简答/问答•28.试述在大肠杆菌DNA复制中各种酶和其他蛋白质因子在前导链和滞后链合成中的功能。•29.为什么说DNA的复制是半保留复制?如何证明?•30.为什么说DNA的复制方式是半不连续复制?•31.简述DNA复制时酶系。•32.DNA复制的基本规律?•33.图解表示复制叉及参与的生物大分子物质。•34.简述原核细胞和真核细胞的RNA聚合酶有何不同?35.简述RNA转录的过程?•36.简述真核生物的转录后修饰的主要特点。•37.假定阅读框开始于下列每个核苷酸序列的头三个碱基,预计以它们为mRNA模板在蛋白质合成中所形成肽链的氨基酸顺序。•(1)GGUCAGUCGCUCCUCCUGAUU•(2)UUGGAUGCGCCAUAAUUUGCU•38.以原核生物为例,试述蛋白质的生物合成过程。•39.简述原核生物和真核生物翻译起始复合物的生成有何不同。•40.tRNA的二级结构为三叶草结构?有什么作用?名词解释•1、氨基酸的等电点:指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值,用符号pI表示。•2、结构域(domain):指蛋白质多肽链在二级结构的基础上进一步卷曲折叠成几个相对独立的近似球形的组装体。•3、酶的活性中心:酶分子中直接与底物结合,并催化底物发生化学反应的部位,称为酶的活性中心。•4、糖异生:由非糖物质如乳酸、甘油等在肝中转变为糖的过程。•5、氧化磷酸化:生物氧化的释能反应同时伴有ADP磷酸化生成ATP的吸能反应,二者偶联,称为氧化磷酸化。•6、呼吸链:定位于线粒体内膜,由一组H和电子传递体按一定顺序排列所构成的,能把还原当量(2H=2e+2H+)氧化成H2O的反应链称为呼吸链。•7、DNA半保留复制(semiconservativereplication):一个亲代DNA分子复制一次所得到的两个子代DNA分子,两条链里的一股是来自亲代,另一股是新合成的,即“新、旧”各半,称半保留复制。•8、不对称转录:双链DNA分子上分布着很多基因,并不是所有基因的转录均在同一条DNA单链上,而是一些基因在这条单链转录,另一些基因的转录在另一条单链上,DNA双链一次只有一条链(或某一区段)可作为模板转录,称之为不对称转录•9、酶原的激活:有些酶在细胞内合成和初分泌时,并不表现有催化活性,这种无活性状态的酶的前身物称为酶原。酶原在一定条件下,受某种因素的作用,酶原分子的部分肽键被水解,使分子结构发生改变,形成酶的活性中心,无活性的酶原转化成有活性的酶称酶原的激活。•10、核酶(ribozyme):具有酶促活性的RNA称为核酶•11.米氏常数(Km值):米氏常数(Km值):用Km值表示,是酶的一个重要参数。Km值是酶反应速度(V)达到最大反应速度(Vmax)一半时底物的浓度(单位M或mM)。米氏常数是酶的特征常数,只与酶的性质有关,不受底物浓度和酶浓度的影响。12.多酶体系(multienzymesystem):由几个酶彼此嵌合形成的复合体称为多酶体系。多酶复合体有利于细胞中一系列反应的连续进行,以提高酶的催化效率,同时便于机体对酶的调控。多酶复合体的分子量都在几百万以上。13.变构酶(allostericenzyme):或称别构酶,是代谢过程中的关键酶,它的催化活性受其三维结构中的构象变化的调节。14.同工酶(isozyme):是指有机体内能够催化同一种化学反应,但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。15.酶的比活力(enzymaticcompareenergy):比活力是指每毫克蛋白质所具有的活力单位数,可以用下式表示:比活力=活力单位数/蛋白质量(mg)16、操纵子(Operon):在转录水平上控制基因表达的协调单位,包括启动子(P)、操纵基因(O)和在功能上相关的几个结构基因。•17.冈崎片段(Okazakifragment):一组短的DNA片段,是在DNA复制的起始阶段产生的,随后又被连接酶连接形成较长的片段。在大肠杆菌生长期间,将细胞短时间地暴露在氚标记的胸腺嘧啶中,就可证明冈崎片段的存在。18.复制叉(replicationfork):复制DNA分子的Y形区域。在此区域发生链的分离及新链的合成。19.