淋巴瘤知识入门

淋巴瘤知识入门本幻灯片大部分图片内容来自陈国璋教授的慷慨馈赠特此致谢！诊断的客观条件诊断外部条件制作精良的HE切片质控良好的免疫组化染色临床病史分子生物学检测（可选）流式细胞光度术（可选）正常淋巴结结构淋巴结结构皮质区副皮质区髓质包膜和纤维分隔窦区流入淋巴管纤维包膜边缘窦次级滤泡套区生发中心初级滤泡纤维分隔皮质区流入淋巴管髓质及淋巴窦肥胖内皮的小静脉门区淋巴窦静脉动脉流出淋巴管副皮质区髓索皮质区:B细胞区初级淋巴滤泡–初始B细胞和成熟B细胞–滤泡树突细胞CD21皮质区：淋巴结的B细胞区次级淋巴滤泡–中心母细胞,中心细胞(滤泡中心B细胞;CD10+)–滤泡树突细胞–T细胞(CD10强+;常CD4+/T辅助及CD57+)–吞噬碎片的巨嗜细胞–套区B细胞(IgM+D)次级滤泡结构示意图边缘区细胞(IgM)套区细胞(IgM+D)生发中心细胞(IgM,IgG,IgAorIgE,notIgD)CD20CD21CD10CD20皮质区：淋巴结的B细胞区边缘区B细胞–多数淋巴结中不明显–在腹腔淋巴结容易见到，即在套区外侧，淡白色区域，胞浆较丰富、透明MantlezoneMarginalzoneCD20皮质反应性增生改变反应性滤泡增生–对T细胞依赖抗原反应而发生–生发中心有极性：亮区及暗区，扁桃体最明显–可伴有浆细胞增多抗原流入的方向套细胞在顶端较厚“帽子”生发中心的亮区（中心细胞较多）生发中心的暗区(中心母细胞较多)DarkzoneLightzoneKi67副皮质区：淋巴结的T区T细胞为主(CD4CD8):小淋巴细胞，偶有较大的T细胞(一些散在于副皮质区的大细胞是激活的B细胞)高度增生内皮的小静脉(淋巴细胞在其内流通)S100+的细胞(指突状树突状细胞)Cytokeratin+树突细胞(纤维母细胞性树突细胞?)IDCCD3CD20副皮质区的反应性增生最常见原因:病毒感染,过敏反应,肿瘤引流淋巴皮质增宽,有时形成结节.T结节紧邻B滤泡，有时融合高度增生内皮细胞的血管;混合性小细胞和免疫母细胞髓索有较多浆细胞可显著或不明显B细胞反应时可显著,如反应性滤泡增生、浆细胞性Castleman病时窦流入淋巴管边缘窦淋巴内窦髓质淋巴窦流出淋巴管淋巴窦被覆窦内衬细胞(有桥粒).窦内有一些组织细胞和淋巴细胞腹腔内淋巴结淋巴窦常明显扩张结缔组织网架纤维包膜以及向淋巴结内伸出的纤维小梁构成网架正常情况下不明显反应性增生及周围淋巴结肿大时较明显AnyQuestion?Takeabreak!免疫组化的一般问题免疫组化的重要性鉴别淋巴瘤VS反应性增生鉴别淋巴瘤VS其他恶性肿瘤淋巴瘤的分类淋巴瘤的预后及临床分期治疗靶标没有高质量的免疫组化就不能很好地进行淋巴瘤诊断染色结果的判定正确的染色结果判定，比免疫组化染色本身一样重要染色的判断必须紧密结合组织学，必须确定究竟应该是哪一种细胞着色，哪一种成分不应着色CD20染色结果的判断必须申明哪种细胞为阳性，尤其是病变含有多种细胞成分时如果病理报告如下:CD20+,CD3+,CD5+,Bcl2+,CD10-,Bcl6-，没有价值正确的表述:–大细胞CD20+,CD3-,CD5-,CD10-–背景的小淋巴细胞：CD3+CD5+CD8+–有散在的网格状CD21+滤泡树突细胞染色结果的判断阳性比阴性更有价值，因为阴性可能由于：–抗原丢失–抗原修复不足–敏感性不足–抗体过期–加错抗体或试剂添加步骤错误染色结果的判断必须有阳性的内对照和外对照，证明染色结果可信染色应得到正确的预期结果–大多数白细胞的标记为膜阳性–TdT,S100及转录因子类抗体均为核阳性CyclinD1CD20TdT淋巴细胞的表型BTNK紧密相关淋巴系统的形成胸腺?骨髓?Peyer结淋巴结、脾、粘膜组织中心淋巴组织:“前驱”细胞的贮存库;由此细胞发育成熟外周淋巴组织:成熟细胞的贮存库准备对抗原产生反应TBNK?