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1上海中医药大学教案首页学年：2006-2007学期：三课程名称：《分子生物学实验技术》题目：绪论时数：3本次课程要求与需要解决的问题：要求了解分子生物学常用技术的沿革、任务和在中医药学中的地位和作用。要解决3个问题：（1）分子生物学技术能不能用来研究中医，即能否用？（2）如何用分子生物学技术来研究中医，即如何用？（3）分子生物学技术用来研究中医的目的，即为何用？授课组织形式：理论介绍。部分热点问题设问，鼓励学生回答与交流。2上海中医药大学授课教案课程名称：分子生物学实验技术授课教师：方肇勤授课时间：2006-2007年度3学期第5周内容教具、时间分配、使用教材和参考书一、本课的教学目的和要求要求了解分子生物学常用技术的沿革、任务和在中医药学中的地位和作用。要解决3个问题：（1）分子生物学技术能不能用来研究中医，即能否用？（2）如何用分子生物学技术来研究中医，即如何用？（3）分子生物学技术用来研究中医的目的，即为何用？二、本课的重点、要点、难点1．中医药实验研究为什么要采用分子生物学技术。2．分子生物学技术在中医药研究中的实例。3．中医药研究经常使用的分子生物学技术。三、内容安排（含教学程序，主要内容，小结，复习思考题（提纲、测试题），下节课预习范围，及后续课程介绍）一、课堂介绍1．中医药实验研究为什么要采用分子生物学技术2．分子生物学技术在中医药研究中的实例3．中医药研究经常使用的分子生物学技术4．本课程的教学安排5．推荐的参考书籍6．具体技术介绍（1）实验桌安排的介绍（2）移液器的使用介绍二、教学方法1．围绕一些耳熟能详地中医药事例，引导学生了解该学科在中医药研究和发展中的作用和意义。2．课堂设问，启示学生思维。3．介绍学科进展。重点介绍本学科研究中层层递进采用最新技术的案例。使用教材：方肇勤主编《分子生物学技术在中医药研究中的应用》，上海科学技术出版社，2002年6月，第1版时间分配：2学时。教具：PPT备课主要参考书目、文献：1．方肇勤主编《分子生物学技术在中医药研究中的应用》，上海科学技术出版社，2002年6月，第1版2．黄培堂等译《分子克隆实验指南》，科学技术出版社，2002年8月，第3版。3．颜子颖等译《精编分子生物学实验指南》，科学技术出版社，1998年6月，第1版撰写人方肇勤教研室实验中医学撰写日期2007/43上海中医药大学教案首页学年：2006-2007学期：三课程名称：《分子生物学实验技术》题目：重组质粒、质粒转化大肠杆菌时数：3本次课程要求与需要解决的问题：1．了解分子生物学的常用载体质粒及其特征。2．了解质粒转化大肠杆菌、阳性克隆扩增方法与原理。3．掌握重组质粒技术。4．掌握质粒转化大肠杆菌、涂皿鉴定、阳性克隆扩增技术。授课组织形式：理论介绍结合实验技能培训。4上海中医药大学授课教案课程名称：分子生物学实验技术授课教师：方肇勤授课时间：2006-2007年度3学期第5周内容教具、时间分配、使用教材和参考书一、本课的教学目的和要求1．了解分子生物学的常用载体质粒及其特征。2．了解质粒转化大肠杆菌、阳性克隆扩增方法与原理。3．掌握重组质粒技术。4．掌握质粒转化大肠杆菌、涂皿鉴定、阳性克隆扩增技术。二、本课的重点、要点、难点1．重组质粒操作方法和要领。2．质粒转化大肠杆菌操作方法和要领。3．涂皿鉴定操作方法和要领。4．阳性克隆扩增操作方法和要领。三、内容安排（含教学程序，主要内容，小结，复习思考题（提纲、测试题），下节课预习范围，及后续课程介绍）1．理论课介绍（1）分子生物学的常用载体质粒及其特征，要求掌握重组质粒方法。