前导链(leadingstrand):DNA的双股链是反向平行的,一条链是5/→3/方向,另一条是3/→5/方向,上述的起点处合成的领头链,沿着亲代DNA单链的3/→5/方向(亦即新合成的DNA沿5/→3/方向)不断延长。所以领头链是连续的。20.滞后链(laggingstrand):已知的DNA聚合酶不能催化DNA链朝3/→5/方向延长,在两条亲代链起点的3/端一侧的DNA链复制是不连续的,而分为多个片段,每段是朝5/→3/方向进行,所以随后链是不连续的。22.内含子(intron):真核生物的mRNA前体中,除了贮存遗传序列外,还存在非编码序列,称为内含子。23.外显子(exon):真核生物的mRNA前体中,编码序列称为外显子。24.反密码子(anticodon):在tRNA链上有三个特定的碱基,组成一个密码子,由这些反密码子按碱基配对原则识别mRNA链上的密码子。反密码子与密码子的方向相反。25顺反子(cistron):基因功能的单位;一段染色体,它是一种多肽链的密码;一种结构基因。26.核酸的变性、复性(denaturation、renaturation):当呈双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时,其中的氢键便断开,双链DNA便脱解为单链,这叫做核酸的“溶解”或变性。在适宜的温度下,分散开的两条DNA链可以完全重新结合成和原来一样的双股螺旋。这个DNA螺旋的重组过程称为“复性”。27退火(annealing):当将双股链呈分散状态的DNA溶液缓慢冷却时,它们可以发生不同程度的重新结合而形成双链螺旋结构,这现象称为“退火”。28.增色效应(hyperchromiceffect):当DNA从双螺旋结构变为单链的无规则卷曲状态时,它在260nm处的吸收便增加,这叫“增色效应”。29.减色效应(hypochromiceffect):DNA在260nm处的光密度比在DNA分子中的各个碱基在260nm处吸收的光密度的总和小得多(约少35%~40%),这现象称为“减色效应”。•30.发夹结构(hairpinstructure):RNA是单链线形分子,只有局部区域为双链结构。这些结构是由于RNA单链分子通过自身回折使得互补的碱基对相遇,形成氢键结合而成的,称为发夹结构。•31.DNA的熔解温度(Tm值):引起DNA发生“熔解”的温度变化范围只不过几度,这个温度变化范围的中点称为熔解温度(Tm)。•32.分子杂交(molecularhybridization):不同的DNA片段之间,DNA片段与RNA片段之间,如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性,形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。•33、增强子(enhancer):指一种能够提高转录效率的顺式调控元件,远离转录起始点、决定基因的时间、空间特异性、增强启动子转录活性的DNA序列•34:启动子promoter:指RNA聚合酶结合并起动转录的DNA序列。真核启动子一般包括转录起始点及其上游约100-200bp序列,包含有若干具有独立功能的DNA序列元件,每个元件约长7-30bp•35:底物磷酸化:这种直接利用代谢中间物氧化释放的能量产生ATP的磷酸化类型称为底物磷酸化。•36、两性离子(dipolarion):指在同一氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷,又称兼性离子或偶极离子。37、蛋白质的三级结构:指蛋白质在二级结构的基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的构象。•38、凝胶电泳:以凝胶为介质,在电场作用下分离蛋白质或核酸等分子的分离纯化技术。39、顺反子(cistron):基因功能的单位;一段染色体,它是一种多肽链的密码;一种结构基因。•40、DNA的熔解温度(Tm值):引起DNA发生“熔解”的温度变化范围只不过几度,这个温度变化范围的中点称为熔解温度(Tm)。