原粮中农药残留检验和判定实施细则

原粮中农药残留检验和判定实施细则——有机磷农药、有机氯农药、拟除虫菊酯类农药、氯化苦、磷化物编制单位：国家粮食局标准质量中心南京财经大学I目录第一章粮食中有机磷农药残留量的测定…………………………1第二章粮食中有机氯农药残留量的测定…………………………5第三章粮食中拟除虫菊酯类农药残留量的测定…………………8第四章粮食中氯化苦的测定………………………………………11第五章粮食中磷化物的测定………………………………………14第六章农药残留检验结果的判定…………………………………19后记………………………………………………………………20-1-第一章粮食中有机磷农药残留量的测定一、检验流程：上机测定结果计算浓缩分样样品粉碎提取净化二、测定方法和原理综合GB/T5009.20-2003食品中有机磷农药残留量的测定（第二法）和GB/T5009.145-2003植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留的测定方法，并作部分改动。三、试剂（一）丙酮、二氯甲烷1.为了确保溶剂的纯度满足农药残留分析的要求，需预先对市售的溶剂按下法检验。取100mL溶剂，以旋转蒸发器浓缩至1mL。取5μL，在准备应用的色谱条件下，注入气相色谱仪内，在色谱图上于2～60min内，不应有高于三倍噪音的杂质峰。2.达到检验要求的溶剂，可以直接使用。对达不到要求的溶剂，可按以下方法进行重蒸馏处理：丙酮：向丙酮中逐次加入少量高锰酸钾进行回流，直至紫色不褪为止，然后蒸馏，收集沸程为55～57℃的馏分，置于棕色瓶中密闭保存。二氯甲烷：一般二氯甲烷可直接重蒸馏，收集沸程39～41℃的馏分，置于棕色试剂瓶中避光保存。注意事项：（1）丙酮、二氯甲烷均至少为分析纯级。（二）测定用水注意事项：1.为去离子水或同等级别的水。（三）中性氧化铝在550℃灼烧4h。用前于130℃复烘5h，加5%水脱活，储存于干燥器内备用。（四）活性炭层析用，20～40目。将活性炭放入浓盐酸中，加热煮沸1h，用蒸馏水洗至中性，烘干后，放入带盖瓷皿内、盖上皿盖，在550℃灼烧2h，用前在105℃烘4h，储存于干燥器内备用。或按GB/T5009.20-2003处理。（五）无水硫酸钠分析纯级。依次用二氯甲烷、丙酮洗涤，抽滤后于130℃烘5h，储存于干燥器内备用。（六）脱脂棉放入索氏抽提器中，加丙酮-正己烷（4:96，v：v）混合溶剂，在水浴上回流4h，取出后在通风橱内让其自然挥干。（七）有机磷农药标准溶液-2-1.标准储备液：低温保存。使用时提前1～2小时取出并在室温下放置以使其浓度平衡。2.标准使用液：使用火焰光度检测器（FPD）时，以二氯甲烷或丙酮稀释并定容；使用氮磷检测器(NPD、FTD、TSD)时，以丙酮稀释并定容。低温避光保存。（八）其它试剂遵循GB/T5009.20-2003和GB/T5009.145-2003的相关要求。四、仪器（一）气相色谱仪具火焰光度检测器（FPD）或氮磷检测器(NPD、FTD、TSD)。（二）玻璃器皿的清洗与存放可用丙酮冲洗（涮）两次，然后在肥皂水里浸泡；也可用洗液冲泡。取出器皿并用水彻底冲洗，然后依次用蒸馏水、丙酮冲洗。倒置移液管和容量瓶在一个搁物架上晾干，将玻璃器皿储藏在防尘柜内。注意事项：1.尽量避免使用洗衣粉洗涤。2.玻璃器皿使用前，用将要用到的溶剂冲洗。（三）振荡器：平转式五、分析步骤及要点（一）试样处理1.粉碎试样细度：样品经粉碎机（如：JFSD-100型）粉碎（须95%以上通过20目筛），合并筛上、筛下部分，混匀后供分析。注意事项：（1）稻谷样品预先以砻谷机脱壳，未脱壳的稻谷以手工剥壳。分取净糙米粉碎后测定。（2）为避免不同样品间的交叉污染，可先取20g左右待粉碎试样进行预粉碎，清理粉碎机并弃除该部分粉碎的试样，再对剩余样品进行粉碎并收集后待测定。（3）通过筛网选择，样品应经一次粉碎即达到粉碎细度要求。（4）粉碎的试样应进行细度检验，细度合格时将检验筛的筛上和筛下物合并。