（2）了解质粒转化大肠杆菌、阳性克隆扩增方法与原理。2．实验课操作（1）重组质粒。（2）质粒转化大肠杆菌。（3）涂皿鉴定。（4）阳性克隆扩增。使用教材：方肇勤主编《分子生物学技术在中医药研究中的应用》，上海科学技术出版社，2002年6月，第1版时间分配：理论课1学时。实验课3学时。教具：PPT和有关实验操作仪器设备、试剂、消耗材料。备课主要参考书目、文献：同上。撰写人方肇勤教研室实验中医学撰写日期2007/45上海中医药大学教案首页学年：2006-2007学期：三课程名称：《分子生物学实验技术》题目：阳性单菌落扩增、小量质粒制备时数：8本次课程要求与需要解决的问题：1．了解阳性单菌落扩增与小量质粒制备的方法与原理。2．掌握阳性单菌落扩增技术。3．掌握小量质粒制备技术。授课组织形式：理论介绍结合实验技能培训。6上海中医药大学授课教案课程名称：分子生物学实验技术授课教师：方肇勤授课时间：2006-2007年度3学期第6周内容教具、时间分配、使用教材和参考书一、本课的教学目的和要求1．了解阳性单菌落扩增与小量质粒制备的方法与原理。2．掌握阳性单菌落扩增技术。3．掌握小量质粒制备技术。二、本课的重点、要点、难点1．阳性单菌落扩增操作方法和要领。2．小量质粒制备操作方法和要领。三、内容安排（含教学程序，主要内容，小结，复习思考题（提纲、测试题），下节课预习范围，及后续课程介绍）1．理论课介绍阳性单菌落扩增与小量质粒制备的方法与原理。2．实验课操作（1）阳性单菌落扩增。（2）小量质粒制备。使用教材：方肇勤主编《分子生物学技术在中医药研究中的应用》，上海科学技术出版社，2002年6月，第1版时间分配：理论课2学时。实验课6学时。教具：PPT和有关实验操作仪器设备、试剂、消耗材料。备课主要参考书目、文献：同上。撰写人方肇勤教研室实验中医学撰写日期2007/4可加页7上海中医药大学教案首页学年：2006-2007学期：三课程名称：《分子生物学实验技术》题目：酶切重组质粒、电泳分离所插入的DNA、从凝胶中回收DNA时数：8本次课程要求与需要解决的问题：1．了解限制性内切酶，以及酶切重组质粒的方法与原理。2．了解电泳分离所插入的DNA的方法与原理。3．了解从凝胶中回收DNA的方法与原理。4．掌握酶切重组质粒的技术。5．掌握电泳分离所插入的DNA的技术。6．掌握从凝胶中回收DNA的技术。授课组织形式：理论介绍结合实验技能培训。8上海中医药大学授课教案课程名称：分子生物学实验技术授课教师：方肇勤授课时间：2006-2007年度3学期第7周内容教具、时间分配、使用教材和参考书一、本课的教学目的和要求1．了解限制性内切酶，以及酶切重组质粒的方法与原理。2．了解电泳分离所插入的DNA的方法与原理。3．了解从凝胶中回收DNA的方法与原理。4．掌握酶切重组质粒的技术。5．掌握电泳分离所插入的DNA的技术。6．掌握从凝胶中回收DNA的技术。二、本课的重点、要点、难点1．酶切重组质粒方法和要领。2．电泳分离所插入的DNA方法和要领。3．从凝胶中回收DNA方法和要领。三、内容安排（含教学程序，主要内容，小结，复习思考题（提纲、测试题），下节课预习范围，及后续课程介绍）1．理论课介绍（1）限制性内切酶及其生物学特性，以及选用内切酶切重组质粒的方法与原理。（2）电泳鉴定酶切结果，以及分离所插入的DNA的方法与原理。（3）从凝胶中回收DNA的方法与原理。2．实验课操作（1）限制性内切酶切割重组质粒。（2）灌制凝胶。（3）电泳鉴定酶切结果，分离所插入的DNA。（4）从凝胶中回收DNA。使用教材：方肇勤主编《分子生物学技术在中医药研究中的应用》，上海科学技术出版社，2002年6月，第1版时间分配：理论课2学时。