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基本概念第一节物理消毒灭菌法第二节化学消毒灭菌法第四章消毒与灭菌消毒（disinfection）:杀死目标范围内病原微生物的方法。用于消毒的化学药物称为消毒剂。以杀灭细菌的繁殖体为标志。灭菌（sterilization）:杀灭目标范围内所有微生物的方法。以杀灭细菌的芽胞为标志。消毒与灭菌是两个不同的要领。灭菌可包括消毒，而消毒却不能代替灭菌。消毒多用于卫生防疫方面，灭菌则主要用于医疗护理。防腐（antisepsis）:防止或抑制微生物生长繁殖的方法。无菌（asepsis）:目标范围内没有活的微生物存在。无菌操作：防止微生物进入机体或物体的操作技术。消毒与灭菌的概念一、热力消毒灭菌法附：干燥与低温抑菌法二、辐射消毒杀菌法三、超声波消毒杀菌法四、滤过除菌法第一节物理消毒灭菌法1、干燥：干燥可使细菌繁殖体脱水、盐类浓缩，阻碍细菌代谢，最后导致细菌死亡。高浓度糖或盐处理食物，可使细菌脱水，抑制细菌生长繁殖-----生理干燥2、低温：（1）大多数细菌对低温耐受力较强，只有少数病原菌（如脑膜炎球菌、流感杆菌）耐受性低。（2）低温环境下，细菌代谢缓慢，可抑制其生长繁殖。但仍保持生命，一旦温度等条件适宜，即可恢复繁殖。可保存在0～4干燥、低温抑菌法（一）干热灭菌法：指相对湿度在20％以下的高热。（二）湿热消毒灭菌法：灭菌效果好。原因为：1、湿热比干热穿透力强，可较快提高物体内部温度2、湿热中病原体易吸收水分，促进Pro的凝固变性3、热蒸汽接触物品变为液态可放出大量的潜热。一、热力消毒灭菌法两种方法的比较干热灭菌与湿热灭菌的比较区别干热湿热传热介质空气水和蒸汽作用温度高（160－400℃）低（60－134℃）作用时间长（1－5小时）短（4－60分钟）杀菌能力较差较强对物品的不良影响烤焦濡湿（皮革损坏）适用对象金属、玻璃与其他不畏焦化物品棉织品、水液等不畏湿热物品（一）干热灭菌法1、焚烧法：用于被污染的废弃物、尸体。2、烧灼法：用于紧急情况时耐热物品的消毒及接种环、试管口等。3、干烤法：干烤箱（160~170℃，1~2h），用于玻璃器皿、粉剂等。4、红外线：用于医疗器械，玻璃器皿等。红外线红外线辐射是一种0.77～1000微米波长的电磁波,有较好的热效应,尤以1～10微米波长的热效应最强。红外线由红外线灯泡产生,不需要经空气传导，所以加热速度快，但热效应只能在照射到的表面产生，因此不能使一个物体的前后左右均匀加热。红外线的杀菌作用与干热相似，利用红外线烤箱灭菌的所需温度和时间亦同于干烤。人受红外线照射较长会感觉眼睛疲劳及头疼；长期照射会造成眼内损伤。因此，工作人至少应戴能防红外线伤害的防护镜。1、高压蒸气灭菌法：最常用、最有效的灭菌方法。－－适用于耐高温和耐潮湿的所有物品，如手术器械、敷料、一般培养基、生理盐水、蒸馏水等。2、煮沸法：用于食具、刀剪、玻璃注射器等消毒。3、流动蒸气消毒法（常压蒸气消毒法）：－－多用于不耐高温的、营养丰富的培养基。4、巴氏消毒法：用于牛奶、酒类、饮料等（二）湿热消毒灭菌法1、高压蒸气灭菌法用高压蒸汽锅进行。在103.4kPa蒸气压下，温度可达121.3℃，经15~20min，可杀灭全部微生物。适用范围：除了那些不耐高温和潮湿的物品外所有的物品，如手术器械、敷料、一般培养基、生理盐水、蒸馏水等。注意事项：①物品摆放勿过满；②锅内冷空气排尽后，再加压；③压力降至“0”时，方能开盖。2、煮沸法条件：①100℃，5min可杀死细菌繁殖体；②100℃，1~2h可杀死细菌芽孢；③如加入2%Na2CO3，可提高沸点到105℃，还可防止金属生锈。适用范围：用于食具、刀剪、玻璃注射器等。3、流动蒸气消毒法利用蒸笼或阿诺蒸锅进行。条件：（1）100℃水蒸气，15~30min可杀死细菌繁殖体。（2）用间歇灭菌法可使芽孢发育为繁殖体后被杀灭。适用范围：多用于不耐高温的、营养丰富的培养基。间歇灭菌法将物品经流动蒸汽加热后，置37℃温箱过夜，使细菌芽孢发育为繁殖体后，次日再经流动蒸汽加热，反复三次。4、巴氏消毒法由法国科学家巴斯德创立。条件：加热61.6～62.8℃，30min或71.7℃，15～30s（瞬时消毒）。特点：用较低温度杀死液体中的病原菌或特定微生物，而又不破坏被消毒物品的营养成分和气味。适用范围：用于牛奶、酒类、饮料等。1、日光与紫外线:波长265-266nm的紫外线杀菌力最强。