特定蛋白

石家庄肾病医院特色检验之——尿蛋白系列检验内容概述尿NGAL尿蛋白电泳尿肾损系列概述尿（Urine），又称小便，是人类和脊椎动物为了新陈代谢的需要，经泌尿系统由尿路排出体外的液体排泄物。尿液分析（Urinalysis）是指“用目测、理学、化学、显微镜及其他仪器（各种尿分析仪、渗透压计等）对尿液标本进行分析，以达到对泌尿、循环、肝、胆、内分泌等疾病进行诊断、疗效观察及预后判断等目的。”——中华检验医学大辞典尿NGAL—新的肾损伤标志物尿NGALNGAL--中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白NGAL作为一种新型的分泌蛋白，与肾脏存在着密切的关系,是一种新的肾损伤标志物。尿NGALNGAL是早期诊断急性肾损伤的标志物急性肾功能损伤(AKI)时血、尿NGAL浓度通常会迅速升高，2h升高明显(比临界值升高几十至几百倍)，血清肌酐、尿酶等传统指标往往要在24～72h才后明显升高，因而NGAL可用于AKI的早期诊断，并且用于监测病情进展和评估预后。尿NGAL预测慢性肾病(CKD)的进展CKD患者尿NGAL水平显著高于正常人群，并与肾小球滤过率(GFR)呈密切负相关，而sCr与GFR的关联程度不及NGAL。因此，CKD患者NGAL水平不仅是优于sCr反映CFR下降的指标，更是评价CKD患者肾脏损伤程度的标志物。但CKD患者尿NGAL增高幅度不及AKI患者。尿NGAL糖尿病肾脏疾病的诊断糖尿病肾脏疾病的诊断以往主要依据尿微量清蛋白(mAlb)，有研究发现，尿NGAL水平在2型糖尿病肾病患者尿mAlb升高前已显著增加，是诊断糖尿病并发肾损伤的灵敏指标。尿NGAL狼疮肾病尿NGAL是优于抗dsDNA抗体滴度的狼疮肾病诊断指标。有资料显示，当尿NGAL临界值为13.6ng/mL时，诊断敏感性和特异性分别为89%、72%。尿NGAL肾小管—间质病变NGAL是早期反映肾病小管－间质损伤的敏感指标，相比于NAG其敏感性可能更高。尿NGAL可作为IgA肾病小管间质性损伤的早期诊断指标,优于尿mAlb、α1-MG等标志物，能更好地反映肾功能损伤程度。尿NGAL多囊肾在常染色体显性多囊肾病中，检测尿NGAL浓度能够评估肾脏病变严重程度。尿NGAL心肾综合征心肾综合征是一种心脏和肾脏的病理生理紊乱的综合征，即由一个器官的功能不全导致的另一个器官的功能不全，死亡率高，国外已有学者提出，可联合应用生物学标志物BNP/NT-proBNP和NGAL共同诊断CRS，以改善患者预后，降低死亡率。内容概述尿蛋白电泳特定尿蛋白尿酶检测尿渗透压检测尿蛋白电泳尿蛋白电泳能根据尿蛋白不同组分，依其分子量不同，将蛋白尿分为生理性蛋白尿（未检出蛋白带或仅限白蛋白淡染区带）、肾小球性蛋白尿（中分子或中高分子型蛋白区带）、肾小管性蛋白尿（低分子型蛋白区带）及混合性蛋白尿（低、中、高型蛋白区带），有助于肾脏疾病的早期诊断，对肾脏损伤程度及损伤部位的判断有较好的价值。电泳原理SDS-AGE尿蛋白电泳模式图生理性蛋白尿肾小球性蛋白尿肾小管性蛋白尿混合性蛋白尿内容概述尿蛋白电泳特定尿蛋白尿酶检测尿渗透压检测特定蛋白在临床诊断中的应用ADNaseBAlbumin1-Antitrypsin1-acid-glycoprotein2-macroglobulinApoA-IApoA-IIApoBApoEASLAT-III2-microglobulinC1-inhibitorC3C4CeruloplasminHighSensitivityCRPCystatinCFerritinFibrinogenFibronectinHaptoglobinHemopexinIgAIgEIgGIgG-subclasses1-4IgMIg-lightchain,kappaIg-lightchain,lambdaLp(a)MyoglobinPlasminogenPrealbuminRetinolbindingproteinRFSerumAmyloidATotalproteinSolubleTransferrinReceptorTransferrinserum/plasma白蛋白1-微球蛋白2-巨球蛋白2-微球蛋白IgGkappa轻链lambda轻链总蛋白转铁蛋白白蛋白IgAIgGIgM总蛋白2-巨球蛋白MenuurineCSF特定蛋白在临床诊断中的应用优点以往尿蛋白测定多是采用化学比色法，灵敏度低。