HPLC法在手性药物分离中的应用

HPLC法在手性药物分离中的应用作者：刘建明，徐媛媛，陈剑萍作者单位：刘建明(南昌大学医学院临床药理研究所,南昌,330006)，徐媛媛,陈剑萍(江西医学院上饶分院药理教研室,江西,上饶,334000)刊名：实用临床医学英文刊名：PRACTICALCLINICALMEDICINE年，卷(期)：2009，10(2)被引用次数：0次参考文献(17条)1.黄姣;陈小明;罗和安一种β-环糊精衍生物作为手性固定相的研究[期刊论文]-分析科学学报2005(06)2.KwonSH;OkamotoY;YamamotoCCelluloseDimethylphenylcarbamate-bondedCarbon-cladZirconiaforChiralSeparationinHigh-performanceLiquidChromatography2006(12)3.谷焕鹏;胡升芳;高明堂手性固定相在高效液相色谱中的应用研究进展[期刊论文]-中国药房2005(18)4.DavankovVAResolutionofRacematesbyLigandExchangeChromatographyAdvancesinChromatography2000(01)5.BergqvistY;AlKabbaniJ;PetterssonCEnantioselectiveHigh-performanceLiquidChromatographicDeterminationof(SR)-and(RS)-mefloquineinPlasmaUsingN-benzyloxycarbonyl-glycyl-L-prolineasChiralCounterion1993(02)6.罗维早;李章万;张志荣手性药物的色谱分离进展[期刊论文]-华西药学杂志2000(04)7.蔡小淦;姚彤炜;潘莉β-环糊精流动相和手性配位交换HPLC法分离药物对应体[期刊论文]-中国现代应用药学1998(05)8.宁凤容;黄可龙;刘素琴手性流动相HPLC法拆分萘普生对映体的研究[期刊论文]-分析试验室2006(06)9.AndrisanoV;GottiR;CavriniVCapillaryElectrophoreticandHigh-performanceLiquidChromatographicStudiesoftheEnantioselectiveSeparationofα1-adrenoreceptorAntagonists1998(1/2)10.陈冰;蔡卫民;万伟人血浆中普罗帕酮对映体浓度的立体选择性HPLC测定法[期刊论文]-中国药学杂志1998(09)11.邱宗荫;阳华学;李惠芝柱前手性衍生化反相高效液相色谱法拆分地佐西平异构体的研究2005(06)12.王亚芹;钟大放;陈仁弟柱前衍生化反相HPLC法测定血浆中普罗帕酮的对映异构体1998(02)13.母昭德;李惠芝;邱宗荫酮洛芬对映体的柱前手性衍生化RP-HPLC分离研究[期刊论文]-西南师范大学学报(自然科学版)2002(01)14.何永祝;庞浩;廖兵纤维素衍生物手性固定相研究进展[期刊论文]-化学进展2006(08)15.申睿;谢剑炜手性选择剂及其在手性药物分离分析中的应用进展[期刊论文]-国外医学(药学分册)2005(06)16.崔颖;张莉;张喜云高效液相手性固定相环糊精及其衍生物[期刊论文]-武警医学院学报2003(01)17.黄河;戴晓莉;倪江洪HPLC法及毛细管电泳法在手性药物拆分中的应用[期刊论文]-华西药学杂志2003(04)相似文献(10条)1.学位论文徐旭柱前衍生结合手性固定相HPLC法测定手性药物的光学纯度2007高效液相色谱(HPLC)法是分离手性物质的一种快速、有效的方法。其中，手性固定相(CSP)特别是Pirkle型(刷型)手性固定相常用于HPLC中的手性分离，近年来已广泛应用于手性药物或中间体的制备分离以及手性药物光学纯度的测定。