化妆品微生物

化妆品微生物化妆品概念化妆品,是指以涂抹、喷洒或者其他类似的方法,散布人体表面任何部位(皮肤、毛发、指甲、口唇),以达到清洁、消除不良气味、护肤、美容和修饰目的的日用化学工业产品。化妆品的特点•施用方式：涂抹、喷洒或其他类似方法，故口服、注射等方法达到美容目的产品不属化妆品。•施用部位：人体表面任何部位，不包括人体内部。•功能：1）清洁；2）护肤；3）美容修饰；4）消除不良气味；5）特殊功能。化妆品的成分•化妆品由基质和辅料组成。•基质：起主要功能作用，常用的有油脂、蜡、粉类物质、水和有机溶剂等。•辅料：赋予化妆品成型、稳定或色、香及其他特定作用，包括乳化剂、香精、色素、颜料、防腐剂、抗氧化剂和其他添加剂。化妆品生境特征化妆品微生物的来源、种类及其卫生学意义化妆品微生物的检验及卫生标准化妆品微生物污染及其预防化妆品生境特征化妆品生境特征1．化妆品原材料营养丰富2.pH值：4～7之间，适合微生物生长。3.适宜的温度化妆品的温度大多在20～30℃之间，正是多数环境微生物的适宜生长温度。4.适量的防腐剂化妆品微生物的来源、种类及其卫生学意义化妆品微生物污染的来源化妆品的一次污染：在生产过程中，从原料到产品的污染称为一次污染，包括原料污染和生产过程污染1、原料化妆品的原料被微生物污染是一次污染的主要原因(1)最易被微生物污染的原料：天然动植物成分及其提取物属于此类。(2)较易被微生物污染的原料：离子交换水(3)微生物污染较少的原料：2．生产过程(1)生产设备：生产用储存锅、搅拌锅、研磨机、输送泵、罐装机等(2)厂房空气：厂房空气中有相当数量的耐干燥的细菌、酵母菌及霉菌孢子，(3)生产人员：人体正常状态下带有无数的微生物，这些微生物可从生产人员身上带到制剂中。(4)包装材料：(5)厂房环境：化妆品的二次污染:指产品在使用过程中被微生物污染消费者使用不当包装设计如：据研究证实，一支新的睫毛膏，使用前污染率仅为1.5%，而使用中其污染率可急剧上升到60%。此外，二次污染的茄病镰刀菌、绿脓杆菌等可伤害角膜，严重时引起角膜炎，甚至导致失明。不同种类化妆品的染菌特点1、膏霜类（护肤类）:水分，碳源和氮源,中性、微碱或微酸性，污染率最高，污染的微生物种类液最多。检出率较高的有粪大肠菌群、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌。此外尚检出有蜡样芽胞杆菌、产气克雷伯氏菌、沙门氏菌、肠杆菌属等。不同种类化妆品的染菌特点2、发用类:富含水分，而且也有微生物生长所需的营养，如水解蛋白、多元醇、维生素等。香波的主要成分烷基硫酸盐等较易繁殖绿脓杆菌等细菌与霉菌。不同种类化妆品的染菌特点3、粉类。为干燥性化妆品。其污染来源主要是原料。粉类化妆品中检出的抵抗力较强的需氧芽胞菌较多。不同种类化妆品的染菌特点4、美容类。高温融熔，染菌量不应高。微生物污染对人健康影响最大，特别是用于眼周围的眼部化妆品和唇膏等。一旦被至病菌污染，将会引起严重后果。化妆品徽生物污染状况1987～2002年间,部分省市卫生监督机构先后对连续监测5～12年的资料进行了分析:江西省疾病预防控制中心对937份化妆品的检测,微生物指标合格率平均为91%;其中细菌总数为94%,粪大肠菌群、致病菌、霉菌和酵母菌为98%～99%。广东省卫生防疫站对2574份化妆品的检测结果显示,微生物指标合格率平均为91%;其中细菌总数为91%,粪大肠菌群、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌为99%～100%。化妆品微生物广东省微生物研究所微生物检测中心对2000－2002年广东省部分化妆品企业送检产品中分离菌株进行了初步分离鉴定:细菌主要有芽胞杆菌属，占细菌总数的28.6%;假单胞菌属占细菌总数的24.1%;葡萄球菌属占细菌总数的18.5%;其他属菌占28.8%，包括沙雷菌属、产碱菌属、微球菌属、气单胞菌属、肠杆菌属、克雷柏菌属、爱文菌属、泛菌属、土壤杆菌属等。