结论与讨论(一)奶牛尾中动脉采血技术适用于诊断布氏杆菌病。结核等传染疾病及血常规检查、血液生理成份测定等血样原采集。(二)奶牛尾中动脉采血与颈脉采血相比,尾中动脉采血血液直接进入注射器内,不易造成环境污染。而静脉采血,由于先将采血针刺入颈静脉后,再用玻璃试管接血样,如果遇见神经质牛,保定不结实牛,血液易溅在地面上或术者身上,特别是大群奶牛采血,血液易溅到牛槽内造成污染。(三)奶牛尾中动脉采血,在保定过程中由于将尾用力向上抬起时有疼痛感觉,同时另一只后支撑牛臀部成三角形,奶牛很安定。又因保定者和术者位于奶牛后面,从保定开始到采血结束所用时间短,只需1-2分钟左右,不易使奶牛受到惊吓,也不易发生人畜伤亡等事故。而颈静脉采血,术者和保定者位于奶牛头部,从保定到采血结束所用时间长,而5-10分钟左右,采血时常因对奶牛保定、驱赶、刺针等原因使奶牛受到惊吓,造成产奶量下降、流产、早产等后果;有时因保定不牢,发生人畜伤亡等事故。这种情况下在大群舍饲奶牛场表现的更加明显。(四)奶牛尾中动脉采血无需更多的保定人员,操作简单,空易掌握,安全可靠,具有较高的实用性和推广价值。(五)在整个采血过程中,必须严格遵守兽医操作规程,做到1牛1针。建议有关部门尽快开发研制相应的奶牛尾中动脉的采血器材,以便尽快在奶牛布氏杆菌病、结核病等传染性疾病检疫中推广应用。五、其他动物血采集1.家兔和豚鼠采血,心脏部位约在胸前由下向上数第三与第四肋骨间,用手触摸心脏搏动最强部位,剪毛消毒,将注射器针头由此部位垂直刺入心脏,动物略有颤动,表明针头已穿入心脏,然后轻轻抽取,如有回血,表明已插入心腔内,即可抽血。如无回血,可将针头退回一些。重新插入心腔,若有回血。按压心脏,缓慢抽取所需血量。2.小鼠采血可以先麻醉,一般采取仰卧姿势。在其锁骨与剑突连线中点沿胸骨左边缘进针5毫米左右,边刺入边抽吸,即可采血。也可进行尾静脉采血,固定动物并露出鼠尾。将尾部浸在45度左右的温水中数分钟。使尾部血管充盈。在将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾件0.3—0.5厘米,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并按压止血。六血液样品的制备常规血液制备可分两类,即抗凝血与非抗凝血。1.抗凝血常用作细菌或病毒检验样本。采血前,预先在真空采血管或其他容器内按每10毫升血液加入01%肝素1毫升或EDTA20毫客。采集的血液立即与抗凝剂充分混合,防止血液凝固,但要轻轻混匀以免溶血。也可将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内,震荡脱纤维蛋白。采集的血液经密封后贴上标签,立即冷藏送实验室。必要时可在血液内按每毫升加入青霉素和链霉素各500—1000国际单位,以抑制血源性或采血过程中污染细菌。2.非抗凝血即不加抗凝剂的血液,等血液凝固后析出血清一般用作血清血监测试验。血清分离方法:血液在室温下倾斜防止2—4小时(防止暴晒),待血液凝固自然析出血清,或用无菌剥离针剥离血凝块,将试管放在装有25-__37度温水的杯内或37度温箱内一小时,或置4度并向过夜,待大部分血清析出后取出血清,必要时经1500——2000转/分离心5分钟,分离血清。将血清转到另外的笑塑料离心管内,盖紧盖子,封口,贴标签,4度冷藏。须长期保存时,将血清置于—20度冷冻。3.血片采取末梢血液,静脉血或心血。取一滴血液样品,滴在已消毒的载玻片上,另取一片载玻片作推片,将推片自血滴左侧向右移动,当血滴均匀附着在两片之间后,再将推片向左平稳推移,(两片呈30度——45度夹角),推出均匀血膜,涂片数张放于载玻片盒或载玻片架中。