药物的鉴别试验课程课件(最终修改)分析

第二章药物的鉴别试验分析检测教研室2第一节概述•药物鉴别试验的意义与目的•问题：鉴别的定义是什么？3药物的鉴别试验（identificationtest)•是根据药物的分子结构、理化性质,采用化学、物理化学或生物学方法来证明已知药物的真伪。•是药检工作的首要任务，杂质检查、含量测定的前提。4注意：•药物鉴别试验是用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而不是对未知物进行定性分析，因为这些鉴别试验虽有一定的专属性，但不具备进行未知无确证的条件，故不能鉴别未知物5第二节鉴别试验的项目•性状•一般鉴别试验•专属鉴别试验6一、性状•外观：感观规定，一般性的描述。如二巯基丁二钠的描述为“本品为白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭”。•溶解度：反映了在某种溶剂中的溶解性能。•物理常数:评价药品质量的重要指标，反映药品的纯净程度。熔点、比旋度、吸收系数、凝点、折光率、相对密度、馏程、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值等71.外观：指药品的外表感观和色泽，包括聚集状态、晶型、色泽以及臭、味如：维生素B1“本品为白色结晶或结晶粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空气中迅即吸收约4%的水分”（色泽（聚集状态）（臭）（味）8极易溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂不到1ml中溶解；易溶系指溶质1g(ml)能在溶剂1～不到10ml中溶解；溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂10～不到30ml中溶解；略溶系指溶质1g(ml)能在溶剂30～不到100ml中溶解；微溶系指溶质1g(ml)能在溶剂100～不到1000ml中溶解;极微溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂1000～不到10000ml中溶解；几乎不溶或不溶系指溶质1g(ml)在溶剂10000ml中不能完全溶解。2.溶解度试验法：①供试品准确称取研成细粉②在25℃±2℃，加溶剂③每隔5min振摇30s无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解9（1）熔点1）定义：Ch.P规定,熔点系指一种物质由固体熔化成液体的温度、熔融同时分解的温度，或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。如：雌二醇：175－180℃醋酸地塞米松：223－233℃3.物理常数样品发毛收缩液滴（初熔）澄清（全熔）102）测定方法分三法：第一法：测定易粉碎的固体药品如各种结晶型药物第二法：测定不易粉碎的固体药品如脂肪、石蜡、羊毛脂第三法：测定凡士林或其他类似物质（详见：Ch.P2010年版二部附录ⅥC）11温度计分浸型，具有0.5℃刻度，须先经校正传温液m.p＜80℃水m.p＞80℃硅油或液状石蜡注意事项：12（2）相对密度1)基本原理相对密度系指在共同的特定条件下(如同一温度等)，某物质的密度与另一参考物质的密度之比。3.物理常数13•《中国药典》要求在相同条件下，液体药物比纯化水重的倍数，除另有规定外，温度均指20℃时的比值。•纯药物的相对密度在特定条件下为不变的常数，药物的纯度改变，相对密度也随之改变，所以测定相对密度，可以区别或检查药物的纯杂程度。142)相对密度测定方法比重瓶法韦氏比重秤法20℃液体药物密度/水密度供试品用量少较常用仅用于易挥发液体15比重瓶法16新沸约20℃的水精密称定重量20℃水浴放置10～20min迅速精密称定比重瓶洗净、干燥带塞精密称定比重瓶法17韦氏比重称法18应用举例：191.我国药典规定“熔点”的含义系指固体A.自熔化开始点到液化点B.自熔化开始点到崩坍点C.自收缩点到液化点D.自崩坍点到液化点E.自熔化开始点到熔化澄明点练习202.中国药典规定“熔点”系指A.固体初熔时的温度B.固体全熔时的温度C.供试品在毛细管内收缩时的温度D.