随着检验技术的发展，尿液蛋白质同血浆及其他体液中的蛋白质一样，可用现代免疫学测定方法测定。免疫测定是利用抗原抗体反应检测标本中微量物质的分析方法，其特点一是特异性强，一种稳定抗原是与其相应的抗体反应，另一个特点是敏感度高可测定ng水平。尿液特定蛋白蛋白名称分子量阳性值(mg/L)肾脏损伤白蛋白(ALB)69KD大于30肾小球(早期、选择性)转铁蛋白(TRF)80KD大于1.9肾小球(选择性)免疫球蛋白G(IgG)150KD大于8.8肾小球(弱选择性)α2-巨球蛋白(α2-M)725KD大于200肾小球(非选择性)α1-微球蛋白(α1-M)30KD大于12肾小管β2-微球蛋白(β2-M)12KD大于5.8肾小管视黄醇结合蛋白(Rbp)16KD大于0.1肾小管IgG轻链肾前性/溢出性尿白蛋白和微量白蛋白尿白蛋白测定是近年来发展较快的项目之一，根据应用评价，其敏感性明显优于尿总蛋白。可用于早期肾损伤的监测。1982年，viberti提出了微量白蛋白尿的概念。mAlb指尿中白蛋白排出量在30-300mg/24h之内，即尿中白蛋白超过健康人的参考范围（30mg/24h）。但尚未达到临床蛋白尿水平的中间阶段。发现在过去当做尿蛋白“阴性”的人群中实际上潜在有相当比例的病理性蛋白尿患者。现在国际上一般以随机尿：mAlb30mg/gcr为尿微量白蛋白尿的临界值。临床意义1.mAlb是糖尿病诱发肾小球微血管病变早期的客观指标。2.用于评估糖尿病患者发生肾并发症的危险度。3.高血压性肾损伤的早期标志，并可评估高血压的疗效。4.妊娠诱发高血压肾损伤的监测。5.区分肾小球和肾小管损伤。注意事项①运动后尿白蛋白排出量可增加，应在相对安静状态下采集尿液。②尽管微量白蛋白是糖尿病肾病的一个早期诊断指标，但仅根据微量白蛋白尿并不能完全确诊，需反复监测。尿转铁蛋白转铁蛋白是在肝内合成的，为转运Fe3+的主要蛋白，其分子量与白蛋白相近，直径大小也相似（TF3.9nm，白蛋白ALB3.6nm）。但由于TF的负电荷比ALB少，当肾小球电荷发生损害时，TF比ALB更容易漏出。尿转铁蛋白尿转铁蛋白是一项反应肾小球滤过膜损伤的灵敏指标。肾小球损伤发生时，尿中TF的排出量增加早于mALB。对于早期发现糖尿病肾脏病更为敏感。但尿中TF浓度和ALB相比很低，检测离散度大，在PH≤4时，易降解，在糖尿病肾病的早期诊断和监测中应联合mALB。尿IgGIgG是血清中含量最多的一种蛋白，相对分子量160000，正常情况下，IgG不宜通过肾小球基底膜，当尿中出现大量IgG等大分子蛋白时，说明肾小球基底膜已丧失选择功能。尿IgG对膜性肾病预后有重要价值。当250mg/d时，预后不良。尿β2-微球蛋白是分子量为11800的小分子蛋白，可以自由通过肾小球滤过膜，但几乎全在近曲小管以胞饮的形式摄取，故正常尿中β2-MＧ浓度很低尿β2-微球蛋白⑴是评价近端小管功能的敏感指标，并且能反映近端小管损伤的程度，当肾小管的重吸收减少0.01，尿中β2-MG的排出量就会增加30倍左右。⑵鉴别上、下尿路感染。⑶监测肾移植后排异反应。⑷糖尿病肾脏疾病的早期诊断。⑸某些肿瘤和免疫性疾病（如：多发性骨髓瘤、系统性红斑狼疮）血中β2-MG升高，引起溢出性蛋白尿。α1-微球蛋白α1-微球蛋白，分子量33000，可以自由通过肾小球滤过膜，几乎全部在近端小管被重吸收和降解。尿α1-微球蛋白在酸性尿中较稳定，尿中的浓度也远高于其他低分子量蛋白质，常与B2-MG联合测定，并有取代B2-MG的趋势，并常与尿酶联合分析，用于评价肾小管的重吸收功能，(如：糖尿病、药物或化学因子、感染等诱发的TIN的诊断监测），也用于肾移植后排异反应的观察。