目录一、培训目的……………………………………………………………………1二、培训准备……………………………………………………………………11.仪器准备12.溶剂准备1三、方法建立……………………………………………………………………11.开机准备…………………………………………………………………………………22.数据采集方法编辑……………………………………………………………………8G1310A(单元泵)…………………………………………………………………………8G1312X(二元泵)/G1311X(四元泵)………………………………………………………9G1313A(标准型自动进样器),G1329B(自动控温自动进样器)………………………10G1367E(高性能自动进样器)……………………………………………………………11G1328A(手动进样器)……………………………………………………………………13G1316A/C(柱温箱)………………………………………………………………………14G1314BC/E/F(可变波长紫外检测器)……………………………………………………14G1315C/D,G4212A/B(二极管阵列检测器)/G1365C/D(多波长紫外检测器)………………………………………………………………16G1362A(示差检测器)……………………………………………………………………17G1321A(荧光检测器)……………………………………………………………………18G4218A(蒸发光散射检测器)……………………………………………………………203.数据分析方法编辑……………………………………………………………………21谱图优化…………………………………………………………………………………21积分参数优化……………………………………………………………………………22校正………………………………………………………………………………………24打印报告…………………………………………………………………………………26光谱………………………………………………………………………………………264.建立全新完整方法向导……………………………………………………………285.进样………………………………………………………………………………………29单针进样…………………………………………………………………………………29序列进样…………………………………………………………………………………29四、关机…………………………………………………………………………311.关闭检测器的灯………………………………………………………………………312.冲洗系统………………………………………………………………………………313.封存色谱柱……………………………………………………………………………314.关闭电脑………………………………………………………………………………315.关闭模块………………………………………………………………………………31五、RRLC(快速液相)注意事项………………………………………………32六、特殊检测器的注意事项…………………………………………………34七、Agilent1260常见问题解决方法…………………………………………35附一、维护知识…………………………………………………………………37附二、注册OpenLABCDS许可证的流程……………………………………39前言尊敬的安捷伦化学分析仪器用户:感谢您选购了安捷伦公司的化学分析仪器。成为安捷伦公司的用户就意味着您将享受到高质量的售后服务。为了帮助您迅速掌握所购仪器的使用方法,使其在您的生产及科研中发挥最大的效用,安捷伦公司在工程师安装调试之后将提供现场培训,此教材就是工程师现场培训时使用的培训教材。通过此次培训,能使您了解化学分析仪器的基本操作步骤和基本的分析过程,使您能够进行简单的操作。此外,我公司还特别设立了专业的培训中心来为您提供多种相关培训课程。在培训中心,您可以系统地学习相关仪器及相关工作站的操作。培训中心的授课人员均是受过专业培训的技术人员,或是来自各科研院所的资深工程技术人员,他们会尽其所能帮助您更深入地了解仪器性能,掌握分析方法。有问题请致电:800-820-3278或访问安捷伦LSCA售后服务网站安捷伦科技(中国)有限公司生命科学与化学分析事业部****注意:本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用,内容为工作站现场培训的一般要求,请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相应的培训内容增删。安捷伦公司对本教材可能存在的错误及其后果不承担任何法律责任,我们适时推出新版本的培训教材,恕不另行通知。Agilent1260-LC培训目的•基本了解1260LC硬件操作。•掌握化学工作站的开机,关机,参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。培训准备1.仪器准备:Agilent1260•G1310B(单元泵);G1312A/B,G1312CVL(二元泵);G1311B,G1311CVL(四元泵)•G1313A(标准型自动进样器);G1329B(自动控温自动进样器);G1367E(高性能自动进样器);G4226A(1290ALS,1200bar,20uL,可用在1260上)•G1328C(手动进样器)•G1330A,G1330B(自动进样器恒温模块)•G1316A,G1316C(柱温箱)•G1314B/C(VL),G1314E/F(可变波长紫外检测器)•G1315C,G1315DVL;G4121A/B(二极管阵列检测器)•G1365C,G1365VL(多波长紫外检测器)•G1362A(示差检测器)•G1321A(荧光检测器)•G4218A(蒸发光散射检测器)•色谱柱:ZorbaxEclipseXDB-C18150x4.6mm,5umcolumn(P/N993967-902/5063-6600)或相似填料的色谱柱2.