Pirkle型CSP能够分离的物质较多，但是由于其结构特点，仍有局限性。为了扩大分离范围，本文利用柱前衍生化与手性固定相HPLC法相结合的原理，根据CSP的特点，对手性药物进行柱前衍生化，使两个对映体的衍生物与CSP发生的相互作用差别更大，从而使两个对映体的衍生物在CSP上得到很好的分离。利用这种方法，一些原来在选用的CSP上不能手性分离的物质，如2-羟基酸(扁桃酸)、α-苯乙胺等，其衍生物得到了很好的分离效果。采用的衍生化法是生成酰胺基团，这些衍生化方法简单快速稳定，消旋化现象少，衍生试剂选择范围广泛，具有很好的实用性。本文采用正相HPLC条件对手性物质进行分离。在分离手性物质的过程中，影响分离的主要因素有流动相组成、柱温等。本文以正己烷为基本成分的流动相，分别考察了添加极性剂如异丙醇、乙醇等对分离的影响；还适当添加乙酸类物质来改善色谱峰形；还通过改变柱温等条件使手性物质在Pirkle型CSP上得到最优分离。结合相应的色谱分离热力学函数，对对映体拆分机理进行了深入地探讨并给出了一些药物对映体分子与手性固定相分子的手性识别模型。本文利用手性对映体光学纯度的定义公式，又利用高效液相色谱中色谱峰面积与物质的量成正比的原理，实现了高效液相色谱对手性药物光学纯度的测定。通过实验测定不同光学纯度的手性药物，进一步与旋光仪方法的测定比较，得到最佳测定方法。该方法简单、快速、准确，在药物不对称反应的研究及药物生产的质量监控都具有非常重要的意义。2.期刊论文蒋淑敏.宋瑞.高洪涛.胡育筑.JIANGShu-min.SONGRui.GAOHong-tao.HUYu-zhu非负矩阵因子分解算法解析手性药物重叠峰的HPLC-DAD数据-中国药科大学学报2006,37(5)目的:研究非负矩阵因子分解算法(NMF)用于手性药物HPLC-DAD二维数据解析的可行性及其影响因素.方法:根据化学波谱的基本特征如色谱的单峰性改进NMF算法.考查组分之间色谱分离度、光谱相似程度以及迭代次数对模拟重叠峰解析结果的影响,并将NMF算法应用于实测体系盐酸舍曲林对映异构体体(cis-1R,4R;cis-1S,4S)重叠峰解析.结果:解析结果表明,在色谱严重重叠,光谱相似甚至完全相同时,在合适的迭代次数下,NMF能解析出重叠峰中各单组分的光谱和相应色谱.结论该种二维数据的解析方法,将为混合样本特别是手性药物混合体系的分析提供新途径.3.学位论文李芳几种药物对映体的HPLC拆分方法及药动学研究2009手性药物的生物活性与其立体构型密切相关，手性药物对映体通过手性识别机制与体内内源性大分子物质结合，产生一系列生理生化反应，由于立体结合位点的不同而产生不同的药动学特征和药理学作用。因此，手性药物的分离测定，对于研究药物的体内药动学过程，研究其药理和毒理作用机制以及质量控制都具有重要的意义。本文研究了应用直链淀粉手性固定相法(ChiralpakAD-H)和α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)手性固定相法分离普萘洛尔，比索洛尔、美托洛尔、阿替洛尔、卡维地洛、氨氯地平、非洛地平、尼莫地平和西替利嗪等九种手性药物对映体，探讨了拆分机理，并对西替利嗪在大鼠体内的立体选择性药物动力学进行了研究。1.用直链淀粉手性固定相拆分普萘洛尔等四种手性药物采用高效液相色谱法，使用直链淀粉手性固定相(ChiralpakAD-H手性柱)在正相洗脱方式下拆分普萘洛尔、美托洛尔、阿替洛尔、比索洛尔和卡维地洛五种手性药物。考察了流动相中有机改性剂的种类和浓度、酸碱浓度、柱温、流速等因素对对映体拆分的影响，优化了色谱条件。除卡维地洛外，其余四种药物对映体均达到了基线分离，在此基础上并对分离机理进行了探讨。2.用α1-酸性糖蛋白手性固定相拆分氨氯地平等四种药物采用α1-酸性糖蛋白手性固定相，建立了HPLC法拆分氨氯地平、尼莫地平、非洛地平和西替利嗪四种药物对映体。考察了流动相中有机改性剂种类和浓度、缓冲盐浓度和pH值、柱温以及流速等因素对对映体分离的影响，优化了色谱条件，并对分离机理进行了探讨。