前前B细胞前B细胞不成熟B细胞成熟B细胞激活的B细胞浆细胞前驱细胞，非抗体依赖初始（Virgin）B细胞，非抗体依赖中心细胞&中心后细胞;抗体依赖TdTCD20,CD22CD19,PAX5CD79aCD10Bcl-6CD138CytoplasmicCD22前胸腺细胞包膜下胸腺细胞皮质胸腺细胞髓质胸腺细胞外周T细胞前驱细胞成熟T细胞CytoplasmicSurfaceCD4CD8CD1CD4,CD8CD3CD2CD7TdT淋巴瘤VS其他恶性肿瘤?有时淋巴瘤与分化差的癌、恶性黑色素瘤、肉瘤鉴别非常困难淋巴瘤也可有各种形态(如小梁状排列、粘液变性、菊形团、梭形细胞)免疫组化对于鉴别很有帮助对于分化差的肿瘤LCACytokeratinS100protein淋巴瘤/白血病+*--癌-+-/+恶性黑色素瘤--+肉瘤---/+*大细胞间变淋巴瘤和淋巴母细胞淋巴瘤可以LCA阴性–需要加染其他标志(如CD30)Cytokeratin,CAM5.2白细胞共同抗原CD45(CD45RB):–Leukocytecommonantigen–除浆细胞之外的所有正常淋巴细胞(B,T或NK系)–Reed-Sternberg细胞(Hodgkinlymphoma)CD45-–通常对于淋巴瘤，不必染LCA:直接染CD20和CD3扁桃体LCA/CD45免疫组化对淋巴瘤分类有多重要?只有极少数淋巴瘤不做免疫组化，可明确诊断:–滤泡性淋巴瘤–边缘区B细胞淋巴瘤,粘膜相关淋巴组织类–小淋巴细胞淋巴瘤绝大多数其他类型均需要免疫组化，尤其是:–套细胞淋巴瘤–弥漫大B细胞淋巴瘤–各种T细胞淋巴瘤B系细胞标记CD20(e.g.L26):–非常敏感(95%B细胞淋巴瘤阳性),有时B小淋巴细胞淋巴瘤染色不佳，B细胞淋巴母细胞淋巴瘤可为阴性–浆细胞、浆细胞瘤和浆母细胞淋巴瘤阴性(对于这类肿瘤，CD20阴性是一诊断线索)–核阳性不能判定为阳性，任何细胞过度热修复均可核阳性CD20B系细胞标志CD79a(mb-1):–Bcellreceptorcomplex:sensitiveandspecificBcellmarker(normalplasmacellsarepositive;germinalcentercellsarestainedweakly)–~50%plasmacytomasarepositive–ButcanbepositiveinT-lymphoblasticlymphoma/leukemia–Antibodyexpensive:Useasback-upImmunoglobulin(cytoplasmicand/orsurfaceIg)CD79aCD79aPlasmacytomaNewB-lineagemarker–PAX-5–Oct-2–Bob.1PAX-5PAX-5PAX-5Oct-2Bob.1Oct-2Bob.1T-系细胞标志胞浆CD3(polyclonalagainstCD3e,monoclonalalsoavailable,e.g.PS1):–T系细胞高度敏感和特异–核周或核皱折处染色深–组织细胞有时弱浆阳性，但无核周浓聚–90%T和NK细胞淋巴瘤阳性–合并使用其他T细胞标志(e.g.CD45RO,CD2)CD3CD3T系细胞标志表面CD3(e.g.Leu4,T3,OKT3):–需要冰冻切片染色–大部分T细胞淋巴瘤表面CD3阳性–NK细胞表面CD3-,胞浆CD3+εT系细胞标志CD45RO(e.g.UCHL1,A6):–高度敏感的T细胞标志，一些T细胞淋巴瘤CD3-CD45RO+–但组织细胞和髓系细胞及其肿瘤也阳性CD43(e.g.MT1,DFT1,Leu22):–高度敏感的T细胞标志，但不特异–组织细胞和髓系细胞及其肿瘤也阳性–EBV感染时，B细胞也表达–小B细胞淋巴瘤时也为阳性T系细胞标志CD4,CD8:–诊断T细胞淋巴瘤时并不常用CD2:–敏感而特异的全T细胞标志–比CD3贵，备用标志CD7:–T细胞发育早期阶段表达–尤其在诊断T淋巴母细胞淋巴瘤时有用(一些病例CD3-)一个新的T细胞标志:LAT当一个“淋巴瘤”仅CD43阳性时可能是一个真正的T细胞淋巴瘤/