实训项目一中药鉴定技术【实训目的】通过实训使学生明确中

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实训项目一中药鉴定技术【实训目的】通过实训使学生明确中药鉴别的意义、依据、内容、方法;掌握中药真伪鉴别、纯度检查和品质优良度评价的综合技能;培养学生融会贯通、独立分析解决中药真伪优劣鉴别问题的能力。【实训意义】当前,国内中药材市场不慎规范,市场上伪劣产品经常碰到,设计此实训项目的目的在于让学生掌握中药材鉴别技术,做到更好的选择和应用中药,确保临床安全有效用药。【实训设计】利用药圃常见中药的药用植物,进行中药基源鉴定实训;利用中药蜡叶标本室、饮片标本室、浸渍标本室标本进行中药性状鉴定实训;在实验室开展中药显微和理化鉴定。选择典型的、常见的药用植物分类特征、性状特征进行基源和性状鉴别,选择显微鉴别和理化鉴别中应用最为广泛的透化片制作、显色反应、微量升华、荧光法和薄层色谱法进行实训示教;学生在教师指导下进行实训锻炼和辨识;根据实训过程,进行总结讨论。【实训内容】常见中药的基源、性状、显微和理化鉴别。【实训组织】(一)班级进行分组,每个实训小组3名学生;(二)每4个实训小组由一名专业教师或实训教师(兼职教师)进行指导。【实训准备】(一)实训材料开放药圃、中药蜡叶标本室、饮片标本室、浸渍标本室(二)实训器材中药标本各类鉴定器具及仪器设备。【过程步骤】(一)教师讲解中药鉴定的意义、依据和方法。(二)教师示范中药鉴定中过程。(三)学生在教师指导下在进行中药四大鉴定实训。(四)总结实训过程,分析讨论。【关键技术】(一)中药鉴定依据《中国兽药典》、《中国药典》的使用;(二)中药基源鉴定中植物分类的主要方法;(三)中药性状鉴定的内容和方法;(四)中药显微鉴定的内容和显微制片方法;(五)中药理化鉴定的分类和常用理化鉴定方法的规范操作。【考核方式】现场进行中药鉴别实训锻炼;给出中药个例,让学生根据《中国药典》、《中国兽药典》的记载内容进行鉴定;考核学生操作的规范性和结果判定的准确性。【考核要点】(一)《中国兽药典》、《中国药典》的使用方法;(二)显微鉴定的制片方法,形状鉴定的方法步骤;(三)常用理化鉴定的操作规范化。【注意事项】进行中药真伪鉴别、纯度判定、品质优良度评价必须严格按照药品标准的规定进行【问题讨论】(一)中药显微鉴别适合于哪些药物?透化片、清装片、解离片、表面制片等显微制片方法如何选择?(二)理化鉴别中薄层色谱法的原理和操作步骤和注意事项是什么?附:相关理论第一中药材检定通则药材的检定包括“性状、鉴别、检查、浸出物测定、含量测定等项目,检定时应注意以下有关的各项规定:一、取样应按“药材取样法”的规定进行。二、为了正确检定药材,必要时可用符合药典规定的相应药材的标本做对照。三、供检定的药材如已切碎,除“性状”项已不完全相同外,其他各项应符合规定。四、“性状”系指药材的形状、大小、色泽、表面特征、质地、断面(包括折断面和切断面)特征及气味等。1.形状是指干燥药材的形态。观察是一般不需处理,如观察很皱缩的全草、叶或花类,可先浸湿使变软,展平。观察某些果实、种子时,如有必要可浸软后,取下果皮或种皮,以观察内部特征。2.大小之药材的长短、粗细(直径)和厚度。一般应测量较多的供试品,可允许有少量高于或低于规定的数值。测量时可用毫米刻度尺。对细小的种子,可放在有毫米方格的纸上,每10粒种子紧密排列以行,测量后求平均值。3.药材的色泽,一般应在日光下观察。如用两种颜色符合描述色泽时,以后一种色调为主。例如黄棕色,即以棕色为主。4.观察表面特征、质地和断面时,供试品一般不做预处理。如折断面易观察到纹理,可削平后进行观察。5.检查气味时,可直接嗅闻,或在折断、破碎或揉搓是进行。必要时可用热水浸润后检查。6.检查味感时,可取少量直接口尝,或加开水浸泡后尝浸出液。有毒的药材如需尝味时,应注意防止中毒。五、“鉴别”系指捡定药材真实性的方法,包括经验鉴别、显微鉴别和理化鉴别。1.经验鉴别系指用简便易行的传统方法观察颜色变化、沉浮情况以及爆鸣、色焰等特征。2.