41、分子杂交(molecularhybridization):不同的DNA片段之间,DNA片段与RNA片段之间,如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性,形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。42、辅基:酶的辅因子或结合蛋白质的非蛋白部分,与酶或蛋白质结合得非常紧密,用透析法不能除去。43、激活剂:凡是能提高酶活性的物质,都称激活剂,其中大部分是离子或简单的有机化合物。44、抑制剂:能使酶的必需基团或酶活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶的催化活性甚至使酶的催化活性完全丧失的物质。••45、诱导酶:是指当细胞中加入特定诱导物后诱导产生的酶,它的含量在诱导物存在下显著增高,这种诱导物往往是该酶底物的类似物或底物本身。45、.酶原:酶的无活性前体,通常在有限度的蛋白质水解作用后,转变为具有活性的酶。46、:磷氧比:电子经过呼吸链的传递作用最终与氧结合生成水,在此过程中所释放的能量用于ADP磷酸化生成ATP。经此过程消耗一个原子的氧所要消耗的无机磷酸的分子数(也是生成ATP的分子数)称为磷氧比值(P/O)。如NADH的磷氧比值是3,FADH2的磷氧比值是2。•47、底物水平磷酸化:在底物被氧化的过程中,底物分子内部能量重新分布产生高能磷酸键(或高能硫酯键),由此高能键提供能量使ADP(或GDP)磷酸化生成ATP(或GTP)的过程称为底物水平磷酸化。此过程与呼吸链的作用无关,以底物水平磷酸化方式只产生少量ATP。•48、糖异生:非糖物质(如丙酮酸乳酸甘油生糖氨基酸等)转变为葡萄糖的过程。49、糖酵解途径:糖酵解途径指糖原或葡萄糖分子分解至生成丙酮酸的阶段,是体内糖代谢最主要途径。•50、磷酸戊糖途径:磷酸戊糖途径指机体某些组织(如肝、脂肪组织等)以6-磷酸葡萄糖为起始物在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下形成6-磷酸葡萄糖酸进而代谢生成磷酸戊糖为中间代谢物的过程,又称为磷酸已糖旁路。•51、脂肪酸的β-氧化:脂肪酸的β-氧化作用是脂肪酸在一系列酶的作用下,在α碳原子和β碳原子之间断裂,β碳原子氧化成羧基生成含2个碳原子的乙酰CoA和比原来少2个碳原子的脂肪酸。•52、衰减子:位于结构基因上游前导区调节基因表达的功能单位,前导区转录的前导RNA通过构象变化终止或减弱转录。•53、腺苷酸环化酶:催化ATP焦磷酸裂解产生环腺苷酸(cAMP)的酶。中英文缩写互译•1.NAD+(nicotinamideadeninedinucleotide):烟酰胺腺嘌呤二核苷酸;辅酶Ⅰ。2.FAD(flavinadeninedinucleotide):黄素腺嘌呤二核苷酸。3.THF(tetrahydrofolicacid):四氢叶酸。4.NADP+(nicotinamideadeninedinucleotidephosphate):烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸;辅酶Ⅱ。5.FMN(flavinmononucleotide):黄素单核苷酸。6.CoA(coenzymeA):辅酶A。7.cAMP:腺苷酸环化酶•8.ATP,腺苷三磷酸•9.hnRNA,核不均一RNA•10.bZip:碱性亮氨酸拉链结构填空•1.大多数蛋白质中氮的含量较恒定,平均为___%,如测得1克样品含氮量为10mg,则蛋白质含量为____%。2.在20种氨基酸中,酸性氨基酸有_________和________2种,具有羟基的氨基酸是________和_________,能形成二硫键的氨基酸是__________.3.蛋白质中的_________、___________和__________3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在280nm处有最大吸收值。4.精氨酸的pI值为10.76,将其溶于pH7的缓冲液中,并置于电场中,则精氨酸应向电场的_______方向移动。•1.16;6.252.谷氨酸;天冬氨酸;丝氨酸;苏氨酸3.苯丙氨酸;酪氨酸;色氨