生物实验室安全管理..

生物实验室安全管理主要内容一、实验室生物安全概论二、实验室生物安全法律法规和标准三、生物安全实验室的管理一、实验室生物安全概论与致病微生物打交道就存在安全问题1976年英国某医学实验室的工作人员体检时发现结核菌感染者比其他人员高5倍1978年英国报告一个商业洗衣房因清洗来自一Q热实验室的内衣裤及外衣时发生6例雇员和1例参观者感染Q热1974年丹麦某医院临床生化检验室的工作人员肝炎发病率比普通人群高出7倍1992年美国报告因工作感染爱滋病的人员13例，其中有1例是实验室工作者，12例是临床医生或护士1993年国内某医院报告225名医院工作人员HBV检测结果，医生护士、食堂工作人员、检验人员、其中检验人员感染率最高，阳性率为81.2%。多为主观估计错误及操作失误引发最易受感染的人员依次为：实验室操作人员、动物饲养员、实验室技工、清洁员、文书人员、来访人员。门卫人员很少受感染。什么是实验室生物安全是指当实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护装置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。实验室生物安全防护目的保护操作者保护环境保护被操作对象生物安全实验室生物安全实验室biosafetylaboratory：通过防护屏障和配套管理措施，达到生物安全要求的生物实验室和动物实验室生物安全实验室的构成硬件：一级防护屏障二级防护屏障软件：管理机构规章制度标准操作程序良好的行为习惯生物安全实验室管理管理机构安全委员会：负责本实验室所操作生物因子的生物危险程度评估，审议实验室管理规章制度、标准操作程序、突发事故应急预案等。实验室负责人：对实验室所有员工和来访者的安全负责；负责拟订实验室管理规章制度、标准操作程序、突发事故应急预案等文件；负责培训员工；决定进入实验室人员实验室安全负责人：协助管理层负责安全事宜管理文件实验室管理规章制度：如培训制度、准入制度、健康监测报告制度、个人良好行为制度、意外事故报告制度等标准操作程序：如实验废弃物处置标准操作程序、进出实验室标准程序、菌毒种使用标准操作程序、实验室消毒标准操作程序、以外事故处理标准操作程序及各种仪器设备和实验标准操作程序等生物安全实验室一级防护屏障一级防护屏障primarybarrier是通过个人防护装备、生物安全柜、负压罩等实现的操作者和被操作对象之间的隔离。一级防护包括两方面内容：（1）生物安全柜(biologicalsafetycabinet,BSC)和类似的设备等（2）个人防护装备(personal一级防护生物安全柜biosafetycabinet防止操作过程中含有危害性或未知生物气溶胶散逸的空气净化安全装置。核心是：高效滤器（HEPA)和风机生物安全柜的作用主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸.保护操作人员-负压保护周边环境-HEPA可以保护样品-层流生物安全柜分级I级生物安全柜---保护工作人员和环境II级生物安全柜---保护工作人员、环境和试样（产品）III级生物安全柜---采用手套箱更严格地保护工作人员、环境和试样（产品）ClassII生物安全柜的分类A型生物安全柜II级1.A1型生物安全柜(无排风管路)70%柜内循环，30%空气排出，工作窗口流速为0.38m/s2.A2型生物安全柜(有排风管路)70%柜内循环，30%空气排至室外，工作窗口流速为0.51m/sB型生物安全柜3.II级B1型生物安全柜30%柜内循环，70%空气排出,工作窗口流速为0.51m/s4.II级B2型生物安全柜100%空气排出,工作窗口流速为0.51m/s安全柜的选择A类:用于不涉及有害化学品的日常的微生物实验B类:适用于操作放射性核素和挥发性化学品选A类还是B类生物安全柜的关键：不是生物因素，而是操作人员是否会用到挥发性的有害物质或放射性物质……安全罩(safetyhood)：即覆盖在生物医学实验室工作台或仪器设备上的内部空气压力低于环境压力的经HEPA滤器过滤的排风罩，以减少对实验室工作者和环境的危害。个人防护装备(PersonalProtectiveEquipment,PPE)定义：是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。用途：在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷濺物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。个人防护装备防护部位：1、眼睛、2、头面部、3、呼吸道4、躯体、5、手、足6、耳（听力）个人防护装备装备包括：1、眼镜安全镜、护目镜、紧急洗眼装置）2、口罩、面罩、防毒面具3、帽子4、防护衣(实验服、隔离衣、连体衣、围裙)5、手套6、鞋套等。７、听力保护器二级防护屏障secondarybarrier：是生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离生物安全实验室二级防护屏障实验室的设施结构通风空调系统给水排水电气和控制系统二级隔离的防护能力取决于实验室分区和定向气流一般按照实验因子污染的概率把实验室分为洁净、半污染和污染三个区实验室分区的概念清洁区：是指在正常情况下不可能有实验因子的污染的区域。半污染区：是指在正常情况下只有轻微污染可能的区域。此区的功能是大量的准备工作,例如培养基、细胞、制剂的配制、低温冰箱的放置等。在此工作的人员要做好个人防护,如穿上一层防护服、戴口罩和手套等。污染区：是指操作实验因子的地方(BSL-3中心实验室),在操作过程中一定会有污染的区域,有潜在严重污染的可能。