动物的保定方法猪的保定在对猪病诊疗过程中,患猪保定非常重要,特别是在静脉输液,外科处理等需要较长时间处理时显得更为关键。现将保定猪的几种简易方法介绍如下:一、倒背两前肢保定法用一条长约1米左右、直径0.3-0.5厘米的细绳,一头先拴住患猪左(或右)前肢系部,然后绕过脊背再绑住右(或左)前肢系部,松紧适中,这样猪就处于爬卧状态,不能随意活动。个别猪剧烈挣扎不安静时,还可再用一条绳如法拴住两后肢。二、前后肢交叉保定法用长1米,直径0.3-0.5厘米的细绳,将猪的任何一前肢与对侧的另一后肢拉紧绑在一起,这样保定也非常方便、牢靠,勿需再按压保定。三、四肢叉开保定法利用可能利用的条件,将猪的四条腿向前后两个方向分四点固定即可。如将猪四条腿分别固定起来,猪就呈爬卧状态,输液、换药、打针、灌肠都很方便。四、绳套上腭保定法此法对大猪很适用。对缺少犬齿的母猪,由于母猪后坐时绳结容易滑脱,经过改进,保定更为方便牢靠。具体方法是:用一根长3米、直径0.5-1厘米的线绳,先打一个活结,套在猪的上腭上,向前拉紧即可。对缺少犬齿而容易滑落的猪,在绑活结时,另一绳头留长点,经过猪两耳后在另一侧打活结再绑紧就不会滑脱了。此法对猪都很安全。牛的保定(一)站立保定站立保定不但适用于一般检查方法和治疗措施(如体温、呼吸、心跳的测定,直肠及各个系统的检查,静脉、肌肉注射等),而且同样适用于某些手术(如豁鼻修补术、子宫脱出整复术等)。具体的保定方法是:一手抓住牛鼻绳或鼻中隔,另一手抓住牛角即可。另外,在条件许可时,也可将牛置于两树之间,但如行豁鼻修补术、子宫脱出整复术、直肠和阴道脱出整复术及直肠孕娠检查等,必须将牛牵入保定栏内保定。(二)侧卧保定侧卧保定适合于胸、腹腔手术及性情凶暴牛的去势手术等,具体保定姿势应视其手术部位而定。保定前牛禁食12小时左右,以免引起瘤胃臌气等疾病发生。同时应在较宽敞平坦的场地保定并铺上垫草,否则可能导致发生骨折。牛的侧卧保定至少应由3人操作。根据牛只大小,通常取长度为5~7米的绳子,折成一长一短两段,短绳端一般为1.5米左右。在绳的折转处作一猪蹄套,套住欲卧侧的蹄部。将两绳端越过牛的胸部绕到另一侧,短绳端交卧地侧助手固定,将长绳端连续两次绕过牛的胸腹部,并使之滑到跗关节上方,同时收紧绳子,交助手固定。欲使牛卧倒之前,三人分别固定跗关节、前肢及鼻绳端绳子。倒牛时,鼻绳端助手将牛前拉;待牛系绳前肢提举时,该助手用力上拉绳子;与此同时,跗关节绳端助手后拉。如此三者合力,犬的保定即刻卧地,嘴套保定法嘴套有皮革制品和铁丝制品两种,有不同型号。选择大小合适的给犬带在嘴上,即可防止咬人。根据诊疗工作的需要,令犬站立或侧卧。保定人员抓住脖圈,固定好头部,防止头部活动即可。如无嘴套。可用绷带代替,即用长1米左右的绷带1根,在绷带中间打一活结圈套,将圈套从鼻端套至鼻背部中间,然后拉紧圈套,并将上下颌用绷带拴紧。站立保定法站立保定最好由犬的主人进行。其他人员保定时,声调要温和。态度要友善,举动要稳妥,避免粗暴的恐吓和突然动作。保定人员要站于犬的左侧,面向头部,边接近犬边用温和的声调呼唤犬,右手轻拍犬的颈部和胸下方或挠痒并用牵引带套住犬嘴。站立保定适用于一般检查用。侧卧保定法是将犬的一侧卧于手术台上,用细绳或绷带将两前肢和两后肢分别捆绑在一起,再用细绳将前后肢系紧在手术台上。以防犬助手按住犬头部,即可进行诊疗工作。一般静脉注射或局部治疗处理法保定。但在腹部或会阴部手术时,常需采用仰卧保定法。即先将犬手术台上,然后分别在四肢球节下方栓绳,并在手术台上拴紧。使展,仰卧。另用一细绳将犬头保定于手术台上,防止活动,即可进行其他诊疗措施。颈钳保定法对凶猛咬人的犬,可采用此法。颈钳保定法需:合适的颈钳,其钳体用铁杆制成,钳柄长90—100厘米。钳端为。20~25厘米半圆形的钳嘴组成。保定时,