如何在临床实验室评估不确定度-连云港150110

如何在临床实验室评估不确定度南通大学附属医院王惠民1、什么是测量不确定度？例：ALT的结果为120±12U/L（k=2）或ALT的结果为120U/L±10%（k=2）•±符号后面的数量就是测量不确定度•12U/L是绝对值，10%(U/L)是相对值•测量不确定度又简称为不确定度，符号u•不确定度定义:根据所用到的信息，表征赋予被测量量值分散性的非负参数。2、医学检验为什么要评估不确定度？•是实验室认可的需要ISO15189:2007指出：适用且可能时，实验室应确定检验结果的不确定度。应考虑所有重要的不确定度分量。ISO15189:2012指出：应对每个测量程序确定测量不确定度，并定期评审测量不确定度的评估结果。•是量值溯源的需要溯源性的定义：通过文件规定的不间断的校准链将测量结果与规定的参照对象联系起来的特性，每个链接点均对测量不确定度有贡献。•是临床结果解释的需要一般不主张将不确定度标注在检验单上•是判断检验质量的需要与目标不确定度进行比较国际间的结果互认，只认“不确定度”，不认“误差”在溯源链的量值传递中，只评“不确定度”，不评“误差”•ISO：医学实验室-测量不确定度评估实用导则（待发表）•CLSIEP29-A：检验医学中测量不确定度表达•AACB：定量医学检测的不确定度•CNAS-TRL-001:2012：医学实验室—测量不确定度的评定与表达•卫生部标准委员会：酶学参考实验室参考测量程序不确定度评定指南（待批准）3、120±12U/L（k=2）的含义是什么？•当k=2时，ALT95%可能准确地在108～132U/L区间•当k=3时，ALT99%可能准确地在102～138U/L区间•k称为包含因子4、含包含因子与不含包含因子的不确定度有什么区别？•含包含因子的不确定度称为扩展不确定度，以U表示，在报告测量结果时以U形式报告，同时说明k。如U=12U/L(k=2)•不含包含因子的不确定度称为合成不确定度，以uc表示。•uc×k=U,如uc=6U/L•测量不确定度的评估过程主要就是评定uc5、包含因子k的取值是多少？•可以k=2，也可以k=3•常规检验中一般k=2，代表测量结果95%的可信限6、如何评定（计算）uc？•合成不确定度（uc）是由各个不确定度分量合成的•在计算uc前,将各分量转变为标准不确定度•按不确定度传播率计算uc222CBAuc222cbaA7、什么是标准不确定度？•以标准差表示的测量不确定度。•如连续测血糖的浓度分别为5.12、5.09、5.10、5.11、5.10、5.08、5.10、5.13、5.21、5.18、5.17、5.16、5.05mmol/L•计算标准差（s）为0.045mmol/L•0.045mmol/L就是标准不确定度•u=s=0.045mmol/L。8、常规检验中不确定度分量有哪些？•不确定度评估方法：“自下而上”与“自上而下”•不精密度分量与偏移（偏倚）分量•不精密度（imprecision）可用标准差（s）或变异系数（CV）表示•偏移（bias）的不确定度分量通过特定方法求得22biasimpcuuu2222biasbiasimpcusuuu2222%%%%biasbiasimpcuCVuuuCVCVCVuc220%•假设偏移的不确定度为0CVukUc22222%%%%biasbiasimpcuCVuuu9、精密度（或不精密度）有几种？3种（VIM，ISO发布的国际计量学词汇）,即:•重复性repeatabilityprecision,以sr或CVr表示•复现性reproducibilityprecision,以sR或CVR表示•期间（中间）精密度intermediatedprecision,以sRw或CVRw表示10、什么是重复性?相同测量程序、相同操作者、相同测量系统、相同操作条件和相同地点，并在较短时间内对同一样品重复测定的精密度。11、什么是复现性?不同地点、不同操作者、不同测量系统（或包括不同测量程序）对同一样品重复测定的精密度。12、什么是期间精密度?相同测量程序、相同地点，但有可能改变其他的测量条件下，在一段较长时间内，对同一样品重复测定的精密度。3种精密度比较•重复性：批内精密度•复现性：实验室间的精密度•期间精密度：批间精密度哪种更适合作为不确定度的分量?13、期间精密度的“期间”多长合适？•AACB推荐6个月•原则：多长时间评估一次，“期间”就应多长•可用“标准差（s）”或“变异系数（CV）”表示不精密度的量。•根据定义，可直接用标准差表示不精密度的不确定度分量•uimp=s或%uimp=CV14、如何计算期间精密度？（1）6个月内使用同一质控品•直接计算s或CV（2）6个月内使用了二个批号质控品•计算CV平方和的根2/)(2221CVCVCVt15、如何计算偏移的不确定度?（1）计算偏移（正确度验证）•与有证参考物质（CRM）比较•与参考测量程序（参考方法，RMP）比较•与室间质量评价（EQA/PT）的靶值(target)比较（2）计算CRM（或参考方法）的不确定度（3）计算CRM（或参考方法）（在常规实验室）的不精密度（4）计算偏移的不确定度refCRMUx举例：取NIST的肌酐参考物质，其代号为SRM967，其标称值（）为（142.1±1.9）mmol/L（k=2）16、如何根据有证参考物质计算偏移的不确定度？用常规方法测定该标准物质（日立7600-020）测定序次第1天第2天第3天第4天第5天11401381431431422140139144143143314013814414214141411371451431425140139143142143常规方法测定肌酐标准物质结果（mmol/L）经计算为（141.4±2.06）mmol/LCV为1.46%。