霉菌和酵母有木霉属、曲霉属、根霉属、脉抱菌属、短梗霉属、假丝醉母属、红酵母属等这些属的微生物在自然界分布广泛对环境抵杭力较强，污染机会较多化妆品的污染化妆品被微生物严重污染时，可使产品腐败、变质。化妆品被致病菌污染可能诱发感染，用被微生物污染的化妆品涂擦面部可引起疖肿，红斑、炎性、水肿。使用被微生物污染的化妆品，也可成为皮肤化脓感染的原因之一，曾有因使用唇膏和口红而传播性病的报道化妆品的污染被绿脓杆菌污染的化妆品如误入眼内可引起角膜化脓性溃疡，病情严重，发展迅速，1-2天内可引起角膜大片坏死，穿孔，痊愈后留下疤痕或角膜葡萄肿，或白斑化妆品污染腐皮镰刀菌也会引起角膜炎和溃疡被微生物污染的眼线膏和染睫毛油可引起慢性结膜炎和眼睑炎霉菌污染的化妆品，可能致皮肤癣症；化妆品霉菌污染也较严重，某些霉菌产生的毒素对人体危害较大contactdermatitisCosmeticscausedacneCosmeticscausedacnecontactcheilitis研究结果显示:化妆品在使用过程中引起的二次污染非常严重，以细菌总数的污染尤为突出使用时间越长，污染越严重。使用30d的污染程度比使用15d几乎增加一倍。主要是随着使用时间增长，开盖次数增加，空气中的微生物不断落入，加上化妆品富含营养物质，利于微生物繁殖。使用15d的化妆品个人使用与美容院使用合格率类似，但使用30d后个人使用合格率比美容院的低。对使用方法和习惯的调查结果，美容院多由专业美容师使用，操作比较规范，与个人相比，取用时有专门工具，基本上不多取，用后拧紧瓶盖；而个人使时，往往卫生意识不强，从而使二次污染较美容院严重。不同性状的样品中，霜状及液状化妆品二次污染率较高，可能二者含有除营养丰富外水分充足，微生物容易繁殖。化妆品微生物检验目前化妆品检验依据的《化妆品卫生规范》中微生物检验规定的五项指标:菌落总数、粪大肠菌群、绿脓杆菌、霉菌与酵母菌、金黄色葡萄球菌化妆品微生物标准检验方法总则1样品的采集及注意事项1.1所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。包装量小的样品，取样量可酌减。1.2供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。1.3接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。化妆品微生物标准检验方法总则1样品的采集及注意事项1.4若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。1.5在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。1.6如检出粪大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月备查。化妆品微生物标准检验方法总则2不同类型样品的检样制备。2.1液体样品2.1.1水溶性的液体样品，可量取10ml加到90ml灭菌生理盐水中，如样品不少于10ml。仍按10倍稀释法进行。如为5ml则加45ml灭菌生理盐水，混匀后，制成1：10稀释液。2.1.1油性液体。取样品10ml，先加5ml来菌液体石蜡混匀，再加10ml灭菌的吐温80，在40~44℃水浴中振荡混合10min，加入灭菌的生理盐水75ml（在44~44℃水浴中预温），在40~44℃水浴中乳化，制成1：10的悬液。化妆品微生物标准检验方法总则2不同类型样品的检样制备。2.2膏、霜、乳剂半固体状样品2.2.1亲水性的样品，称取10g，加到灭菌的带玻璃珠加有90ml灭菌生理盐水的锥形瓶中，充分振荡混匀，放32℃水浴静置15min。用其上青液作为1：10的稀释液。2.2.2疏水性的样品，称取10g，放到灭菌的研钵中，加10ml灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加10ml灭菌吐温80，研磨待溶解后，加70ml灭菌生理盐水，在40~44℃水浴充分混合，制成1：10稀释液。