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念珠菌感染特性及耐药性分析医学检验专业指导老师学生摘要：目的探讨念珠菌感染的特点及耐药性情况，为临床合理选用抗真菌药物提供实验室依据。方法应用回顾性调查分折的方法，对我院1年间住院病人、门诊病人标本分离的193株念珠菌进行统计并对常用抗真菌药敏试验结果进行分折。结果分离出的念珠菌以内科系统为主，共分离出136株(占70.47%)；检出真菌最多的部位是呼吸道，占真菌标本的76.17%；其种类以白色念珠菌及热带念珠菌为主，分别占73.58%和15.54%；药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。结论加强临床真菌分离菌株对抗菌药物的耐药性关注，根据药敏试验合理应用抗真菌药物十分重要。关健词：念珠菌；感染特性；耐药性【Abstract】objectiveToinvestigatethecharacteristicofCandidainfectionandexaminethedrugresistancecondition,soastoprovideassistancetothereasonableuseofantifungalagentsclinically.MethodsToanalyzethestatusofdrugresistanceof193strainsofCandida,whichwereisolatedfrominpatientsandoutpatientsofourhospital.Antifungalagentssusceptibilitytestwasdonetoknowthedrugresistance.ResultsTheCandidaisolatedinourhospitalwerepredominantfrommedicalunit,136strainsofCandidawereidentified(accountedfor70.47%);ThespecimenswheredetectedCandidaweremostlyfromrespiratorytract,accountingfor76.17%.TheStrainsofCandidaalbicansandC.tropicalishadthehighstdetectionrates,accountingfor73.58%and15.54%respectively.TheratesofsusceptibilityofCandidatoAmphotericinB,Nystatinweremorethan90%,andtheratesofsusceptibilitytoTerbinafinewasonly6.3%forCandidaalbicans,but100%forC.tropicalis.ConclusionPaymoreattentiontothedrugresistancetotheCandidaisolatedfromtheclinical.Antifungalagentsshouldbeselectedreasonablyaccordingtotheresultofdrugsusceptibilitytest.【Keywords】Candida；infectioncharacteristic；Drugresistance随着科学技术的发展，广谱抗生素、免疫抑制剂及各种侵入性诊断治疗的广泛应用，机会致病菌念珠菌感染在近年明显增多。真菌感染已成为白血病，淋巴瘤，免疫抑制，长期使用广谱抗生素，中心静脉插管，中性粒细胞减少，烧伤，低体重的早产儿，血液透析，骨髓或器官移植，胃肠道手术和机械通气等特殊人群的严重感染性疾病[1][2]。并且念珠菌对常用的抗真菌药物存在耐药菌株，给临床治疗带来很大困难。我们对临床标本分离的193株念珠菌属的感染类型及药敏进行分析，现将结果报道如下：1材料与方法1.1材料1.1.1标本来源193株念珠菌来自我院门诊和住院的感染患者的各类标本中。1.1.2仪器VITEK-AMS32全自动微生物分折仪，法国Bio-Merieux公司制造。1.1.3试剂YBC卡为Bio-Merieux公司配套产品，念珠菌chromGA显色培养基(法国科玛嘉公司提供)，8种抗真菌药物：两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬(辉瑞公司提供)。1.1.4质控菌株白色念珠菌ATCC90029，购自卫生部临检中心。氟康唑可接受的抑菌环直径范围为28-39mm。1.2方法1.2.1细菌分离鉴定按《全国临床检验操作规程》[3]进行培养分离，分离所得念珠菌采用chromGA显色培养基或用VITEK-32YBC卡鉴定到种的水平。1.2.2细菌药敏试验采用2003年美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)认可的酵母菌纸片扩散法进行敏感性试验。Mueller-Hinton(MH)琼脂中补充2％葡萄糖和0.5mg／L美蓝[4]。酵母菌在无菌生理盐水中稀释，比浊至0.5号麦氏管浊度，酵母菌量约为1×106～5×106／ml，均匀的涂抹在4mm厚平皿培养基上，贴上药敏纸片后，放置35℃孵箱，24小时判断结果。质控菌株同时进行K-B法药敏试验，结果符合NCCLS质控要求。2结果2.1念珠菌的分布：193株念珠菌分布在10多个科室，以内科系统为主，共分离出136株(占70.47%)；外科系统分离出28株(占14.51%)。分布构成（见表1）表1193株念珠菌分布的科室构成科室株数构成比%科室株数构成比%内科系统13670.47外科系统2814.51呼吸5126.42胸外84.15干部病房2211.40脑外52.59血液199.84外科重监室42.07内科重监室136.74肝胆42.07消化105.18骨科52.59神经84.15泌外、普外21.04心内52.59其它系统2814.51肾病科42.07儿科105.18内分泌21.04妇产科21.04风湿10.52门诊115.70中医10.52其它63.122.2念珠菌的临床标本分布：念珠菌的感染来自临床各类标本。