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适合专业（群）：食品加工技术专业群教师：万国福食品微生物技术实训项目教程行动领域任务一菌落总数测定任务二大肠菌群检验任务三霉菌、酵母菌检验任务四乳酸菌检验一、实验目的•1、了解酸乳中乳酸菌分离原理•2、学习并掌握酸乳中乳酸菌菌数的检测方法任务四乳酸菌检验二、实验原理•活性酸奶需要控制各种乳酸菌的比例，有些国家将乳酸菌的活菌数含量作为区分产品品种和质量的依据。由于乳酸菌对营养有复杂的要求，生长需要碳水化合物、氨基酸、肽类、脂肪酸、酯类、核酸衍生物、维生素和矿物质等，一般的肉汤培养基难以满足其要求。测定乳酸菌时必须尽量将试样中所有活的乳酸菌检测出来。要提高检出率，关键是选用特定良好的培养基。采用稀释平板菌落计数法，检测酸奶中的各种乳酸菌可获得满意的结果。三、实验材料•1、培养基改良MC培养基（MRS培养基，改良CHALMERS培养基，M17培养基）。•2、仪器和器具无菌移液管（25ml,1ml），无菌水（225ml带玻璃珠三角瓶，9ml试管），无菌培养皿，旋涡均匀器，恒温培养箱。培养基•改良MC培养基•配方：大豆蛋白胨5g，牛肉浸膏5g，酵母浸膏5g，葡萄糖20g，乳糖20g，碳酸钙10g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，硫酸多黏菌素B四、操作步骤•将灭过菌的蒸馏水分两次，用移液管移取10mL装入灭过菌的试管中。Page81、实验流程样品稀释实验流程制平板培养检查计数1、样品稀释•先将酸奶样品搅拌均匀，用无菌移液管吸取样品25mL加入盛有225mL无菌水的三角瓶中，在旋涡均匀器上充分振摇，务必使样品均匀分散，即为10-1的样品稀释液，然后根据对样品含菌量的估计，将样品稀释至适当的稀释度。2、实验步骤2、制平板•用1mL移液管移取酸奶稀释液1mL，放入培养皿中（必须距离酒精度10cm以内）。•选用2~3个适合的稀释度，培养皿贴上相应的标签，分别吸取不同稀释度的稀释液1mL置于平皿内，每个稀释度作2个重复。•然后用溶化冷却至45℃左右的MC培养基倒平皿，迅速转动平皿使之混合均匀，冷却成平板。3、倒培养基4、培养•将平皿倒置于37℃恒温箱内培养72h将各稀释平板上的菌落数填入下表稀释度10－110－210－3平板号123平均123平均123平均菌落个数根据试验结果，报告检测结果：被检样品每1mL（g）食品中乳酸菌数为：。五、实验数据及结果