溶剂准备:•色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。•二次蒸馏水方法建立Agilent方法建立包括:数据采集方法(仪器设置方法)以及数据分析方法(积分方法、校正方法等)两部分,下面分述这两部分的方法建立以及序列模板建立。-1-Agilent1260-LC1.开机准备:•启动计算机:打开计算机电源,登陆windows操作系统•启动工作站:打开Agilent1260各模块电源。待Agilent1260各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色),点击屏幕左下角“开始”,选择“所有程序(P)”,选择“AgilentTechnologies”选择“OpenLAB”,选择OpenLABControl,或单击桌面图标,则会进入到下面的界面:下面步骤如果已经配置过,则不需要操作通过点击菜单左上方的,可以分别创建位置和仪器,得到如下的界面-2-Agilent1260-LC输入相关信息,注意仪器类型一栏要选择AgilentLCSystem,输入完后点击确定。出现如下界面选定刚刚创建的仪器名称,点击“配置仪器”,-3-Agilent1260-LC选择“配置模块”,注意不要选择“使用经典驱动程序”。如果仪器中包括DAD、FLD,则需要选择“3D光谱评估”。点击确定选择“是”,来配置仪器选择IP地址,输入仪器IP,默认地址为192.168.254.11。点击确定系统会根据指定的IP地址来找到所配置的模块及其相关信息,点击确定。-4-Agilent1260-LC再次点击确定,使配置生效点击“启动”或者“离线启动”来打开在线或离线工作站,也可点击“创建快捷方式”来生成。这样就不必每次使用都打开OpenLAB控制面板了。◆开启工作站:工作站打开,点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。打开仪器控制视图:选择“视图-系统视图”,即可显示仪器控制视图,选择“视图-样品视图”,即可显示样品信息视图-5-Agilent1260-LC模块右上角状态灯颜色说明:无色,未开电源或者模块准备就绪黄色,模块未准备就绪绿色,正在进样分析红色,模块出错所有模块红色,仪器有漏液工作站图形颜色说明:绿色,模块准备就绪黄色,模块未准备就绪蓝色,正在进样分析红色,出错或者不能联机灰色,此模块没启用◆可将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏,系统会自动显示未就绪或出错的原因◆配置流动相:将流动相装入溶剂瓶中。设置溶剂瓶参数,在溶剂瓶图形上单击鼠标左键,出现图形如下,点击“溶剂瓶填充-6-Agilent1260-LC量”设置溶剂瓶中流动相实际体积,也可设定低体积关泵◆冲洗流动相管路:反时针旋开泵模块上的溶液排空阀。右键单击泵视图的空白处,选择“方法”,设置“流速”为5ml/min。对于G1311X(四元泵)分别将A,B,C,D四个通道设置“溶剂”为100%(点击中各个通道后面的方框,即可开启“%”设置框,输入需要设置的数值百分比后,单击右侧的空白框,A相即可自动配置为100%-(%B+%C+%D)的百分比),冲洗;对于G1312X(二元泵),冲洗A、B两个通道;对于G1310X(单元泵),冲洗一个通道即可◆开启模块:鼠标右键点击每个模块的空白处都会弹出提示框,选择“控制”即可在新的窗口中选择打开或者关闭各个模块。也可在仪器视图中选“打开”◆监视基线:点击“视图-在线信号”打开“在线图谱”点击“改变”按钮,选择“可选信号”中需要监视的信号,“添加”到“选定信号中”。调整“窗口”中“X周范围”,如需要画“0”点基线,请选择“画零线”。调整Y轴“Y轴范围”与“偏移量”或者选择“Y轴自动调整”来选择合适的监视图形◆平衡色谱柱、进样分析:关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min),监视压力和信号基线等待平稳后,可以进样采集分析-7-Agilent1260-LC2.数据采集方法编辑:◆G1310A(单元泵):■设置泵右键点击泵模块视图空白处,选择“方法”或者点击进入泵的参数设置界面流速---设置泵的流速,在“压力限-上限”200时,流速设置范围为:0~5.00ml/min;在“压力限-上限”=200时,流速设置范围为:0~10.00ml/min停止时间---设置泵停止分析的时间,时间范围为:0.0~99999.00min或“无限制”后运行时间---泵在后运行时间保持后运行状态,从而延迟下一个分析的开始。在溶剂成分改变后(例如,在梯度洗脱后),可以使用“后运行时间”是色谱柱达到平衡,时间范围为:0.0~99999.00min或“无限制”压力限---“上/下限”是最大/小压力限制,达到“上限”或者“下限”值时,泵将自动关闭,从而防止分析系统压力超限时间表---通过在“时间”字段中输入时间并在时间表的以下字段中输入适当的值,可以使用时间表对分析过程中参数进行设置。泵时间表中的值随时间从初始值到时间表中定义的时间所对应的值发生线性变化(例如,流速和压力最大限值)-8-Agilent1260-LC■控制右键点击泵模块视图空白处,选择“控制”进入泵的控制界面泵---控制泵的“启动”,“关闭”或者“待机”状态泵密封垫清洗组件(选配)---控制泵密封垫清洗蠕动泵的开关以及定期开关的程序◆G1312X(二元泵)/G1311X(四元泵):泵参数设置与控制请参考G1310X(单元泵)方法,下面介绍G1312X(二元泵)/G1311X(四元泵)参数设置不同之处■G1312X(二元泵)-9-Agilent1260-LC溶剂---溶剂B的百分比可以设置为0到100%之间的任何值。“溶剂A”通常输送剩余的量:100%-%B时间表---“溶剂B”为非“关闭”状态时,“时间表”的参数“%B”为黑色可以编辑,否则为灰色不可编辑状态。此处可选择改变的参数包括流动相比例、流速、压力最大限值。若配有溶剂切换阀,则需设定A1&A2和B1&B2的切换流量、比例和时间■G1312B(二元泵)可在泵的条件设置中,输入所用流动相的种类,并通过