孕酮放射免疫分析药盒说明书

孕酮放射免疫分析药盒说明书【药品名称】通用名：碘[125I]-孕酮放射免疫分析药盒汉语拼音：Dian[125I]YuntongFangshemianyifenxiYaohe英文名:Iodine[125I]-ProgesteroneRadioimmunoassayKit简称：碘[125I]孕酮放免药盒【使用目的】用于定量测定人血清（或血浆）中孕酮（PROG）的浓度。【用途】孕酮是一种含21碳原子的重要雌性激素，主要由卵巢，肾上腺和妊娠时胎盘产生。孕酮在血液循环中代谢很快,半衰期为5分钟,产物为孕二醇,孕二醇在肝脏内与葡萄糖醛酸结合成水溶性的葡萄糖醛酸孕二醇,经肾脏排出，其生理作用是保证受精卵着床和维持妊娠。临床上孕酮的测定主要用于确定排卵，孕激素治疗监测和早期妊娠状态的评价以及在判断黄体功能状态方面等具有重要意义。本品采用了第二抗体＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理：含孕酮（PROG）的样品和125I标记的孕酮衍生物与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及PEG，使免疫复合物沉淀，离心，测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中孕酮（PROG）的浓度。【试剂主要组成成分】PROG标准品：一套共7瓶，以不含PROG的人血清为基质，用时轻轻摇匀，需冷存。PROG标准品浓度质控血清：两瓶，0.5ml／瓶浓度为：L：3.54±0.8ng/mlH：20.7±5.4ng/ml抗PROG抗体：一瓶，绿色溶液，2～8℃冷存。125I-PROG：一瓶，88.23kBq/瓶，红色溶液，2～8℃冷存。分离剂：一瓶，蓝色溶液，充分摇匀后使用，2～8℃冷存。【仪器】γ－计数器低温离心机恒温水浴箱【样本收集和保存】220微升人血清样本。采静脉血5ml于塑料试管中，静置使其凝固后，1500转／分离心，取其上清液，放置玻璃瓶中。如果样本不立即使用，可在-18℃~-25℃储存6个月。严重溶血、高浓度的脂类、胆红素对测定结果有影响。【使用前准备】试验前，恢复样本至室温，小心摇匀血清样本。ABCDEFG（单位）00.31.13.5102080ng/mL【实验方法】1、将实验所需试剂及样本放置室温，平衡至少30分钟以上才可进行操作；2、取60X12mm聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复；3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本100µl加入相应编号的试管中；4、每管均各加入200µl标记物工作液；5、除去T、NSB管以外的每管均各加入200µl抗体工作液，充分混匀；6、37℃温育1.0小时；7、每管均各加入1000µl分离剂后，充分混匀；8、室温放置5~10分钟后，离心3500转／分，20分钟后，吸去或倾倒掉上清液；9、用γ-计数器测定各管计数CPM.推荐检测时间:1分钟10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。【操作流程】NSB标准品(Standards)质控&样品TA（B0）BCDEFGQC…1.2….标准品A100100标准品B－G100100100100100100质控&样品100100100125I-T标记物抗T血清混匀，置37℃水浴温育1.0小时(VortexandIncubate1.5hourat37℃)分离剂1000摇匀，室温放置5～10分钟，3500转／分，离心20分钟（温度低于25℃）Vortex,,Centrifugefor20minutesat3,500RPM（Below25℃）吸去上清液AspiratetheSupernateofthetubes沉淀物计数1分钟Countfor1minute【实验过程中应注意】1、γ-计数器本底计数应≤100CPM/分，效率应≥75％；2、加入放射性标记物时，应做好防护、小心谨慎，以避免造成放射性污染；3、如果某一个样本的测定值高于最高浓度的标准品浓度，用零标准品以1：2或1：4的比例稀释样本后重新测试，测试结果乘以相应的稀释倍数。【质量控制】每次实验操作应至少采用两个浓度的质控血清进行质量控制，以确保每次实验测定结果的可靠性。1、质控血清的平均值应在允许范围内；2、曲线方程应采用最佳拟合方式；3、重复样本的测定结果相差在15％以内。如不能同时满足以上条件，则此次试验结果无效，全部试验需重新进行。【测定结果的计算】计算标准品（B~G）、质控品和样品与标准品A的比值（B/B0)200200B/B0×100=标准或样品(STDorSamples)(CPM)—NSB(CPM)A标准(STD)(CPM)—NSB(CPM)×100剂量-反应曲线按“对数剂量-结合率对数”（Log(dose-Log(B/B0))数学模型或四参数数学模型拟合，通过每个标准品的B/B0和其浓度建立标准曲线；从标准曲线上查出样本的浓度值，样本的浓度应在标准曲线之内。【实验的局限性】本品仅供体外诊断使用，只能用于人血清或血浆样本的测定而不能用于其他体液样本；通过其它方法得到的PROG值与本品测定结果不具有直接的可比性；【产品性能指标】灵敏度：取药盒中校准试剂A点（0剂量）作20平行管，求其均值X及偏差SD，从剂量—反应曲线上查出与X-2SD相对应的剂量值，确定为本药盒的灵敏度（最小检出值），为0.05ng/ml。精密度：精密度是质量控制的基本参数，用批内变异系数和批间变异系数确定。要求批内变异系数10%，批间变异系数15%。批内变异系数:指不同浓度的三个样品C1、C2、C3同时分别进行多个复管一次测定中的重复性，应小于10%。C1C2C3批内变异系数7.85%6.15%4.37%批内变异系数均小于10%。批间变异系数:指不同浓度的三个样品C1、C2、C3在多次测定间的重复性，应小于15%。C1C2C3批间变异系数11.32%9.45%6.56%批间变异系数均小于15%。测定范围：采用零标准品添加高浓度的PROG,确定本试剂盒的测定范围为0～80ng/ml【正常参考值】女性：卵泡期,(2-10天)0-1.2ng/mL黄体期,（19－24天）1.2-30ng/mL妊娠期,30-300ng/mL男性＜1.0ng/ml建议各实验室应建立本实验室的正常值，以上数据仅供参考。【规格】50人份／盒、100人份／盒【储藏】冷冻组份-20℃,冷藏组份2～8℃。【有效期】1个月【使用范围】仅供体外诊断使用【批准文号】国药准字S10950202【生产企业】天津市协和医药科技有限公司【地址】天津市南开区白堤路238号【电话】80081801000228789188002287893072