微生物危害等级分类《中国医学微生物菌种保藏管理办法》（1985年，卫生部批准实施）《实验室生物安全通用要求》《病原微生物实验室生物安全管理条例》与国外危害等级排序相反微生物危害等级(GB19489)GB19489-2004《实验室生物安全通用要求》（2004年10月1日实施）分级依据微生物的致病性；传播方式和宿主范围；具有的有效预防措施；具有的有效治疗措施分级危害等级I（低个体危害，低群体危害）危害等级Ⅱ(中等个体危害，有限群体危害)危害等级III（高个体危害，低群体危害）危害等级Ⅳ(高个体危害，高群体危害)微生物危害程度分级危险等级I（低个体危害，低群体危害）：不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。危险等级Ⅱ(中等个体危害，有限群体危害)：能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。微生物危害程度分级危险等级III（高个体危害，低群体危害）：能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体。危险等级Ⅳ(高个体危害，高群体危害)：能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传播的病原体。微生物危害等级(国务院条例)《病原微生物实验室生物安全管理条例》分级依据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度将病原微生物分为四类一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物微生物危害等级(国务院条例)三类是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物四类是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物各种病原微生物的危害等级分类参见卫生部《病原微生物名录》生物安全分级根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将生物安全防护水平(biosafetylevel，BSL)分为4级，Ⅰ级防护水平最低，Ⅳ级防护水平最高。以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平。生物安全实验室的分级实验室分级处理对象危险等级BSL-1对人体和环境危害较低，不会引发健康成人疾病Ⅰ级四类BSL-2对人体和环境有中等危害或具有潜在危险的致病因子Ⅱ级三类BSL-3主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致命疾病的致病因子。通常有预防治疗措施Ⅲ级二类BSL-4对人体有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明的微生物。尚无预防治疗措施Ⅳ级一类一级生物安全防护简介适用于实验对象已知对健康成年人无致病作用，对实验室工作人员和环境的潜在危害很小。一级生物安全防护简介举例：枯草芽孢杆菌Naegleriagruberi（耐格里原虫）感染性犬肝炎病毒大肠杆菌二级生物安全防护简介适用于实验对象对人和环境具有中等潜在危害。二级生物安全防护简介麻疹病毒沙门氏菌弓形虫乙肝病毒举例：*有有效的疫苗或抗生素治疗有效二级生物安全防护简介举例：血源病原体人类体液，尤其是明显有血液污染的体液*特别要警惕污染的针头或者锐器三级生物安全防护简介适用于实验对象是通过呼吸途径使人感染导致严重的甚至是致死性疾病的感染性材料。三级生物安全防护简介暴露于通过气溶胶途径传播的致病菌严重感染，有可能致命例如：结核杆菌圣路易脑炎病毒伯纳特考克斯体四级生物安全防护简介适用于实验对象是危险的和新的感染性材料，表现出通过气溶胶途径传播实验室感染和致命疾病的高度危险性。四级生物安全防护简介有暴露于通过气溶胶传播或者传播途径不明确的致病菌潜在可能感染可能致死例如：埃波拉病毒无名病毒（SNV）里夫谷热病毒生物危害评估评估目的生物危害评估是对微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估目的是为确定生物安全防护等级、实验标准操作规程提供重要依据在危害评估的基础上，按不同级别的防护要求选择适当的个人防护装备防止工作人员发生感染，同时避免过分防护在群众中造成恐慌生物危害评估评估内容生物因子的种类（已知的、未知的、基因修饰的或未知传染性的生物材料）来源传染性、致病性传播途径在环境中的稳定性感染剂量、浓度动物实验数据预防和治疗BSL-2的实验室的建设要求可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行,并使用个体防护设备。处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行,并使用个体防护设备。BSL-2的实验室的建设要求每个实验室应设洗手池,宜设置在靠近出口处。实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙,不得铺设地毯。实验台表面应不透水,耐腐蚀、耐热。实验室中的家具应牢固。为易于清洁,各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。实验室如有可开启的窗户,应设置纱窗。BSL-2的实验室的建设要求应设置实施各种消毒方法的设施,如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。应设置洗眼装置。实验室门宜带锁、可自动关闭。实验室出口应有发光指示标志。实验室宜有不少于每小时3～4次的通风换气次数。生物安全标志其他概念1．消毒(disinfection)：是减少细菌芽胞除外的微生物的数量，使其达到无害的程度，不一定杀灭或清除全部的微生物。2．灭菌(sterilization)：灭菌是有效地使目的物没有微生物的措施和过程，即杀灭所有的微生物。一般的细菌繁殖体和病毒1210C20min即可灭菌,对细菌芽胞需要30min以上;对朊病毒(Prion)要1340C20min以上才能灭菌。3.高效空气过滤器(HEPAfilter)：是指在额定风量和有效滤过面积下及气流阻力在245Pa以下的对粒子径≥0.3μm的粒子捕集效率在