3.大鼠血浆中西替利嗪对映体的测定和立体选择性药物动力学研究建立非手性与手性色谱系统相结合的方法定量测定大鼠血浆中西替利嗪对映体。研究了大鼠单剂量灌胃给予西替利嗪消旋体后两对映体在体内的药物动力学过程。结果表明血浆中左旋西替利嗪的浓度始终高于右旋体；左旋对映体的AUC0-t值是右旋体4.4倍，Cmax值是右旋体的3.5倍，两对映体的AUC和Cmax均有显著性差异(P0.05)，说明西替利嗪在大鼠体内的药物动力学具有立体选择性。4.期刊论文王保成.WangBaocheng手性药物的液相色谱分析-化工时刊2009,23(12)手性药物的HPLC分析是药物分析中较新的研究领域,综述了近年来手性药物色谱分离的研究进展.对手性衍生化试剂法和手性固定相法的分离机理、检测方法、试剂种类和应用等作了介绍.5.学位论文张哲峰几种芳环类手性药物HPLC拆分机理初探与应用研究2008论文题目：几种芳环类手性药物HPLC拆分机理初探与应用研究作者简介：张哲峰，男，主任药师，1965年出生，1996年在河北医科大学攻读药剂学硕士学位，并于1998年获医学硕士学位。2001年9月在河北大学攻读分析化学专业博士学位，研究方向为色谱与分离科学，并于2004年7月获理学博士学位。2006年2月起师从杨更亮教授，进行手性药物拆分的博士后研究工作。论文摘要：手性固定相(CSP)法和手性流动相添加剂(CMPA)法是目前拆分药物对映体常用的两种直接拆分法。本文对卵粘蛋白、胃蛋白酶蛋白质手性固定相、纤维素衍生物手性固定相和氨基酸铜离子CMPA拆分罗哌卡因、丁基苯酞以及RAQl28等几种芳环类药物对映体的机理进行了初步探讨，并对其相关共性原理进行了归纳分析，对今后同类药物对映体拆分研究具有一定指导和启发作用。第一章是综述部分，对药物对映体间的药代动力学、临床药效学间的差异和药物对映体HPLC拆分研究新进展进行了综述，并展望了手性色谱学的发展前景。第二章是蛋白质CSP用于药物对映体拆分的研究。探讨构建高效蛋白结构域或纯蛋白手性色谱媒介的方法，采用二琥珀酰亚氨基碳酸二酰胺(DSS)作交联剂，将卵粘蛋白及胃蛋白酶蛋白等蛋白结构域交联制备CSP，试验表明，用蛋白质片断或结构域制备CSP，能够提高手性拆分能力和柱容量，蛋白质-CSP要求被分析化合物手性中心附近应具有可形成氢键的基团和芳环结构。卵粘蛋白柱对于酸性或碱性化合物对映体有较好的拆分能力；胃蛋白酶柱因具有较低的等电点，适合于碱性和不带电对映体拆分，但难以拆分酸性对映体。静电作用是影响保留的因素之一，可通过调节流动相pH值优化对映体分离；同一般的反相色谱系统一样，调节流动相有机改性剂比例可明显影响对映体的保留值及其分离度；流动相中盐浓度升高，离子强度增大，这就削弱了对映体与CSP之间的静电作用使保留降低；卵粘蛋白和胃蛋白酶最适宜的流动相pH值范围分别为3-7.5和3-6，有机改性剂量分别可达50％和10％，柱温可达40℃和30℃，超出此范围可引起蛋白变性，色谱柱受损。本研究制备的蛋白质CSP，克服了此类CSP柱容量低、易超载的不足，通过对流动相pH值、有机改性剂浓度、离子强度及温度对罗哌卡因对映体在两种蛋白质CSP上色谱行为的影响进行了系统研究，成功拆分了罗哌卡因对映体，并使得蛋白质整体柱的制备成为可能。第三章是纤维素衍生物CSP用于药物对映体拆分的研究。通过对纤维素衍生物固定相与药物对映体结构特征的匹配性考察，进一步探讨了其手性识别机理：手性拆分的前提是对映体进入纤维素螺旋型手性腔中，在螺旋状沟中进行多次作用，从而达到手性拆分；其规整的高级结构对光学拆分具有重要作用，取代苯基上的斥电子基团(如甲基等)对螺旋型构象的规整性起稳定作用；纤维素衍生物结构中的酰胺基团、酯羰基和取代苯基与对映体之间较强的氢键作用和π-π电子相互作用使得这类固定相的手性识别能力大为增强。由于这类CSP的手性空腔极性很弱，对芳香族化合物有高亲和性，因此对含苯环、萘环和极性取代基的对映体都具有较好