固定化酵母细胞发酵啤酒实验与酸奶制作(1)

固定化酵母细胞发酵啤酒实验与酸奶制作陈金春，林琳，雷明光,陈晶瑜,郑重,孙珊,荣知立清华大学微生物实验室,[e-mail]微生物学实验实验目的•了解固定化细胞技术的方法和意义;•了解酵母发酵产生啤酒的过程;•了解基本微生物实验操作技术;•学习酸奶制作方法;•了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的差别.实验原理•固定化技术–将生物酶或细胞固定在一定的基质上,从而提供酶或细胞的利用效率;–固定化研究开始于50年代,现在已经广泛应用在近代工业微生物技术上;实验原理•固定化技术生产啤酒–固定化细胞能重复使用;–发酵后菌体与发酵液易于分离;–后处理工艺简单,成本低;–可连续发酵,过程自动化;•传统发酵法–酵母细胞发酵一次即弃去菌体;实验原理•包埋法–固定化技术的一种;–将微生物细胞均匀的包埋在水不溶性载体的紧密结构中,细胞不易漏出;–制定固定化细胞时,细胞和载体不起任何反应,细胞处于最佳生理状态;–固定化细胞有载体为屏障,可避免外界不利因素的影响;实验仪器,材料和用具•实验材料:–啤酒酵母;•发酵培养基:–150ml麦芽汁(8%~10%)/250ml三角瓶;•实验试剂:–2.5%海藻酸钠溶液5ml,灭菌;–1.5%CaCl250ml,灭菌;–0.9%无菌生理盐水,50ml;实验仪器,材料和用具•实验用具:–无菌滴管;–无菌玻璃棒;–无菌封口膜封好的100ml三角瓶;实验步骤•菌体培养–将培养24h的新鲜斜面菌种,接种于三角瓶中培养;•细胞固定化–在海藻酸钠溶液中,加入2ml预热至35oC的酵母培养液,混合均匀,以无菌滴管缓慢而稳定的加入CaCl2溶液,边滴加边搅拌,即可得到直径约3mm左右的凝胶珠;钙化30min;实验步骤•固定化细胞发酵啤酒–在无菌玻璃棒帮助下倒掉CaCl2溶液,倒生理盐水于制得的固定化好的酵母细胞的瓶子中,洗一次凝胶珠,将100mL发酵培养基（麦芽汁）倒入制得的固定化小球的瓶子中,28℃培养24小时;•品尝啤酒（若发酸或其他异味，Nodrinking)酸奶DIY相信吗？探究酸奶的历史，竟然可以追溯到2500年前！早在远古时代，就已经指出酸奶产品的神奇之处，在古老的传说里，酸奶在回教国家被称为“先知的饮料”，而在法国，则被称为“长寿牛奶”，原因都只有一个——他们的先人因为长期食用含酸奶的食物，因此得享高寿。同此而知，酸奶对人体健康的确有益.新鲜酸奶里含有大量的乳酸菌（每ml含40亿活菌以上），可以使肠胃中的有益菌增加，抑制害菌成长，降低毒素产生的机会，有利于改善便秘现象，因此能强化肠胃消化吸收功能。健康的酸奶今天你喝酸奶了吗？酸奶的材料酸奶的制作酸奶的功效酸奶的材料乳品乳酸菌粉糖类今天你喝酸奶了吗？酸奶的材料酸奶的制作酸奶的功效酸奶的制作•使用焖烧锅来制作酸奶•使用电饭锅来制作酸奶•使用酸奶发酵器来制作酸奶•使用保温杯（瓶）来制作酸奶•使用重复接菌发酵法来制作酸奶•……•我们的酸奶DIY使用焖烧锅来制作酸奶酸奶的制作•使用焖烧锅来制作酸奶•使用电饭锅来制作酸奶•使用酸奶发酵器来制作酸奶•使用保温杯（瓶）来制作酸奶•使用重复接菌发酵法来制作酸奶•……•我们的酸奶DIY使用电饭锅来制作酸奶酸奶的制作•使用焖烧锅来制作酸奶•使用电饭锅来制作酸奶•使用酸奶发酵器来制作酸奶•使用保温杯（瓶）来制作酸奶•使用重复接菌发酵法来制作酸奶•……•我们的酸奶DIY使用酸奶发酵器来制作酸奶酸奶的制作•使用焖烧锅来制作酸奶•使用电饭锅来制作酸奶•使用酸奶发酵器来制作酸奶•使用保温杯（瓶）来制作酸奶•使用重复接菌发酵法来制作酸奶•……•我们的酸奶DIY我们的酸奶DIY取500克鲜奶煮沸消毒，加白糖30克搅拌，让其自然冷却（冷却中最好能搅拌2—3次，以免乳脂结皮），分装到三角瓶中。冷至40℃（不烫手）时，取市面上销售的酸奶一勺（约60克）掺入鲜奶中，摇匀。用洁净的封口膜将三角瓶口盖住，42℃进行发酵培养6-8小时。置于冰箱或冰水中数小时，待冷却老熟后便成酸奶。今天你喝酸奶了吗？酸奶的材料酸奶的制作酸奶的功效酸奶的功效•乳酸使乳蛋白更加细腻滑润、利于人体消化吸收，并能刺激胃肠蠕动，预防老年性便秘及提高人体对钙、磷、铁等的吸收利用。乳酸及酸奶中的其它有机酸还能有效地改善肠道菌群，抑制病原菌繁殖。•酸奶还具有降血压、降胆固醇、增强心脏功能等作用。•最新研究结果还表明，酸牛奶能预防老年性骨质疏松和乳腺炎，阻碍铅吸收，减轻化疗副作用，治疗因胃酸缺乏引起的肠胃炎、贫血、夜盲症及小儿腹泻等，提高人体的免疫功能。•酸奶护肤，制作成乳酸活菌面膜及乳酸活菌精华露；酸奶护发•……饮用酸奶的注意事项饮用时要适可而止，饮用过多易导致胃酸过高，影响胃肠道粘膜消化酶的正常分泌，引起食欲不振及人体电解质平衡失调。酸奶不宜蒸煮或空腹饮用，因为高温加热或空腹时高浓度的胃液都将杀死酸奶中的活性乳酸菌，降低酸奶的保健作用及营养价值。酸奶也不宜与氯霉素、红霉素等磺胺类药物抗生素或者治疗腹泻的收敛剂次碳酸、鞣酸蛋等药物同时服用，因为这不仅会降低药效，也会使酸奶中的营养成份遭到破坏，有时还会产生一些副作用。吃完酸奶后还应及时漱口或刷牙，因为酸奶中乳酸菌可使口腔内残留的蔗糖、淀粉发酵产生乳酸，使牙组织内的无机盐逐渐溶解而脱钙，进而发生牙本质过敏、龋齿等疾病。不要给婴儿喂食。结果与讨论•你酿制的啤酒和酸奶风味如何?•谈谈固定化细胞技术的意义;•纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的差别?•谈谈你对微生物实验的理解和感想.谢谢大家!