2.提取（1）稻谷、小麦、玉米样品的提取：按GB/T5009.20-2003第二法进行。稻谷：称取10.00g粉碎的糙米试样于100mL具塞三角瓶中，加入0.5g中性氧化铝及20mL二氯甲烷，振荡提取0.5h，过滤，收集滤液。小麦、玉米：称取10.00g粉碎的试样于100mL具塞三角瓶中，加入0.5g中性氧化铝、0.2g活性炭及20mL二氯甲烷，振荡提取0.5h，过滤，收集滤液。（2）大豆样品的提取：按GB/T5009.145-2003进行，称取20.00g粉碎并混匀的大豆试样于250mL具塞三角瓶中，加入5g无水硫酸钠和100mL丙酮，振荡提取30min，过滤后取50mL滤液于分液漏斗中。注意事项：①样品混匀：称样前将样品充分混匀。-3-②控制中性氧化铝、活性炭的用量，用量过大将导致回收率降低。③振荡提取：建议使用平转式振荡器；振荡速度以100转/分钟为宜。④过滤：以多折快速定性滤纸过滤，开始的3～5mL滤液应弃去。3.净化：（1）稻谷、小麦、玉米使用FPD检测器时，样品提取液不需要进行净化处理，直接进样；残留农药浓度过低时，量取15mL滤液浓缩至近干后以二氯甲烷定容至2.0mL进样。使用NPD、FTD、TSD检测器时，样品提取液不需要进行净化处理，但为了减少二氯甲烷溶剂峰的干扰，应量取一定体积滤液（5～10mL）浓缩至近干后以丙酮定容至相同体积，经过滤再进样。（2）大豆在大豆样品提取液的分液漏斗中加入50mL5%氯化钠溶液，再以50mL、50mL、30mL二氯甲烷提取三次，合并二氯甲烷层，以无水硫酸钠脱水，再在旋转蒸发器上浓缩至近干并以丙酮定容。注意事项：①萃取：分液漏斗不能涂凡士林。单次振摇萃取时间应在2min以上。②脱水：在漏斗中塞入脱脂棉，再加入25g左右无水硫酸钠。脱水速度不宜过快，以无水硫酸钠层上方无积液为度。样品溶液脱水完成后继续用约40mL二氯甲烷分次洗涤无水硫酸钠层，合并于样品溶液并浓缩。③浓缩：为减少浓缩阶段农药的分解和挥发，可采用旋转蒸发器进行减压浓缩。为减少后续转移操作的损失，浓缩瓶一般选用50mL体积，样品溶液采用分次加入的方法进行浓缩，浓缩过程中，应注意避免样品溶液的二次污染。为减少残留农药的损失，样品溶液所接触的水浴温度以不超过50℃为宜；样品溶液不能蒸干，否则会导致回收率降低。④定容：定容体积视检测器类型和灵敏度可灵活控制，一般定容至5～25mL，浓缩液转移时对浓缩瓶的洗涤应遵循“少量多次”原则；定容的样品溶液不能及时进行测定时，应在密闭和低温条件下存放。进样前样品溶液充分摇匀。（二）测定1.仪器参考条件色谱柱：采用0.32mm×0.25μm×30mHP-5毛细管柱，采用不分流、恒压模式进样。注意事项：①进样体积控制在1μL左右，样品溶液和标准使用液的进样体积保持一致；②实际测定过程中温度、流速等仪器参数的选择可根据所用仪器的实际情况进行优化，以尽可能提高分离度。2.标准曲线（1）浓度范围一般控制在0.05～1.0μg/mL，根据实际需要进行调整。（2）标准使用液进样后测定峰高或峰面积，绘制浓度C（μg/mL）—响应值（峰高或峰面积）标准曲线。注意事项：-4-①对仪器分析的线性范围进行考察，推荐的多点浓度为：0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.25μg/mL、0.50μg/mL、0.75μg/mL、1.00μg/mL，相关系数r要求不低于0.999。②标准溶液配制时，溶液的移取量要求准确、定容后充分摇匀。3.样品测定样品液测定峰高或峰面积，与标准比较定量。六、结果计算（一）稻谷、小麦、玉米mVCX1=X——样品的农药残留量，mg/kgC1——由峰高（或峰面积）从标准曲线上查得的样品溶液中残留农药的浓度，μg/mLV——样品溶液的（定容）体积，mLm——样品的称样量，g（二）大豆21×=mVCXX——样品的农药残留量，mg/kgC1——由峰高（或峰面积）从标准曲线上查得的样品定容液中残留农药的浓度，μg/mLV——样品溶液浓缩后的定容体积，mLm——样品的称样量，g注意事项：1.