sx1.计算偏移7.01.1424.141CRMxx%49.01.142/7.0/CRMxbb=b%=2.计算参考物质的不确定度（mmol/L）Lmmoluref/95.02/9.13.计算参考物质的不精密度%46.1/06.2CVLmmols%669.01.142/95.0.relrefu4.计算偏移的不确定度222suburefbias22.2.%CVuburelrefrelbiasLmmolubias/374.206.295.07.0222%68.146.167.049.0222.relbiasu5.计算合成不确定度已知该常规实验室肌酐测定的期间不精密度（6个月）为1.11%（CV），即uimp.rel=1.11%，则合成不确定度为：2222..%1.681.112.01cbiasrelimpreluuu(%)17、如何根据参考方法计算偏移的不确定度？•参考方法：又称参考测量程序（Referencemeasurementprocedure,RMP）•用参考方法与常规方法同时测定同一标本•举例：某实验室根据IFCC推荐方法，建立了LDH的参考测量程序。取同一份新鲜血清，同时用参考测量程序（参考方法）与常规方法测定LDH催化活性浓度。参考方法的测定结果为502±7U/L（k=2），则可知参考方法的标准不确定度（）为7/2=3.5U/L。RMPu测定序次第1天第2天第3天第4天1496.5500.5499.3497.42499.7498.2495.7499.93500.1497.1496.1501.14497.2495.2495.2498.6LDH常规方法测量结果（U/L）经计算为498.0±1.96U/L，s=1.96U/L（1）计算偏移LUuRMP/5.32/7)/(4502498LUxxbRMP（2）计算参考方法的不确定度（3）计算参考方法的不精密度LUs/96.1（4）计算偏移的不确定度其相对不确定度为：(%)127.1502/66.5%biasuLUsubuRMPbias/66.596.15.34222222•已知：2013年质控均值为142.5U/L，s为1.535U/L，CV为1.077%。•计算合成不确定度：(%)559.1077.1127.122cu18、如何根据EQA/PT结果评估偏移的不确定度？1.计算偏移或平均偏移（1）与1次靶值比较•计算偏移（b）：b=质评结果－靶值•计算相对偏移（b%）：b%=b/靶值（2）与多次靶值比较•可用Nordtest方法（北欧部长理事会成立的官方机构，主要指导北欧的合格评定工作）•2.计算偏移的不确定度19、怎么用Nordtest方法评估偏移不确定度分量？•用6次以上PT结果作为计算依据，均计算相对值（1）计算平均偏移（）nbbi2%%b（2）计算靶值的不精密度（离散程度）nCVCVettxarg（3）计算靶值的不精密度的均值mCVCVxx（4）计算偏移的不确定度2target222%%%ubCVbuxbias•举例：某医院检验科的血糖（己糖激酶法）项目在二年内参加该省临床检验中心的室间质量评价共10次，结果见表.测定序次12345678910xi9.028.5214.8019.7712.407.8913.7015.355.936.92xtarget(i)8.828.4414.8719.4712.357.9013.7515.585.987.01bi0.200.08-0.070.300.05-0.01-0.05-0.23-0.05-0.09bi%2.270.95-0.471.540.40-0.13-0.36-1.48-0.84-1.28CVtarget1.982.042.282.242.042.372.572.373.852.91n195195195195195200200200200200CVx0.140.150.160.160.150.170.180.170.270.21某实验室血糖参加室间质评各项指标16.110/)28.1()84.0()48.1()36.0()13.0(4.054.1)47.0(95.027.2%2222222222b176.010/76.110/21.027.017.018.017.015.016.016.015.014.0xCV17.1176.016.1%22biasu计算1.计算相对偏移(b%)的均值2.计算靶值的不精密度的均值3.计算偏移的不确定度4.已知该实验室近6个月的室内质控值为(6.31±0.10)mmol/L，则可知期间不精密度为0.10mmol/L，期间相对不精密度为0.10/6.31=1.59%（%uimp=CV），则相对合成不确定度为：(%)97.117.159.1%%2222biascuCVu20、以上计算偏移的不确定度方法的优缺点如何？•与CRM或参考方法进行比较计算的偏移的不确定度较可靠，得到的测量结果与所有经溯源参考值或参考方法的测量结果有较好的一致性。•与EQA/PT靶值的比较得到的不确定度的质量，与EQA/PT本身的质量有关，应参加权威的EQA/PT活动。得到的测量结果与所参加该EQA/PT的实验室的结果有较好的可比性。•在根据EQA/PT数据评定不确定度时，应考虑如何评估“结果的不确定度”，而不是“方法的不确定度”，可在不同的医学决定水平评估不确定度•用于评估精密度的质控品的水平应尽量与EQA/PT的靶值相一致，所得到的不确定度应反映某一测量水平的不确定度，否则不确定度的评估没有意义，这也是利用EQA/PT靶值评估不确定度的难点。•最好参加卫生部临检中心正确度验证计划。•在与参考方法比较时评定不确定度，可以较容易地使得评定偏移不确定度的测量水平与期间精密度的测量水平相一致，因此可以较容易地评定该方法在某一测量水平的不确定度。•与参考