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基因工程习题讲评考纲要求：1、基因工程的概念2、基因操作的工具和基本步骤3、基因工程的成果与发展前景考题类型：1、基础知识(1、2、3、4、5、7、8、12）2、能力提升(6、9、10、11)3、归纳分析（13、14、15）解题方法：1．看问的是什么？这一问有无前提？关键字？2．看考的是什么？3．看知识在教材的落点是什么？13、限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。13、限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。—G↓GATCC——CCTAG↑G—用酶Ⅰ切割—GGATCC——CCTAGG—1、限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。1、限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？可以连接的，因为由两种限制性内切酶切割后所形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的）14、我国科学家根据农业的需要将一种来自螺旋藻中的与光合作用相关的基因移植到普通水稻基因中，该转基因水稻的生长周期显著缩短，光合作用速率增长70％，淀粉含量大幅增加，达到了周期短、见效快、粮食增产的目的。(1)在该基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，以便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—↓GATC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，根据图示判断，正确的操作应该是用___________切割质粒，用______________来切割目的基因片段。限制酶Ⅱ限制酶Ⅰ(2)为了避免转基因水稻携带的目的基因通过花粉传递给近缘物种，最好将该基因植入水稻细胞的___________________的DNA中原因是(3)简要写出确定“螺旋藻基因是转移到了水稻的叶绿体内还是转移到染色体上?”的步骤。叶绿体或线粒体叶绿体或线粒体DNA遵循母系遗传，基因不会通过花粉传递给下一代。15、苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。左图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。ramp(1)将图中①的DNA用HindIII、BamHI完全酶切后，反应管中有种DNA片段。(2)图中②表示HindIII与BamI酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得种重组质粒；如果换用Bstl与BamHl酶切，目的基因与质粒连接后可获得种重组质粒。4211.“基因的剪刀”——（1）来源：主要是从中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的，因此具有性。（3）结果：DNA被切断。经限制酶切割产生的DNA片段末端切口可以是粘性末端DNA限制性内切酶微生物核苷酸序列化学键断裂特异性（专一性）互补GAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCG黏性末端黏性末端限制性内切酶限制性内切酶2.“基因的针线”——（1）功能：缝合。（2）与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键使两条DNA黏性末端连接起来GAATTCCTTAAGDNA连接酶GAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCG黏性末端黏性末端返回返回常用的转化方法：Ⅰ、将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是，其次还有和等。受体细胞可以是受精卵、体细胞Ⅱ、将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是。此方法的受体细胞多是。Ⅲ、将目的基因导入微生物细胞：如：用处理大肠杆菌，将目的基因导入大肠杆菌内。受精卵农杆菌介导基因枪法花粉管通道法显微注射CaCl2