实验7胃肠运动的直接观察离体肠段平滑肌的描记目的:1.动物在体胃肠运动及调节2.了解肠段平滑肌的生理特性3.学习离体肠段平滑肌的实验方法原理1.胃肠道平滑肌经常维持一定的紧张性收缩,在体内受到神经和体液的调节。在神经及某些药物的作用下,这种紧张性及运动节律可发生改变。神经调节中,副交感神经通过释放乙酰胆碱使其运动加强,交感神经通过释放去甲肾上腺素使其运动减弱。原理2.胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的乙酰胆碱能激动M受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道。阿托品与胆碱受体结合阻断胆碱能递质从而产生抗胆碱作用。新斯的明作为胆碱酯酶的抑制剂,抑制乙酰胆碱的分解,使乙酰胆碱的作用持续加强。原理3.消化道平滑肌的特点是兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性,自动节律性,对化学物质,温度和机械牵张刺激较敏感等特点,给予离体肠肌一接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本实验观察当模拟内环境发生变化时,离体小肠平滑肌运动的变化。原理4.该实验方法不仅在理论上证明平滑肌的生理特性,而且还可用来测量化学物质或药物的生理学特性,被称为生物学鉴定法。仪器设备家兔,手术台,手术器械,恒温水浴槽,恒温水浴,RM6240,张力换能器,氧气袋,铁架台,烧杯,滴管,注射器,台氏液,阿托品(0.5mg/ml),新思的明(1mg/ml)0.01%肾上腺素,0.01%乙酰胆碱,1mol/LNaOH,1mol/LHCl,2%戊巴比妥钠。方法与步骤一.胃肠运动观察:1.手术操作:(1)家兔称重,用戊巴比妥钠麻醉(20毫克/公斤体重)。(2)将兔子仰卧位固定于手术台上。(3)剪腹部毛,沿腹中线切口,剖开腹腔,露出胃和肠。方法与步骤2.实验项目:(1)观察正常情况下胃和小肠的运动。注意其紧张度(可用手触摸胃测其紧张度)。(2)由耳缘静脉静脉注射新思的明0.2-0.3ml,或滴几滴于胃肠浆膜上,观察胃和小肠运动的变化。(3)在新思的明作用的基础上,注射阿托品0.5ml,观察胃和小肠运动的变化。方法与步骤二.离体小肠平滑肌的生理特性:1.实验准备:装备麦氏浴槽,将其放置于37℃恒温水浴。麦氏浴槽内盛满37℃台氏液,将充满氧气的球胆经橡皮管连接至麦氏浴槽乙型通气管上,不断注入氧气,调节气流速度,使气泡一个接一个注入。方法与步骤2.在幽门下端分离十二指肠3-4cm,双结扎此肠段,于双结扎中间将肠段剪断,用台氏液反复冲洗肠内容物,在其两端穿线,将一端固定于麦氏浴槽乙型通气管挂钩上,另一端与张力换能器相连。方法与步骤3.待此装置稳定10-20分钟后,使用RM6240记录小肠段平滑肌运动曲线。4.实验项目:(1)观察记录37℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。(2)观察记录25℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。(3)待台氏液温度稳定在37℃后,用滴管向浴槽中加入0.01%乙酰胆碱3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。(4)待平滑肌稳定后,加入0.01%肾上腺素3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。方法与步骤(5)滴加1mol/LHCl溶液3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。(6)滴加1mol/LNaOH溶液3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。注意事项1.实验操作过程中,注意动物保温。经常用温热的生理盐水湿润胃肠。2.取小肠标本时勿牵拉。3.保证氧气的补充。实验要求描述各项实验项目所得实验现象并分析。描记小肠平滑肌运动曲线,并分析各种因素对其影响的机制。表1不同处理因素对小肠平滑肌活动的影响(次/min,g)组别频率(次/min)振幅(g)正常(37°C)25°C乙酰胆碱肾上腺素盐酸氢氧化钠乙酰胆碱作用于肠道平滑肌M3受体肾上腺素主要作用于肠道平滑肌β2受体,此受体为抑制性受体,抑制胃肠道运动。PH过高、过低,收缩幅度及张力都会降低,最适PH时收缩效果最好。肠管平滑肌对温度改变极为敏感,当温度降到30℃以下时,由于代谢水平的降低,兴奋性减弱,可出现收缩曲线基线下移,频率变慢,收缩幅度变小。有时可能会见到基线先上移后下降的现象。这是因为降温本身对肠管是一种刺激,也可短暂地加强代谢活动,所以肌张力升高。设计实验问题是怎么提出的?研究此问题的意义提出的假设中自变量是什么?因变量是什么?对照是什么?怎么分组?用三线表列出预期的结果(包括表头)