分光光度法基本原理光又是一种电磁波,其传播呈波动性质,具有波长和频率的特征。γ射线X射线紫外线可见光红外线无线电波人肉眼可见的电磁波称可见光,波长范围在400-760nm。200-400nm为紫外光区,760-500000nm为红外光区可见光区的电磁波,因波长的不同而呈现不同的颜色,称为单色光单色光并非单一波长的光,而是一定波长范围的混合光一切物质都会对某些波长的光进行吸收,不同物质对不同波长的光表现为不同的吸收现象物质的吸收光谱与它们自身的分子结构有关,不同的物质由于其分子结构的不同,对不同波长光线的吸收能力也不同在一定条件下,其吸收程度与该物质的浓度成正比分光光度法利用分光光度计测量不同浓度溶液对同一波长光的吸光度通过比较溶液的吸光度来比较它们的浓度比色法分光光度计的结构光源单色器吸收池感光器测量器(待测溶液)光源发光强度高、光谱范围较宽、稳定和使用寿命长钨灯和氢灯(或氘灯)单色器将混合光波分解为单一波长光多用棱镜或光栅根据需要选择一定波长范围的单色光狭缝一对隔板在光通路上形成的缝隙通过调节缝隙的大小调节入射单色光的强度吸收池比色杯、比色皿或比色池可见光范围内测量时选用光学玻璃比色皿在紫外线范围内测量时必须用石英比色皿感光器光电池、真空光电管或光电倍增管将接收到的光能转变为电能,并应用高灵敏度放大装置,将弱电流放大测量器测量感光器所产生的电能,由电流计显示出电流的大小在仪表上可直接读出待测溶液的吸光度值已知浓度C(已知)吸光度值A(未知溶液)-----------------------=-------------------------------待测浓度C(未知)吸光度值A(已知溶液)待测溶液浓度计算