固体熔化时自初熔至全熔的一段温度E.供试品在毛细管内开始局部液化时的温度211）基本原理反映手性药物特性及其纯度的主要指标。（3）旋光度不对称碳原子H︱R－C－R′︱CH3手性碳原子具有光学活性3.物理常数22COHHCHOHCHOHCHCHOHCH2OHO葡萄糖23旋光度直线偏振光通过含有某些光学活性的药物液体时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，旋转的度数称为旋光度。偏振光向右旋转者（顺时针方向）为右旋，以“＋”符号表示；使偏振光向左旋转者(反时针方向)为左旋，以“－”符号表示24钠光谱D线（589.3nm）比旋度[]测定管长为1dm、浓度为1g/ml时测得的旋光度20DlctD25计算液体供试品ld20D][液体的相对密度26lctDlml/gctDlctD100%固体供试品272）旋光仪的检定旋光管标准石英旋光管基准物蔗糖28A、比旋度的测定中国药典许多药物（如硫酸奎宁、肾上腺素、葡萄糖等）的性状项下规定了比旋度的测定，既判别了药物的真伪，又检查了药物的纯度应用举例29B、在杂质检查中的应用如硫酸阿托品中莨菪碱的检查C、在含量测定中的应用如葡萄糖注射液的含量测定301：旋光计的检定，中国药典（2000年版）规定用A、葡萄糖作基准物B、水杨醛作基准物C、半乳糖作基准物D、水合氯醛作基准物E、蔗糖作基准物练习312.测定盐酸土霉素的比旋度时，若称取供试品0.5050g，置50ml量瓶中，加盐酸液（9→1000）稀释至刻度，用2dm长的样品管测定，要求比旋度为–188～–200。则测得的旋光度的范围应为A、–3.80～–4.04B、–380～–404C、–1.90～–2.02D、–190～–202E、–1.88～–2.00lctD322505050.01882505050.020080.304.4333.测定某药物的比旋度，配制的供试品溶液浓度为50.0mg/ml，样品溶液宽2dm，测得旋光度为+3.25°，则比旋度为A.+6.50°B.+32.5°C.+60.0°D.+16.25°E.+325°lctD344.旋光度测定法可检测的药物是A.具有立体结构的药物B.含有共轭系统结构的药物C.脂肪族药物D.结构中含手性碳原子的药物E.结构中含氢键的药物355.比旋度的符号应是A.B.CD.PaE.dm20D][.C366.旋光计的检定，中国药典（2010年版）规定用A.葡萄糖作基准物B.水杨醛作基准物C.半乳糖作基准物D.水合氯醛作基准物E.标准石英旋光管377.可用旋光度法测定的药物是A、对氨基水杨酸B、氯丙嗪C、氯氮卓D、葡萄糖注射液E、盐酸利多卡因38（4）吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。表示方法：摩尔吸收系数ε百分吸收系数用途：检查纯度测定制剂含量%1cm1E3.物理常数39二、一般鉴别试验（generalidentificationtest）Ch.P附录Ⅲ中有：有机氟类、有机酸盐类（水杨酸盐）、芳香第一胺类、托烷生物碱类、丙二酰脲类无机金属类（Na+,K+,Ca2+,Ba2+,Li+,Fe3+,Al3+,Zn2+,Cu2+,Ag+,Hg2+等）无酸盐类(Cl-、SO42-、NO3-)40一般鉴别试验（generalidentificationtest）•是指依据某一类药物的共同的化学结构或相同的理化特性，来鉴别药物的真伪。有机药物--------官能团无机药物--------阴离子、阳离子一般鉴别试验用于证实药物是哪一类，要进一步证实是哪一种药物，还需要结合专属鉴别试验411.有机氟化物有机氟氧瓶燃烧无机氟离子pH4.3茜素氟蓝硝酸亚铈蓝紫色络合物碱液吸收一般鉴别试验的典型实例42药典原文432.有机酸盐(1)水杨酸盐P65水杨酸+FeCl3红色配位化合物紫色配位化合物6+4FeCl3+12HCl水杨酸盐+稀盐酸→水杨酸（白色沉淀）溶于醋酸铵一般鉴别试验的典型实例44一般鉴别试验的典型实例（2）苯甲酸盐COONa73FeCl32OH-中性溶液COO6Fe3(OH)2OOC7NaCl2Cl-COONa73FeCl32OH-中性溶液COO6Fe3(OH)2OOC7NaCl2Cl-碱式苯甲酸铁盐（赭色沉淀）COOH稀盐酸白色B.苯甲酸盐在干燥试管中，加硫酸后，加热，析出苯甲酸晶体并具有升华现象。A.