中药资源与开发专业教学指南编写人员

1中药资源与开发专业教学指南编写人员主编：肖深根副主编：谢玲谢红旗参编：钟晓红杨建奎蒋道松邓林伟彭克勤谢玲谢红旗肖深根夏志兰王仁才刘东波李大志主审：钟晓红罗军武2目录中药资源与开发实践教学指南........................................1药用植物学教学实习实践教学大纲...........................................错误!未定义书签。生物化学与分子生物学实验技术教学大纲...............................................................1植物生理学实验技术教学大纲.......................................17中药资源学教学实习实践教学大纲...................................27药用植物功能成分分析实验教学大纲.................................39药用植物栽培学实验教学大纲.......................................44药用植物遗传育种学实验教学大纲...................................51中药炮制加工学实验教学大纲.......................................65中药炮制加工学教学实习实践教学大纲...............................72药用资源研究法实验教学大纲.......................................77中药资源与开发专业毕业实习教学大纲...............................81中药资源与开发专业生产实习教学大纲...............................861中药资源与开发实践教学指南生物化学与分子生物学实验技术教学大纲实验课程号：20571B1学时：32学分：1.5分适用对象：植保、植科、园艺、农学、农资、生态、茶学、草业、中药资源与开发等课程属性：必修先修课程：无机及分析化学、基础化学实验、有机化学、生化及分子生物学考核方式：笔试闭卷考试使用教材及主要参考书：杨虹琦主编，《生物化学实验教程》，湖南农业大学自编教材，1999俞建瑛主编，《生物化学实验技术》，化学工业出版社，2005周先碗主编，《生物化学仪器分析与实验技术》，化学工业出版社，2002郝福英主编，《生命科学实验技术》，北京大学出版社，2004王镜岩主编，《生物化学》，高等教育出版社，2002李庆章主编，《生物化学》，中国农业出版社，2004阎隆飞主编，《分子生物学》，中国农业大学出版社，1997王关林主编，《植物基因工程》，科学出版社，2002刘约权主编，《现代仪器分析》，中国农业科技出版社，1998一、课程的性质与任务生物化学与分子生物学实验技术（以下简称为生物化学实验技术）在生命科学的发展中起着非常重要的基础作用，它与农业、林业、食品、医药和环保等领域都有着十分广泛而又密切的联系，并且已成为生命科学研究中的最基础手段之一。因此，生物化学实验技术是大学本科生物类、农学类、园林类、食品类等专业的必修实验课程。生物化学实验技术课程主要是培养学生在生物化学方面的实践能力和创新能力。它的作用不仅仅是以形象生动的实验现象帮助学生2加深理解与掌握生化理论知识，而且是培养学生将生化理论知识应用于生产实践，提高学生的动手操作能力，提高在实践中发现、分析和解决问题的能力，提高开拓创新精神的有效途径。二、实验的目的与基本要求通过生物化学实验技术课程教学，应该使学生初步掌握生物化学常用实验基本操作技术；同时增加感性认识，巩固生化理论知识；培养学生严肃认真、实事求是的科学态度和作风；提高学生分析和解决问题的能力；在生化实验上具备一定的独立创新和设计能力。