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医院感染环境卫生学监测及采样方法重庆三峡医药高专附二院赵运平一、环境卫生学监测空气消毒效果监测手卫生的消毒效果监测物体和环境表面消毒效果监测使用中消毒液的监测二、环境卫生监测学采样采样原则培养基妥善保存，防止污染，及时取样采样后必须尽快送检，时间不得超过4h标本不宜放置4℃冰箱保存（常温保存）注明采集时间、采集人等信息（一）空气消毒效果监测医院空气中微生物含量可以反映空气污染或洁净的程度，是空气卫生学的重要指标。在对经空气传播的病原体引发的感染、特殊环境有意义。非洁净区空气消毒效果监测[范围]普通手术室、各种病房、治疗室、换药室、处置室、检查室、实验室、供应室等[方法]自然沉降法（平板暴露法）[材料]9cm直径普通营养琼脂平板[采样]在消毒处理后，并关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min，再进行采样根据所测房间室内面积大小选择平板数量和布点位置①室内面积≤30㎡，设一条对角线上取三点，即中心一点、两端各距墙1m处各取一点②室内面积＞30㎡，设东、南、西、北、中5点，其中东、南、西、北点均距墙1m将平板放在各采样点，与地面垂直高度80~150cm处，打开平板盖，并扣放于平板边缘上，暴露5min后盖好，立即送检（琼脂底面应朝上）[方法]室内面积≤30㎡，设一条对角线上取三点，即中心一点、两端各距墙1m处各取一点室内面积＞30㎡，设东、南、西、北、中5点，其中东、南、西、北点均距墙1m与地面垂直高度80~150cm[检测]将采样后的平板放置36℃±1℃培养箱，24小时后取出；计算菌落数，必要时，分离鉴定致病菌（金黄色葡萄球菌、溶血型链球菌）。结果计算：细菌总数（cfu/m3）=52.4×菌落总数/平板数[标准]非洁净区空气消毒合格标准类别范围标准（cfu/m3）致病菌Ⅱ类普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、隔离室、供应室无菌间、烧伤病房、重症监护室≤200不得检出Ⅲ类儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间≤500不得检出（二）手卫生的消毒效果监测正确地执行医院洗手的规定，可有效地降低医院感染率。因为医院感染病例相当一部分为接触性传播，其中由医务人员的手传播细菌而造成的医院感染约占30%。采样时间：在接触患者或者从事医疗活动前进行采样。[范围]洗手、卫生手消毒、外科手消毒[方法]棉拭子涂抹法（棉签涂抹法）[材料]10ml的无菌生理盐水[采样]手消毒后，在接触患者或者从事医疗活动前进行采样。被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水的棉拭子1支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂抹面积30c㎡），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检（采样面积按平方厘米计算）。1、根据培养基上菌落形态，挑取可疑菌落进行鉴定，判断是否有金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、溶血性链球菌等生长。2、结果计算：细菌总数（cfu/c㎡）=0.17×菌落总数/平板数医护人员手细菌菌落总数卫生标准类别范围标准（cfu/c㎡）致病菌Ⅰ类层流洁净手术室、层流病房≤5不得检出Ⅱ类普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、隔离室、供应室无菌间、烧伤病房、重症监护病房≤5不得检出Ⅲ类儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间≤10不得检出Ⅳ类传染病房≤15不得检出（三）物体和环境表面消毒效果监测[范围]治疗台面、治疗车、门把手、内镜存放柜内壁、水龙头等[方法]棉拭子涂抹法（棉签涂抹法）[材料]10ml的无菌生理盐水[采样]1、在物体表面消毒处理（待消毒液干）后，或消毒后4小时内进行采样。2、操作者取无菌棉签1支浸入无菌生理盐水采样液当被采表面规则且面积≥100c㎡时，用5×5c㎡的标准灭菌规格板采样100c㎡，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动采样棉签，连续采样1~4个规格板面积。3、当被采表面不规则（如门把手等）或被采表面＜100c㎡时，应取其全部表面（采用棉签直接涂抹物体的方法采样）。4、剪去（或利用试管壁上折断）操作者手接触部位，将采样端棉签装10ml采样液的试管中，立即送检。物体表面消毒合格标准类别范围标准（cfu/c㎡）致病菌Ⅰ类层流洁净手术室、层流病房≤5不得检出Ⅱ类普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、隔离室、供应室无菌间、烧伤病房、重症监护病房≤5不得检出Ⅲ类儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间≤10不得检出Ⅳ类传染病房≤15不得检出（四）使用中消毒剂的监测[范围]戊二醛、碘伏、过氧乙酸、含氯消毒剂、酚类、醇类等液体消毒剂[方法]原液吸取法[材料]9ml指定采样液[采样]用无菌空针抽吸1ml被检样液，加入9ml稀释液中混匀送检。各类消毒剂与相应稀释液消毒剂稀释液醇类、酚类消毒剂普通营养肉汤含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠醛类消毒剂肉汤中加入0.3%甘氨酸使用中消毒剂与无菌器械保存液监测合格标准：1、使用中消毒剂细菌菌落总数应≤100cfu/ml，致病性微生物不得检出。2、无菌器械保存液必须无菌。（五）内窥镜消毒效果监测[采样部位]内镜的内腔面[采样方法]用无菌注射器抽取10ml无菌生理盐水，从待检内窥镜活检口注入，用无菌试管从活检出口收集，及时送检，2小时内检测。[合格标准]消毒后内窥镜：细菌总数＜20cfu/件，不能检出致病菌（包括金黄色葡萄球菌、β溶血链球菌和沙门氏菌）。灭菌后内窥镜：无菌生长。谢谢