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微生物法制备番茄皮渣膳食纤维高产菌株的筛选食品学院王庆玲一立题意义二主要研究成果三研究成果一立题意义新疆番茄加工业产生大量番茄皮渣；番茄皮渣作为廉价饲料，少量用于番茄红素的提取；番茄皮渣中含有丰富的膳食纤维；微生物法制备番茄皮渣膳食纤维菌株的选育是关键；本课题从新疆特色微生物资源中筛选出提高番茄皮渣可溶性膳食纤维含量的高效生产菌株。二主要研究成果（一）菌株的筛选土壤样品：从石河子火车站生活区周边采集的腐烂土壤、牛粪、秸秆渣等、石河子大学校园内采集的腐烂土壤、树叶等共20份样品筛选培养基（CMC-Na培养基）；种子培养基（PDA培养基）发酵培养基（含番茄皮渣）通过对采集土样的菌悬液梯度稀释培养后，在筛选培养基上长出大小不同菌落，菌落数目随着稀释程度的增大而减少。其中菌落较大，有菌丝生长，继续培养菌丝上长出孢子的菌株为真菌；菌落较小，表面干燥，呈现红色的为放线菌；菌落较小，表面湿润且有光泽的为酵母菌；共分离得到42株单菌落。1.产纤维素酶菌株的筛选挑选浓度合适的平板进行刚果红染色，发现大多数霉菌都能产生透明圈，具有纤维素分解能力，部分酵母菌也会出现透明圈，个别放线菌有产纤维素酶的能力。将透明圈明显的单个菌落挑出，于培养PDA平板培养48小时，重新进行染色，共筛选出21株发酵性能较好的菌株。将其保存PDA斜面。上述菌株经接种环挑取菌落孢子于无菌水中，制成单孢子悬液，调整菌液浓度后按10%接种量接种于发酵培养基，30℃,120r/min的摇床内培养6天，通过测定可溶性膳食纤维的含量筛选出对纤维素分解能力较强的菌株。编号IDFSDFTDFSDF%7-21.29660.25731.553916.56%5-21.68790.27341.961313.94%11-111.50310.24871.751814.20%8-21.12420.26541.389619.10%10-31.73430.18061.91499.43%4-51.84570.22432.070010.83%7-1-21.62750.30331.930815.71%5-40.96320.29631.259523.53%11-11.85510.26062.115712.32%7-1-11.36850.16811.536610.94%11-101.92740.21992.147310.24%1-11.93180.15502.08687.42%7-42.13510.28872.393811.91%7-31.87290.19002.06299.21%2-22.36090.23272.59368.97%3-42.00390.07822.08213.75%4-42.02230.22542.247710.03%4-51.74160.16091.90258.46%2-5-11.89610.25502.151111.85%7,22.58750.24952.83708.79%2.菌丝形态的观察三研究成果经过研究我们得到可以较好的提高番茄皮渣可溶性膳食纤维含量的高效生产菌株为7-1-2和5-4。将待测菌种接种于混合液体土豆培养基活化后参考文献方法利用震荡法提取总DNA，选用真菌保守序列通用引物进行PCR扩增。所用引物为ITS1，ITS4。经过两次扩增得到较纯的DNA。扩增后的DNA经电泳得下图途中亮带为DNA，由于残留一部分蛋白质，两个带在前端有亮带。经对测序得到两株菌的测序结果分析得到5-4为链格孢属（属于半知菌纲链孢霉目黑霉科），7-1-2为镰刀菌属（镰刀菌属（Fusarium）又称镰孢霉属，在分类学上，镰刀菌属无性时期原属于半知菌亚门，瘤座菌目。有性时期为子囊菌亚门，有性态常为赤霉属（Gibberella）。）。测序结果：5-47-1-2