苯甲酸盐在中性或碱性溶液中与三氯化铁生成赭色铁盐沉淀，沉淀加稀盐酸后分解，苯甲酸游离成白色沉淀析出。45供试品+稀盐酸0.1mol/L亚硝酸钠碱性-萘酚试液橙黄色到猩红色沉淀3.芳香第一胺类一般鉴别试验的典型实例46反应原理：β-奈酚试液要现用现配不同的供试品，会生成橙黄色到猩红色沉淀47药典原文•鉴别方法：取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶，放冷，加亚硝酸钠溶液（0.1mol/L）数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成橙黄色到猩红色沉淀。484.无机金属盐（Na,K,Ca,NH4+)P11－12焰色反应：Na显鲜黄色；K显紫色；Ca显砖红色铵盐：供试品+NaOH氨气使湿润的红色石蕊试纸变蓝使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色一般鉴别试验的典型实例49505.无机酸根氯化物：Cl-+Ag+AgCl白色乳状Cl-+MnO2Mn2++Cl2硫酸盐：SO42-+Ba2+BaSO4白色SO42-+Pb2+PbSO4白色加盐酸，无白色沉淀H2SO4使湿润的KI_淀粉试纸变蓝一般鉴别试验的典型实例51三、专属鉴别试验（specificidentificationtest）•是证实某一种药物的依据。•根据同类药物中每一种药物化学结构的差异理化特性，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。•方法收载于药典正文或国家药品标准各药品质量标准鉴别项下。52共性丙二酰脲-CONHCONHCO-可与某些金属离子（Ag+、Cu2+、Hg2+等）反应呈色或产生沉淀巴比妥类药物R+2AgNO3+2HNO3一般鉴别试验53与Pb2+反应生成黑色PbS甲醛硫酸反应碘取代反应专属鉴别试验硫喷妥钠司可巴比妥苯巴比妥54专属鉴别一般鉴别试验与专属鉴别试验的差别？一般鉴别试验：共同化学结构具有相同的物理化学性质来进行药物真伪的鉴别。专属鉴别试验：在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异来鉴别。一般鉴别试验：区别不同类别的药物。专属鉴别试验：区别同类药物或具有相同化学结构中的某一个药物。1）理论依据不同：2）目的不同：55第三节鉴别方法一、化学鉴别法二、光谱鉴别法三、色谱鉴别法56一、化学鉴别法供试品加入适当的试剂，在一定条件下，发生化学反应，通过产生可观测到的明显现象，来鉴别药物真伪的方法。化学鉴别法特点操作简便、反应快速、实验成本低、应用广但专属性比仪器分析法差分为：1.呈色反应鉴别法2.沉淀生成反应鉴别法3.荧光反应鉴别法4.气体生成反应鉴别法5.试剂褪色的鉴别法57一、化学鉴别法1.呈色反应鉴别法供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成有色产物①三氯化铁呈色反应（酚羟基）②有机氟化物的茜素氟蓝法③芳香第一胺类重氮化-偶合反应582.沉淀生成反应鉴别法供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成沉淀③还原性基团的银镜反应①丙二酰脲类的硝酸银反应②氯化物的银盐沉淀⑤苯甲酸盐类的三氯化铁反应④生成氧化亚铜红色沉淀反应⑥与重金属离子的沉淀反应一、化学鉴别法593.荧光反应鉴别法①药物本身在可见光下发射荧光如：维生素B2溶液显蓝色荧光②药物与适当试剂反应后发射荧光如：VB1硫色素（蓝色荧光）碱性K3Fe(CN)6一、化学鉴别法604.气体生成反应鉴别法①大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后加热产生氨气。红色石蕊试纸变蓝硝酸亚汞试液湿润的试纸显黑色一、化学鉴别法61②化学结构含硫药物，可经强酸处理后加热产生硫化氢气体硫鸟嘌呤●7H2O强酸∆H2S（臭鸡蛋气味）使醋酸铅试纸变黑62③含碘有机药物经直火加热可生成紫色碘蒸汽④含醋酸酯和乙酰胺类的药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。63一、化学鉴别法5.试剂退色维生素C与二氯靛酚反应64（6）测定生成物熔点法制备衍生物测定熔点法药物＋试剂新化合物有