其中以痰标本为主，分离出147株(占76.17%)；生殖系分泌物分离出10株(占5.18%)；尿分离出8株(占4.15%)；口腔分泌物分离出5株(占2.59%)；其它标本分离出23株(占11.92%)。2.3193株念珠菌的种类和对抗真菌药物的药敏结果（见表2）：白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，分离出142株(占73.58%)；药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。表2：念珠菌对抗真菌药物的药敏结果3讨论3．1念珠菌的感染特性：调查表明念珠菌感染的患者主要分布在呼吸、血液、消化、肿瘤等内科科室及儿科，尤其是呼吸科患者念珠菌感染所占比例高达26.42%，与一些有关报道不同［5］，原因可能是该病区的患者多为长期患病的老年人。机体对真菌感染的易感性主要与宿主防御功能有关［6］,老年人因生理防御功能、免疫功能衰退，白细胞介素2(IL-2)的产生减少，致使T细胞增殖能力减弱，易引起念珠菌感染，本组病例50岁患者占78.24%，故真菌感染率升高；其次是血液、消化、内科监护室、干部病房、儿科，主要是由于体弱、免疫力低下、病情较重，长期反复使用多种抗生素等因素，导致体内微生态的平衡紊乱，造成菌群失调，抑制了常见的条件致病菌，使真菌大量繁殖。各种临床标本中，痰液标本检出率最高［7］，事实上痰液的细菌检测多为混合型感染，由于正常人的上呼吸道也存在少量的真菌，使检出率大于感染率。故我们应重视真菌的镜检规范化［8］，告知患者正确的留取痰液的方法，念珠菌存在于自然界及正常人的口腔、胃肠、阴道、皮肤上，白色念珠菌是条件致病菌，当全身或局部免疫力降低时可出现临床症状。白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，占73.58%，白色念珠菌同时是致病力最强且具有抑制机体免疫功能的能力［9］，其感染可分为内源性何和外源性的。正常情况下，人体内部正常菌群与病原微生物相互抑制生长，处于相对平衡状态，当使用抗生素后，敏感细菌被抑制或杀灭，则使白色念珠菌繁殖，导致真菌感染。3．2念珠菌的耐药特性：抗真菌药的类型不同，对不同种真菌的体外抗菌活性有较大的差异［10］。我院采用两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬8种抗真菌药物，念珠菌对其敏感率依次为92.75%、21.24%、71.50%、48.70%、22.80%、97.93%、81.35%、8.62%，传统的两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，可作为治疗念珠菌感染的常用药物。两性霉素B抗菌谱广，但副作用较大，故用药过程中要严密观察其肾毒性［11］；而90年代推出的三唑类抗真菌药，仅氟康唑敏感率较高70%，酮康唑及其咪康唑的敏感率都低于50%，且存在40%以上的中介率；特比萘芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%；氟康唑敏感性较好、药物毒副作用小，可作为安全有效的抗真菌药物。综上所述，真菌的感染在临床上逐渐增加，对常用抗真菌药存在不同程度的耐药性，合理有效的预防性用药也为减少耐药菌株的产生具有一定的作用，根据药敏试验合理应用抗真菌药物十分重要。抗真菌药物白色念珠菌(n=142)热带念珠菌(n=30)其它真菌(n=21)合计(n=193)SIRSIRSIRSIR两性霉素95.072.112.8296.673.33…71.4219.059.5292.754.153.115-氟胞嘧啶20.421.4178.1730106014.2923.8161.921.245.1873.58氟康唑70.4225.354.237026.673.3380.95…19.0571.5022.805.70酮康唑43.6647.898.456040…66.6728.574.7648.7044.566.74咪康唑25.3555.6319.02…208038.1047.6242.8622.8046.1131.09制霉菌素97.890.701.41100……95.24…4.7697.930.521.55伊曲霉素81.6910.567.5586.67103.3371.439.5219.0581.3510.368.29特比萘芬6.307.0986.61100……41.1852.945.888.625.7085.06参考文献：[1]徐英春，王澎，陈民钧．辉瑞公司全球多中心酵母菌敏感性监测结果[J]．中国抗感染化疗杂志，2003，3(3)：187—190[2]WenzelR,BrewerTF,ButzlerJP,etal.fungi,Aguidetoinfectioncontrolinthehospital(2ndEdition),internationalsocietyforinfectiondiseases[M].Boston,MA.USA,BCDeckerIncHamilton.London,2002,157-159[3]中华人民共和国卫生部医政司编.《全国临床检验操作规程》（第二版）[S].东南大学出版社出版发行.南京.1997，540-548.[4]NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards.Methodforantifungaldiskdiffusionsusceptibilitytestingofyeasts;proposedguideline[S].NCCLSM44-P,2003,123：6[5]常东，蒋伟，黄志红,等.真菌感染及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2005，15(3)：345-347.[6]王亚霞，魏琴，刘亚琼,等.医院的白色念珠菌感染原因探讨及预防[J].中华医院感染学杂志，2003，13(9)：885-887.[7]沈翠芳，张晓祥，临床标本的真菌培养和药敏分析[J