三、实验项目一览表生物化学及分子生物学实验技术实验项目一览表序实验项目实验实验适用学号名称类型要求专业时1蛋白质含量测定验证性必做中药资源与开发42蛋白质构像变化的紫外光谱检测设计性选做中药资源与开发43醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白验证性必做中药资源与开发44糖含量的测定验证性必做中药资源与开发45谷物总淀粉测定验证性必做中药资源与开发46核酸含量测定综合性必做中药资源与开发47淀粉酶活及动力学设计性必做中药资源与开发88过氧化氢酶固定化及酶活测定设计性必做中药资源与开发49核黄素含量测定综合性必做中药资源与开发410凝胶柱层析分离核黄素和血红蛋白设计性必做中药资源与开发411SDS电泳测定蛋白质分子量综合性选做中药资源与开发1212植物组织总DNA提取与纯度鉴定综合性选做中药资源与开发1213质粒的提取、酶切与鉴定综合性必做中药资源与开发1214PCR基因扩增及鉴定综合性选做中药资源与开发12四、实验项目的具体内容：实验一蛋白质含量测定─考马斯亮兰G－250法1．本次实验的目的和要求学习考马斯亮兰染料结合法测定蛋白质的原理和方法；学习721、7230型分光光度计的3使用方法；掌握低速离心机使用方法。2．实验内容或原理考马斯亮兰G－250是一种染料，能与蛋白质稳定结合，结合蛋白质后变为青色，在595nm处有最大吸收，在一定蛋白质浓度范围内（0～1000μg/ml），蛋白质——染料结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比，故可用于蛋白质的定量测定。3．需用的仪器或试剂等仪器：721或7230型分光光度计、离心机、50ml容量瓶等玻璃器皿试剂：牛血清白蛋白（1000μg/ml）、考马斯亮兰G－250溶液、0.1mol/LNaOH溶液、70％乙醇材料：小麦粉或大米粉4．实验步骤（1）蛋白质标准曲线或回归方程的制作；（2）蛋白质的提取；（3）考马斯亮兰法测定蛋白质含量。5．教学方式学生课前结合生物学实验室网站资源自学预习；教师在课堂里通过黑板或多媒体讲解实验，并对关键步骤进行示范操作；最后学生在教师的指导监督下，完成实验操作和实验报告。6．考核要求（1）掌握考马斯亮兰测定蛋白质含量的原理和方法。（2）怎样根据蛋白质的溶解性选择溶剂。（3）熟悉标准曲线或回归方程的制作方法。7．实验报告要求实验项目和步骤填写完整；有原始数据，结果符合真实值；有适当的实验现象描写和实验结果分析；字迹工整，书写整洁。实验二pH对牛血清蛋白构象影响的紫外光谱分析1．本次实验的目的和要求理解蛋白质构象变化的实质及其研究方法；了解紫外-可见双光束分光光度计的使用。2．实验内容或原理蛋白质的紫外吸收光谱主要是由于芳香族氨基酸色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸残基的生色团作用产生，蛋白质的紫外吸收光谱中，一般210nm处的峰是肽键的强吸收峰，280nm附近4的峰是酪氨酸残基的吲哚环、色氨酸残基的酚基的吸收峰。大多数蛋白质在280nm波长附近有一个吸收峰。蛋白质的紫外光谱会受到溶剂的pH值影响，因为溶剂的pH值影响生色团的解离状态，从而引起蛋白质构象变化，改变其吸收光谱，因此利用紫外光谱法可以初步考察蛋白质的构象变化。3．需用的仪器或试剂等仪器：具塞试管、移液管、水浴锅、紫外-可见双光束分光光度计试剂：0.1mol/LpH=5、8、13的NaH2PO4缓冲液；0.1mg/ml酪氨酸和色氨酸；10mg/ml材料：牛血清蛋白（BSA）4．实验步骤（1）样品在不同pH值的缓冲液下处理；（2）紫外光谱检测、分析。5．教学方式学生课前结合生物学实验室网站资源自学预习；教师在课堂里通过黑板或多媒体讲解实验，并对关键步骤进行示范操作；最后学生在教师的指导监督下，完成实验操作和实验报告。6．考核要求（1）理解蛋白质构象变化的实质及其研究方法；（2）了解紫外-可见双光束分光光度计的使用。（3）提交实验报告，并分析讨论实验结果。7．实验报告要求实验项目和步骤填写完整；有原始数据，结果符合真实值；有适当的实验现象描写和实验结果分析；字迹工整，书写整洁。实验三醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白1．