白血病一定要考虑到:–髓系白血病/粒细胞肉瘤–组织细胞肿瘤i.e.thespecificTandBmarkersnegativeCD43+:Tcelllymphoma?No:SeemyeloperoxidaseNK细胞标志CD56(e.g.123C3):–NK细胞淋巴瘤的最好标志–不完全是NK细胞特异性标志;一些表达gdT细胞受体的T细胞淋巴瘤也阳性–CD56在神经细胞和神经内分泌细胞也阳性，诊断NK细胞淋巴瘤时必须有其他白细胞标志CD56(NK/Tcelllymphoma)小结:B或者T细胞淋巴瘤？CD20＋CD3CD20+B细胞淋巴瘤;加其他分类标志CD3+T或NK细胞淋巴瘤;加其他标志(CD56,CD30)CD20-CD3-非造血组织肿瘤?浆细胞瘤?浆母细胞性淋巴瘤?T细胞淋巴瘤?淋巴母细胞淋巴瘤?淋巴瘤进一步分类小B细胞淋巴瘤–CD5–CD23–IgD–CyclinD1–bcl-6orCD10淋巴瘤进一步分类Bcl-2:–仅区别反应性增生和滤泡性淋巴瘤诊断浆细胞瘤:–LCA–L26(-),CD79a(+/-),CD138(+),Oct-2(+),Bob.1(+),Ig(+)CD138(syndecan-1)CD138在浆细胞、浆母细胞和一些免疫母细胞的胞膜阳性表达用于诊断浆细胞瘤单独的CD138阳性不足以诊断浆细胞瘤，必须加LCA(CD45)等CD138LCA/CD45淋巴瘤进一步分类CD10–CD10急性淋巴母细胞白血病标志,也表达于正常的生发中心B细胞和中心T细胞–价值:滤泡中心细胞分化(滤泡性淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤、一些大B细胞淋巴瘤)血管免疫母T细胞淋巴瘤CD10StronglypositivecellsareTcellsRFHFL淋巴瘤进一步分类Bcl-6–核阳性–正常表达于滤泡中心B细胞、滤泡周围的CD30+细胞和少数T细胞–以下淋巴瘤阳性:滤泡性淋巴瘤一些大B细胞淋巴瘤Burkitt淋巴瘤一些大细胞间变性淋巴瘤Bcl-6Bcl-6淋巴瘤进一步分类滤泡树突细胞标志(CD21,CD35,clusterin)助于诊断–滤泡性淋巴瘤–套细胞淋巴瘤(疏松散在网格)–血管免疫母T细胞淋巴瘤大细胞间变性淋巴瘤–CD30,ALK1Mantlecelllymphoma:CD21AngioimmunoblasticT-celllymphomaTonsil:ClusterinFollicularlymphomawithdiffusecomponent:ClusterinCD30激活淋巴细胞标志淋巴结反应性增生时CD30+细胞增多必须是膜+/-高尔基区阳性、弥漫浆着色不应判定为阳性CD30＋–经典的何杰金–间变性大细胞淋巴瘤–其他一些大细胞淋巴瘤CD30CD30淋巴瘤进一步分类Ki67:帮助诊断Burkitt淋巴瘤(~100%)细胞毒性标志,e.g.TIA1,granzymeB,NK/T细胞性淋巴瘤、脂膜炎样T细胞淋巴瘤淋巴母细胞淋巴瘤:TdTBurkittlymphomaTIA-1TdT(terminaldeoxynucleotidyltransferase)TdT(thymoma)TdT(tonsil)T-lymphoblasticlymphoma淋巴瘤的分期和预后–套细胞淋巴瘤中，高Ki67index与预后不良有关–ZAP-70表达是B-CLL预后不良的标志–大细胞间变淋巴瘤:ALK+比ALK-预后要好ALK1原发系统性ALCL的总生存期(Falinietal,1999)0510YearsALCL,t(2;5)orALK+100%50%ALCL,t(2;5)orALK-淋巴瘤的预后与分期累及其他部位的淋巴瘤，如骨髓等，可以用一些标志检测出来–ALK、CD30：大细胞间变淋巴瘤–CyclinD1：套细胞淋巴瘤–CD56：NK细胞淋巴瘤ALK1治疗靶标治疗性抗体的靶标:–anti-CD20(Rituximab，美洛