－－穿透力弱，常用于空气、物品表面的消毒－－对眼睛角膜和皮肤均有损伤作用。应遮盖患者的这些部位2、电离辐射：高速电子、X射线、γ射线等可产生游离基，破坏DNA。－－不使物品升温，称“冷灭菌”。且穿透力强，－－用于不耐热物品的消毒，如药品、塑料（一次性注射器、输液器等）－－不能用于人体的消毒。3、微波：波长10-1~10-9m或更短的电磁波。－－常用于药品和食品灭菌。－－微波长期照射可引起眼睛的晶状混浊、睾丸损伤和神经功能紊乱等全身性反应二、辐射杀菌法不被人耳感受的＞20千Hz/秒的声波，称为超声波。可使细菌细胞裂解而死亡，但往往有残存的活细胞。对G-菌效果最好，葡萄球菌最差。主要用于粉碎细胞，提取其中的化学成分。三、超声波杀菌法将液体或空气通过含有微细小孔的滤器，只允许小于孔径的物体如液体和空气通过，大于孔径的的物体不能通过。主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、支原体和细菌的L型。四、滤过除菌法滤器的种类滤膜滤器：由硝基纤维素制成薄膜，装于滤器上，其孔径大小不一，常用于除菌的为0.22um。硝基纤维素的优点是本身不带电荷，故当液体滤过后，其中有效成分丧失较少。蔡氏滤器（Seitz）：是用金属制成，中间夹石棉滤板，有石棉K、EK、EK-S三种，常用EK号除菌。玻璃滤器：是用玻璃细砂加热压成小碟，嵌于玻璃漏斗中一般为G1、G2、G3、G4、G5、G6六种，G5、G6可阻止细菌通过。实验室等处应用的超净工作台，就是利用过滤除菌的原理去除进入工作台空气中的细菌。第二节化学消毒灭菌法一、消毒剂的应用范围（重点）二、消毒剂的作用机制（了解）三、消毒剂的种类和选用：酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂。四、影响消毒灭菌效果的因素（重点）一、消毒剂的应用范围由于消毒剂对人体细胞也有毒性作用，故不能内服。主要用于人体体表、病人排泄物与分泌物及周围环境和医疗器械的消毒。1、使菌体蛋白质变性凝固：如重金属盐类、醇类、醛类、酸、碱等。2、干扰或破坏细菌的酶系统和代谢：如某些氧化剂（H2O2、高锰酸钾、过氧乙酸）、重金属盐类（氯化汞、硫柳汞、硝酸银等）可与细菌酶蛋白中的巯基（－SH）结合，使酶失活，致细菌代谢障碍。3、改变细菌细胞壁或细胞膜的通透性：使胞质内代谢产物逸出，导致细菌死亡。如酚类、表面活性剂等。二、消毒剂的作用机制三、消毒剂的种类和选用消毒对象消毒剂皮肤洗必泰、新洁尔灭、碘酒、酒精黏膜新洁尔灭排泄物漂白粉、生石灰食具漂白粉（不宜用于金属）、新洁尔灭塑料制品过氧乙酸书籍福尔马林、环氧乙烷（熏蒸）空气过氧乙酸喷洒、乳酸熏蒸地面漂白粉、戊二醛1、消毒剂的性质、浓度与作用时间2、微生物的种类与数量3、温度及酸碱度4、有机物的影响四、影响消毒灭菌效果的因素1、消毒剂的性质、浓度与作用时间（1）消毒剂的性质不同，消毒效果不同。各种消毒剂的理化性质不同，对微生物的作用大小也差异。例如表面活性剂对革兰氏阳性菌的灭菌效果比对革兰氏阴性菌好，龙胆紫对葡萄球菌的效果特别强。但乙醇只有70~80%有消毒作用，95%的主要用于固定组织标本有些消毒剂高浓度会损伤人体，如高锰酸钾超过0.5%会烧伤皮肤、黏膜。（2）在一定范围内，消毒剂浓度越大，作用时间越长，消毒效果越好。2、微生物的种类与数量♣不同微生物种类对消毒剂的敏感程度也不同。♣微生物的数量越多，消毒剂的浓度应越高，消毒时间也应越长。对细菌而言G-菌＞G+菌有荚膜菌＞无荚膜菌细菌的芽胞＞细菌的繁殖体老龄菌＞幼龄菌对其他而言：病毒因种而异，真菌多不敏感3、温度及酸碱度在消毒过程中，随温度升高而化学反应速度加快。如2%戊二醛对炭疽芽孢杀灭作用，20℃需15min，56℃仅需1min。PH值也可影响杀菌作用：可通过改变消毒剂的溶解度和分子结构起作用。也可直接对微生物的生长产生影响。如季胺盐类化合物的戊二醛药物在碱性环境中杀灭微生物效果较好；酚类和次氯酸盐药剂则在酸性条件下杀灭微生物的作用较强。4、有机物的影响环境中有机物的存在，影响消毒剂的消毒效果。①可在微生物的表面形成保护层；②可影响消毒剂的溶解度；③可与消毒剂作用，使其对微生物的作用浓度降低；④可可中和一部分消毒剂。有机物主要影响重金属类、表面活化剂等，而对戊二醛、漂白粉、酚类化合物等影响较小。消毒皮肤和器械时，需洗净后再消毒，对痰、粪便等的消毒应选用受有机物影响较小的消毒剂，如生石灰、漂白粉等。