实验课6学时。教具：PPT和有关实验操作仪器设备、试剂、消耗材料。备课主要参考书目、文献：同上。撰写人方肇勤教研室实验中医学撰写日期2007/4可加页9上海中医药大学教案首页学年：2006-2007学期：三课程名称：《分子生物学实验技术》题目：Northernblot时数：3本次课程要求与需要解决的问题：了解NorthernBlot方法和原理。授课组织形式：理论介绍与教学录像观摩结合。鼓励学生积极讨论。10上海中医药大学授课教案课程名称：分子生物学实验技术授课教师：方肇勤授课时间：2006-2007年度3学期第8周内容教具、时间分配、使用教材和参考书一、本课的教学目的和要求了解NorthernBlot方法和原理。二、本课的重点、要点、难点NorthernBlot方法和原理。三、内容安排（含教学程序，主要内容，小结，复习思考题（提纲、测试题），下节课预习范围，及后续课程介绍）观看和讲解NorthernBlot实验全过程。涉及：NorthernBlot方法的原理介绍。灌制RNA电泳用凝胶。RNA电泳。RNA转移至硝酸纤维膜及膜处理。随机引物法标记DNA探针。NorthernBlot的预杂交和杂交。放射自显影。同位素安全技术介绍。使用教材：方肇勤主编《分子生物学技术在中医药研究中的应用》，上海科学技术出版社，2002年6月，第1版时间分配：3学时。教具：教学录像。备课主要参考书目、文献：同上。撰写人方肇勤教研室实验中医学撰写日期2007/4可加页11上海中医药大学教案首页学年：2006-2007学期：三课程名称：《分子生物学实验技术》题目：总结和理论介绍时数：3本次课程要求与需要解决的问题：继绪论介绍后，详细总结有关实验教学的目的和意义；介绍常用分子生物学技术原理及其在中医药研究中的运用。使学生深刻了解有关内容，利于今后的使用。授课组织形式：理论介绍与一些先进实验设备、技术、实验结果PPT观摩结合。鼓励学生积极讨论。12上海中医药大学授课教案课程名称：分子生物学实验技术授课教师：方肇勤授课时间：2006-2007年度3学期第8周内容教具、时间分配、使用教材和参考书一、本课的教学目的和要求继绪论介绍后，详细总结有关实验教学的目的和意义；介绍常用分子生物学技术原理及其在中医药研究中的运用。使学生深刻了解有关内容，利于今后的使用。二、本课的重点、要点、难点1．结合所开展的实验，进一步了解实验的意义，以及在中医药研究中的应用。2．一些常用的，以及新近发展起来的技术，及其在中医药研究中的应用。三、内容安排（含教学程序，主要内容，小结，复习思考题（提纲、测试题），下节课预习范围，及后续课程介绍）中医药对基因组作用的研究技术和应用。主要介绍：基因组DNA提取、Southernblot、PCR、点突变PCR、DNA双脱氧链终止法测序。中医药对mRNA转录作用的研究技术和应用。主要介绍：组织总RNA提取、mRNA的分离、Northernblot、RTPCR、原位杂交、cDNAArray和MicroArray、DDPCR、cDNA库建立、基因全序列cDNA库筛选、RACEPCR。中医药对基因表达产物蛋白作用的研究技术和应用。主要介绍：Westernblot、ELISA、免疫组织化学、单克隆抗体制备技术、双向等电聚焦凝胶电泳。中医药对基因转录调控的研究技术和应用。主要介绍：报道基因、基因功能检测、Footprint、凝胶阻滞分析等。使用教材：方肇勤主编《分子生物学技术在中医药研究中的应用》，上海科学技术出版社，2002年6月，第1版时间分配：3学时。教具：PPT。备课主要参考书目、文献：同上。撰写人方肇勤教研室实验中医学撰写日期2007/4可加页