本次实验的目的和要求学习蛋白质电泳的一般原理与方法；掌握醋酸纤维素薄膜电泳分离蛋白技术；熟悉电泳仪的使用方法。2．实验内容或原理将蛋白质置于pH值低于其等电点的电极缓冲溶液中，则蛋白质将带正电荷而向负极移动。因为蛋白质分子在电场中移动的速度与其带电量、分子的形状及大小有关，所以，可用电泳法将不同的蛋白质分离开来。3．需用的仪器或试剂等5仪器：电泳仪、电泳槽、镊子、盖玻片、细玻棒等试剂：醋酸纤维素薄膜、pH8.6巴比妥缓冲液（离子强度0.06～0.07）、染色液、漂洗液、透明液材料：健康人血清或鸡血清4．实验步骤（1）血清的制备；（2）了解各种电泳方法和电泳仪的作用；（3）血清蛋白电泳分离。5．教学方式学生课前结合生物学实验室网站资源自学预习；教师在课堂里通过黑板或多媒体讲解实验，并对关键步骤进行示范操作；最后学生在教师的指导监督下，完成实验操作和实验报告。6．考核要求（1）掌握蛋白质电泳的原理；（2）了解影响蛋白质电泳因素；（3）醋酸纤维素薄膜电泳的优缺点；（4）绘出血清蛋白电泳分离图谱。7．实验报告要求实验项目和步骤填写完整；有原始数据，结果符合真实值；有适当的实验现象描写和实验结果分析；字迹工整，书写整洁。实验四糖含量的测定（蒽酮法）1．本次实验的目的和要求掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和技术；熟悉721、7230型分光光度计的使用；清除蒽酮法测糖含量的注意事项。2．实验内容或原理糖类遇浓硫酸将脱水生成糠醛或其衍生物，糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生蓝绿色物质，其在可见光区620nm波长处有最大吸收，且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。从而可以利用光吸收值测定出糖的含量。3．需用的仪器或试剂等仪器：721或7230型分光光度计、恒温水箱、100ml容量瓶等玻璃器皿；试剂：200μg╱ml标准葡萄糖、蒽酮试剂、浓硫酸；材料：蔬菜64．实验步骤（1）材料中可溶性糖的提取；（2）蒽酮比色法测定糖含量。5．教学方式学生课前结合生物学实验室网站资源自学预习；教师在课堂里通过黑板或多媒体讲解实验，并对关键步骤进行示范操作；最后学生在教师的指导监督下，完成实验操作和实验报告。6．考核要求（1）掌握721或7230型分光光度计的操作。（2）掌握蒽酮比色法测定糖含量的原理、方法和注意事项。（3）提交实验报告，并分析讨论。7．实验报告要求实验项目和步骤填写完整；有原始数据，结果符合真实值；有适当的实验现象描写和实验结果分析；字迹工整，书写整洁。实验五谷物总淀粉的测定1．本次实验的目的和要求掌握用旋光法测定谷物淀粉含量的原理和方法；掌握旋光仪的使用方法；了解不同作物淀粉的标准比旋光度值。2．实验内容或原理淀粉因含有不对称碳原子，故具有旋光性。在加热条件下，淀粉可分散于稀盐酸溶液中，用磷钨酸沉淀蛋白质等其他旋光物质后，将溶液定容到一定体积。利用旋光仪测定出淀粉溶液的旋光偏振角。根据不同作物淀粉的比旋光度[α]D20，可计算出总淀粉的含量。3．需用的仪器或试剂等仪器：旋光仪、恒温水箱、100ml烧杯、50ml容量瓶、研钵、玻棒、漏斗试剂：1mol/L盐酸、4％磷钨酸材料：稻米粉4．实验步骤（1）谷物淀粉的提取；（2）旋光仪法测定谷物淀粉含量。5．教学方式学生课前结合生物学实验室网站资源自学预习；教师在课堂里通过黑板或多媒体讲解实7验，并对关键步骤进行示范操作；最后学生在教师的指导监督下，完成实验操作和实验报告。6．考核要求（1）掌握旋光仪的使用方法。（2）旋光法为什么能测定淀粉含量。（3）提交实验报告，并分析讨论。7．实验报告要求实验项目和步骤填写完整；有原始数据，结果符合真实值；有适当的实验现象描写和实验结果分析；字迹工整，书写整洁。实验六核酸含量的测定——定磷法1．本次实验的目的和要求掌握定磷法测定核酸含量的原理和操作方法；掌握消化技术。2．实验内容或原理RNA和DNA中都含有磷酸，根据分析，ＲＮＡ含磷量平均约为9.5％，DNA含磷量平均约为9.9％。即根据核酸样品