化妆品微生物标准检验方法总则2不同类型样品的检样制备。2.2膏、霜、乳剂半固体状样品2.2.3固体样品，称取10g，加到灭菌的生理盐水稀释瓶中，振荡混匀，使其分散混悬后，放30~32℃水浴中，15min后取出，充分振荡混合，再放到30~32℃水浴中静置15min，取上清液作为1：10的稀释液。如有均质器，上述水溶性膏、霜、粉剂等，可称10g样品加到90ml灭菌生理盐水，均质1~2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品加到90MLSCDLP液体培养基，或1g样品加1ml灭菌液体石蜡、1ml灭菌吐温80、7ml灭菌生理盐水，均质3~5min。检测的内容：菌落总数霉菌和酵母菌总数特定菌菌落总数的测定化妆品菌落总数是指1g或1ml检样经过处理，在卵磷脂吐温80营养琼脂培养基上，于37℃培养48h后所生长的一群嗜中温的需氧及兼性厌氧的菌落总数。判明样品被细菌污染的程度。菌落总数的测定是对样品进行卫生学总评价的综合依据。标准平板计数法菌落总数的测定操作注意事项1）尽量使菌细胞分散开，使每个菌细胞生成一个菌落，否则将会导致重大的技术误差。2）制成供试液后，应尽快稀释，注皿。一般稀释后应在1小时内操作完毕。3）注意抑菌现象。由于防腐剂未被中和，往往使平板计数结果受影响，如低稀释时菌落少。而高释释度时菌落数反而增大。4)对照试验。化妆品的稀释液（特别是1:1O的稀释液）常带有化妆品颗粒，有时与菌落很难区分，为了避免与细菌菌落发生混淆，可作一个检样稀释液与琼脂混合的平板，不经培养放到4℃环境中，以便计数检样菌落时用作对照。测定时，首先将待测样品制成均匀的、一系列不同稀释度的稀释液，并尽量使样品中的微生物细胞分散，使之成为单个细胞状态存在（否则1个菌落就不能代表1个菌）；再取一定稀释倍数的一定量稀释液接种到培养基上，使其均匀分布。菌落由单个细胞生长繁殖而成，因此通过统计菌落的数目，可计算样品中的含菌数。由于所计算出的菌数是培养基上长出来的菌落数，故不包括死菌，因此菌落总数的测定又称为活菌计数。试验步骤1.菌落总数的检验程序（图1）检样↓制成几个适当倍数的稀释度↓选择2～3个适宜的稀释度，个取1ml加入灭菌培养皿↓每皿内各加入适量的营养琼脂(36±1)℃↓菌落计数↓报告图1菌落总数的检验程序检样在36±1℃下48h后营养琼脂培养基中细菌的菌落数123多不可计多不可计多不可计10^-1的菌落数：10-2的菌落数：123多不可计多不可计多不可计10^-3的菌落数：123多不可计多不可计多不可计报告所检测样的细菌菌落总数如下：不同稀释倍数的菌落（平均值）两稀释液之比菌落总数/（个/ml或个/g）菌落总数（报告方式）/（个/ml或个/g）10-110-210-3多不可计多不可计多不可计///霉菌和酵母菌总数的测定霉菌和酵母菌数总数是指1g或1ml化妆品检样在虎红培养基上，于28℃培养3d后，所生长的霉菌和酵母菌菌落总数。判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。倾注平板法：虎红（孟加拉红）培养基特定菌的检验特定菌是指化妆品中不得检出的特定细菌。我国规定在化妆品中不得检出的特定菌是粪大肠菌群、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌。特定菌的卫生学意义：（1）粪大肠菌群：检出粪大肠菌群表明该化妆品已被粪便污染，有可能存在其他肠道致病菌或寄生虫等病原体。（2）绿脓杆菌：广泛存在于空气、水和土壤中，对外环境的抵抗力比其他细菌强。（3）金黄色葡萄球菌：广泛存在于自然环境中，抵抗力较强，人的皮肤、鼻腔和口腔均可发现。化妆品微生物标准检验方法绿脓杆菌1、增菌培养2、分离培养：十六烷三甲基溴化铵琼脂平板3、染色镜检：4、生化反应：氧化酶试验、绿脓菌素、硝酸盐还原、明胶液化、42℃生长试验5、血清学实验化妆品微生物标准检验方法金黄色葡萄球菌1、增菌培养2、分离培养：自上述增菌培养液中，取1