α2巨球蛋白α2巨球蛋白是一种大分子蛋白，正常情况下不能被肾小球基底膜滤过，尿中含量甚微。在肾后性疾病时，则因巨球蛋白在病变部位直接混入尿中，导致尿中α2巨球蛋白升高。用尿α2MG与Alb的比值来鉴别肾性与肾后血尿。当尿Alb100mg/L时,α2MG/AIb0.02，提示存在肾性血尿。而α2MG/AIb0.02时，提示为肾后血尿。当尿Alb100mg/L时，不可采用此法来鉴别血尿来源。免疫球蛋白轻链(κ、λ)免疫球蛋白轻链(κ或λ)是一种小分子量(2.2kD或4.4kD)的蛋白质，可自由通过肾小球滤过膜，能被肾小管重吸收。因此，检测尿中免疫球蛋白轻链浓度对轻链病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤的诊断以及肾功能状态提供可靠的指标。免疫球蛋白轻链(κ、λ)免疫球蛋白轻链与多发性骨髓瘤的关系最密切。约20%的骨髓瘤患者只分泌游离轻链，约50%的骨髓瘤病人既有单克隆血清免疫球蛋白又有单克隆尿轻链，前者预后较差。大量免疫球蛋白轻链从尿中排出可引起肾中毒，因此该蛋白质的存在增加了肾功能障碍的风险，预后不良。内容概述尿蛋白电泳特定尿蛋白尿酶检测尿渗透压检测尿NAG尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶是溶酶体酶之一，分子量140KD，在肾皮质含量最高，髓质次之，在近曲小管细胞内含量最丰富。由于溶酶体是各种攻击因子（如生物毒素、化学毒素、自由基、免疫因子）容易侵犯后靶部位，受到攻击后迅速诱导溶酶体酶释放，故尿中NAG活性对肾小管活动损伤十分灵敏。尿NAG1.药物毒性损伤导致TIN（肾小管-间质性肾病）时，NAG的变化远早于一般肾功能和尿常规检查。。2.糖尿病肾损伤糖尿病肾损伤早期即可有肾小管损伤，因此提倡联合检测尿mAlb和尿NAG，以提高检出率。3.高血压肾病，妊娠诱发高血压、肾病和先兆性子痫的早期检测，除mAlb外也应联合检测尿NAG.4.尿路感染引起的TIN，尿NAG活性升高能帮助早期诊断和病情监测，也有助于将TIN和单纯膀胱炎区别开来。5.肾移植后排异反应的早期诊断尿NAG活性升高早于肾功能、尿蛋白、血尿和管型尿。6.重金属肾毒性的检测在有关职业病防治中，尿NAG用于早起发现肾小管损伤。尿GGT人体各组织均含GGT，以肾脏最高，其次是前列腺。在肾脏、胰腺和肝脏中，此酶含量之比为100：8：4，肾脏GGT含量虽高，但肾脏疾病时，血中该酶升高却不明显，人血清中的GGT主要来源于肝脏，血清GGT主要用于诊断肝脏疾病。由于该酶的相对分子量较大，正常情况下血清中的GGT不能由肾小球滤过，尿GGT不受血清中GGT的影响，测定尿GGT活性对肾小管损伤的诊断有重要意义。1.当肾脏特别是肾小管局部有炎症，并累及近曲小管时，尿GGT常可增高，如果肾小管的炎症是由于自身免疫性反应引起的，尿GGT增高尤为显著，如果肾脏仅有解剖结构上的异常，而并无炎症反应（如多囊肾等）GGT并不增高。大多数肾小球肾炎尿GGT可增高，激素或免疫抑制剂治疗缓解时可下降。2.系统性红斑狼疮患者是否有肾脏累及的指征。尿GGT活性正常多提示无肾脏累及，狼疮性肾炎患者中70%以上尿GGT活性显著增高。3.某些重金属可引起中毒性肾损害，尿GGT活性显著升高。4.使用庆大霉素、妥布霉素等氨基糖苷类抗生素发生肾毒性反应时尿GGT活性显著增高。5.注射某些造影剂可使尿GGT的排出暂时性升高。6.尿GGT是肾移植排异反应较为敏感的尿酶，肾移植后随着肾功能的恢复尿GGT排出显著增高，一周左右尿GGT恢复至正常，如出现排异反应，尿GGT将再次升高。内容概述尿蛋白电泳特定尿蛋白尿酶检测尿渗透压检测尿渗透压尿渗透压（Uosm）简称尿渗量，是指经肾排泄到尿液内全部溶质微粒的总量，在评价肾脏的浓缩与稀释功能上，明显优于尿比重。尿渗透