革兰氏阳性芽孢杆菌

第六章革兰氏阳性产芽孢杆菌第一节芽孢杆菌属（Bacillus）第二节梭菌属（Clostridium）第一节芽胞杆菌属（Bacillus）芽胞杆菌属是一群需氧、能形成芽孢的革兰氏阳性大杆菌。本属中主要的致病菌为炭疽芽胞杆菌，是引起动物和人炭疽的病原菌；蜡状芽胞杆菌的某些菌株可产生肠毒素，引致食物中毒；其他大多为腐生菌，主要存在于土壤、水和灰尘中，如枯草芽孢杆菌。炭疽芽胞杆菌（B.anthracis）炭疽芽胞杆菌俗称炭疽杆菌，是引起人类、各种家畜和野生动物炭疽（Anthrax）的病原。一、形态及染色特性革兰氏阳性大杆菌，菌体平直，两端平截。在组织和血液中，单在或短链，经培养后形成长链，呈竹节状。在组织中或含血液的培养基中可形成荚膜。芽孢在有氧条件下形成，位于菌体中央，不膨出菌体。无鞭毛。二、培养特性1.需氧菌或兼性厌氧，最适生长温度30℃-37℃，营养要求不高，普通培养基中即能生长良好。强毒菌株形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥；无毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面较为光滑湿润、边缘比较整齐的光滑型菌落。强毒株菌落2.在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可轻微溶血。3.液体培养基中呈絮状沉淀生长4.明胶穿刺培养，呈倒松树状，表面液化呈漏斗状5.在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应，与其它需氧芽孢杆菌区别。串珠反应：在含青霉素0.5U/ml的培养基中，幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串。三、抵抗力本菌繁殖体的抵抗力不强，同一般无芽孢杆菌。常用消毒剂均能于短时间内将其杀死。芽孢抵抗力较强，在干燥背光处可存活40年以上。煮沸1h或干热140℃3h可杀灭芽孢，对碘敏感。五、抗原结构（一）结构抗原1.荚膜抗原：多肽，仅见于有毒菌株，与毒力和抗吞噬有关2.菌体抗原：多糖，与细菌毒力无关。性质稳定，经加热煮沸甚至高压蒸汽处理，抗原性不被破坏。在病畜皮毛或腐败脏器中经长时间煮沸仍能与特异性抗体发生反应形成环状沉淀，称为Ascoli反应。3.芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮质组成，具有免疫原性。（二）保护性抗原（PA）炭疽毒素（PA、LF、EF）的组成成分之一，具有免疫原性。六、致病性此菌毒力主要与荚膜和毒素有关，荚膜可增强细菌抗吞噬能力，使之易于扩散；炭疽毒素是造成感染、动物致病和死亡的主要原因，三种成分单独无毒性，只有EF或LF与PA结合时，才有致死或水肿效应。本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽，草食动物易感性最强，此菌主要通过消化道传染，也可经呼吸道及皮肤创伤或通过吸血昆虫传播。七、微生物学诊断1.细菌学检查（１）镜检：大杆菌，两端平截，竹节状（２）分离培养：用普通琼脂或血琼脂（３）纯培养:镜检、串珠试验、生化试验（４）动物试验：将检验材料制成悬液或纯培养物给小鼠注射，24-36h,小鼠死于败血症。2.血清学检查（１）Ascoli沉淀反应用加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与已知抗体进行的沉淀试验。（２）间接血凝试验（３）协同凝集试验（４）串珠荧光抗体检查（５）琼脂扩散试验炭疽痊愈动物可获得坚强的免疫，再次感染者很少第Ⅱ号炭疽芽胞苗、无毒炭疽芽胞苗预防接种高免血清进行紧急预防接种青霉素作为首选药物进行治疗八、免疫防治第二节梭菌属（Clostridium）该属细菌多数严格厌氧，革兰氏染色阳性，能形成芽孢，芽孢直径往往比菌体粗，使菌体膨胀成梭状，但并非梭菌属的细菌均为梭状，如破伤风梭菌，芽孢位于菌体顶端，菌体呈鼓槌状。该属细菌能产生多种外毒素和侵袭性酶，致病性强。产气荚膜梭菌、腐败梭菌、诺维梭菌、肉毒梭菌和破伤风梭菌等。产气荚膜梭菌（Cl.perfringens）旧名魏氏梭菌，在自然界分布很广。一定条件下，可引起多种严重疾患，局部组织出现坏死、水肿、产气。一、形态及染色特征菌体直杆状，革兰氏染色阳性。一般条件下不形成芽胞，在无糖培养基上可形成。芽胞大而卵圆，位于菌体中央或近端，使菌体膨胀。多数菌株可形成荚膜，无鞭毛。无芽孢有芽孢有荚膜本菌对厌氧程度的要求并不严，在普通培养基上可生长，若加葡萄糖、血液，则生长更好。菌落多为圆形、光滑、隆起、灰白色的圆屋顶样，也可形成圆盘形、边缘成锯齿状、表面有辐射状条纹的大菌落。生长非常迅速，快速移植法可帮助此菌的分离。厌氧肉肝汤中培养，呈均匀浑浊，并产生大量气体。二、培养特性血平板上，多数菌株有双层溶血环，内环完全溶血，外环不完全溶血。三、生化特性肉渣汤培养基牛乳培养基高糖琼脂培养基接种产气荚膜杆菌本菌最突出的生化特性是对牛乳培养基的“暴烈发酵”。A型：人气性坏疽和食物中毒B型：羔羊痢疾C型：绵羊猝狙D型：牛肠毒血症E型：犊牛、羔羊肠毒血症四、致病性1.直接涂片镜检：G+大杆菌，并有荚膜2.分离培养：接种血平板，有双层溶血环3.纯培养：引起牛奶暴烈发酵4.动物试验：小鼠、家兔或鸽5.肠毒素检查：取回肠内容物加适量灭菌生理盐水稀释，经离心沉淀后取上清液分成两份，一份不加热，一份加热，分别静脉注射家兔或小鼠。如有毒素存在，不加热组动物常于数分钟至数小时内死亡，而加热组动物不死亡。五、微生物学诊断破伤风梭菌（Cl.tetani）破伤风梭菌是引起人畜破伤风的病原。具有芽孢，其芽孢广泛存在于各类土壤中。本病以骨骼肌发生强直性痉挛的症状为特征，此菌也称为强直梭菌。一、形态G+，两端钝圆、细长的杆菌，无荚膜，多具周鞭毛而能运动。在动物体内外均能形成圆形芽胞，位于菌体一端，呈鼓槌状。二、培养特性严格厌氧菌，接触氧后很快死亡。普通培养基上即能生长，形成不规则菌落，中心紧密、四周疏松似羽毛。不易获得单个菌落，扩散成薄膜状覆盖整个平板表面。用高浓度琼脂可抑制其扩散生长。此菌产生两种毒素：1.破伤风痉挛毒素：引起神经兴奋性的异常增高和骨骼肌痉挛。2.破伤风溶血素：不耐热，对氧敏感，可溶解马及家兔的红细胞，与破伤风梭菌的致病性无关。三、致病性四、微生物学诊断一般不需微生物学诊断。如有特殊需要，可采取创伤部的分泌物或坏死组织进行细菌学检查。主动免疫预防可用明矾沉淀破伤风类毒素破伤风抗毒素血清可用于紧急预防五、免疫防治复习思考题1.炭疽杆菌的主要培养特性有哪些？2.如何进行炭疽病的微生物学诊断？3.产气荚膜梭菌的主要生化特点。4.产气荚膜梭菌分型及其对动物的致病性?5.破伤风梭菌的主要生物学特性。