结果保留两位有效数字。2.方法精密度要求参照GB/T5009.20-2003。-5-第二章粮食中有机氯农药残留量的测定一、检验流程：分样样品粉碎提取浓缩净化上机测定结果计算二、测定方法和原理（一）方法采用GB/T5009.19-2008第二法，气相色谱分析采用毛细管色谱柱进行。（二）原理试样中六六六、滴滴涕经石油醚提取、浓硫酸磺化去杂后用气相色谱法对不同异构体和代谢物分别测定，与标准比较定量。三、试剂（一）石油醚（沸程30～60℃）、正己烷、硫酸1.为了确保石油醚(正己烷)的纯度满足农药残留分析的要求，需预先对市售的溶剂按下法检验。取100mL石油醚（正己烷），以旋转蒸发器浓缩至1mL。取5μL，在准备应用的色谱条件下，注入气相色谱仪内，在色谱图上于2～60min内，不应有高于三倍噪音的杂质峰。2.达到检验要求的溶剂，可以直接使用。对达不到要求的石油醚（正己烷），可按以下方法进行重蒸馏处理：取1000mL石油醚（正己烷），加4gNaOH(A.R)，于水浴上回流2小时，再经全玻璃系统蒸馏器蒸馏。收集其标程范围内的馏出部分。注意事项：（1）石油醚（沸程30～60℃）、正己烷均至少为分析纯（AR）级；硫酸为优级纯(GR)级（二）测定用水注意事项：（1）测定用水为去离子水或同等级别的水。（三）有机氯标准溶液1.标准储备液：低温保存。使用时提前1～2小时取出并在室温下放置以使其浓度平衡。2.标准使用液：以正己烷稀释并定容。低温保存。（四）其它所需试剂：遵循GB/T5009.19-2008的相关要求。四、仪器（一）气相色谱仪：具电子捕获检测器（ECD）。（二）玻璃器皿的清洗与存放可用丙酮冲洗（涮）两次，然后在肥皂水里浸泡；也可用洗液冲泡。取出器皿并用水彻底冲洗，然后依次用蒸馏水、丙酮冲洗。倒置移液管和容量瓶在一个搁物架上晾干，将玻璃器皿储藏在防尘柜内。-6-注意事项：1.尽可能避免接触卤代烃类溶剂或使用卤代烃类溶剂洗涤。2.玻璃器皿使用前，用将要用到的溶剂冲洗。（三）振荡器：平转式（四）其它所需仪器：遵循GB/T5009.19-2008的相关要求。五、分析步骤及要点（一）试样处理1.粉碎试样细度：样品经粉碎机（如：JFSD-100型）粉碎（须95%以上通过20目筛），合并筛上、筛下部分，混匀后供分析。注意事项：①稻谷：砻谷机脱壳，未脱壳的稻谷以手工剥壳。分取净糙米粉碎后测定。②为避免不同样品间的交叉污染，可先取20g左右待粉碎试样进行预粉碎，清理粉碎机并弃除该部分粉碎的试样，再对剩余样品进行粉碎并收集后待测定。③通过筛网选择，样品应经一次粉碎即达到粉碎细度要求。④粉碎的试样应进行细度检验，细度合格时将检验筛的筛上和筛下物合并。2.提取称取2.00g粉碎并混匀的试样于100mL具塞三角瓶中，加入20mL石油醚，振荡提取0.5h，过滤后浓缩。注意事项：①样品混匀：称样前将样品充分混匀。②振荡提取：使用平转式振荡器，振荡速度以100转/分钟为宜。③过滤：以快速定性滤纸过滤。过滤完毕后以约10mL石油醚分次洗涤漏斗和滤纸，合并所有滤液。④减压浓缩：为减少后续转移操作的损失，浓缩瓶一般选用50mL体积。在浓缩过程中，注意避免残留农药损失和样品二次污染问题。样品溶液所接触的水浴温度以不超过40℃为宜。样品溶液不能蒸干，否则会导致回收率降低。⑤定容：定容体积视检测器类型和灵敏度可灵活控制，定容容器选用玻璃质具塞刻度离心管，定容至5mL，浓缩液转移时对浓缩瓶的洗涤应遵循“少量多次”原则。3.净化：在定容后的样品溶液中按比例（石油醚：硫酸体积比为10:1）缓慢滴加浓硫酸进行磺化去杂处理，振摇0.5min后以3000转/min离心15min，取上层石油醚层供进样分析。注意事项：（1）石油醚：硫酸体积比为10:1，操作中根据样品定容体积注意控制。（2）浓硫酸加入后有发热现象，振摇初期可适时打开离心管塞进行放气处理。（3）离心后的样品溶液不能及时进行测定时，应在密闭和低温条件下存放以减少石油醚挥发。（