显微鉴别系指用化学或物理的方法,对药材中所含某些化学成分进行的鉴别试验。1)、如用荧光法鉴别,将药材(包括断面、浸出物)或经酸、碱处理后,置紫外灯下约10厘米处观察所产生的荧光。除另有规定外,紫外光灯的波长为365纳米。2)、如用微量升华法鉴别,取金属片,置具有直径约2厘米圆孔的石棉板上,金属片上放一高约8毫米的金属圈,对准石棉板的圆孔,圈内放置一薄层药材粉末,圈上覆盖载玻片,在石棉板圆孔下用酒精灯缓缓加热,至粉末开始变焦,去火待冷,载玻片上有升华物凝集。将载玻片翻转后,置显微镜下观察结晶形状、色泽,或取升华物加试液观察反应。六、检查系指对药材的纯度进行测定的方法,包括水分、灰分、杂质等检查。七、浸出物测定系指用水或其它适宜的溶剂对药材中可溶性物质进行测定的方法,包括水溶物、醇溶物、醚溶物等。八、含量测定系指用化学的、物理的或生物的方法,对药材质量进行检定的方法,包括挥发油及主成分的含量、生物效价测定等。第二中药显微鉴定中药的显微鉴别又称微观鉴别法,主要是利用显微镜(生物显微镜、偏光显微镜、扫描电镜等)观察植(动)物中药的组织切片、粉末、解离组织或表面制片中的微观特征以鉴定真品、类似品或代用品的一种方法。通过观察和比较中药的内部组织构造以及细胞的形状、大小和排列状况、细胞壁和细胞内含物的性质、各种晶体及其分布,可以准确地鉴别中药。显微鉴别法通常应用于单凭性状不易识别的中药,性状相似不易区别的多来源中药,破碎中药,粉末中药以及用粉末中药制成的丸、散、片、丹等中成药和蜜源的鉴定。鉴别时选择有代表性的样品,根据鉴定的目的,制成合适的标本片进行观察,并绘制成图。显微鉴定是一门专门技术,需要有植物解剖、植物显微化学的基本知识和显微标本片的制作技术。一、标本片制作:用徒手、滑走或石蜡切片法制作横切片、纵切片、表面片、解离组织片、粉末片。(一)横切片或纵切片观察:植物性中药,如根、根茎、藤茎、皮、叶、果实、种子、木类中药一般制成横切面。必要时亦作纵切片;木类中药需作横切、径向纵切和切向纵切三个切面。观察时应自外向内仔细观察各组织分布的位置,细胞的特点,细胞内含物的类型及分布情况。(二)表面片观察:叶、花萼、花冠、果皮、种皮制作表面片,以观察各部位的表面(皮)特征。观察时应注意表皮细胞的形状,垂周壁的弯曲程度及增厚情况,外平周壁有无角质层或突出,毛茸的种类、形状及密度,气孔轴式的类型及气孔的密度等。(三)粉末片观察:粉末性中药以及由粉末中药制成的中成药。进行粉末制片观察时,应按上、下、左、右顺序仔细观察,辨别特征。(四)解离组织片观察:可按不同部位(如皮部、木质部、髓等)分别制作解离组织片,以确定某些细胞组织的存在部位及细胞的完整形状与大小等。(五)显微化学法观察:利用适当的化学试剂进行显微化学反应,确定细胞壁的性质和细胞内含物的种类。1.细胞壁性质的鉴别:(1)纤维素细胞壁:为薄壁细胞或筛管等,加氯化锌碘液反应显蓝色;(2)木质化细胞壁:多为纤维、石细胞,导管、管胞,木薄壁细胞等,加间苯三酚-盐酸(或浓硫酸)反应显红色或紫红色。(3)角质化、木栓化细胞壁:多存在植物的体表,加苏丹Ⅲ(或紫草)染色反应显红色。(4)粘液化细胞壁:多存在表皮组织内,加钌红试液呈红色。(5)硅质化细胞壁:多存在于表皮组织内,加硫酸无反应。2.细胞内含物性质的鉴别:包括淀粉粒、糊粉粒、菊糖、草酸钙结晶、碳酸钙结晶、脂肪油、挥发油、树脂等。(1)淀粉粒:碘反应显蓝色。(2)糊粉粒:米隆试剂等蛋白质反应阳性。(3)菊糖:α-萘酚—浓硫酸反应显紫色并溶解。(4)草酸钙结晶:稀醋酸不溶,溶于稀盐酸但无气泡产生;溶于20%硫酸并析出针状结晶。(5)碳酸钙结晶:溶于稀醋酸或稀盐酸,均产生气泡;溶于20%硫酸并析出针状结晶。(6)脂肪油、挥发油和树脂:苏丹Ⅲ(或紫草)染色反应显红色、桔红色。(7)硅质:加硫酸不溶解,加氢氟酸则溶解,使用时,注意保护物镜。二、标本片的处理、封藏与观察:1.加适当试剂封藏直接观察:细胞内含物的观察:淀粉粒一般用甘油醋酸试液或蒸馏水装片观察其形状、脐点、层纹,测量其大小,并利用偏光显微镜观察未糊化淀粉粒的偏光现象;糊粉粒用稀甘油装片观察其形状、测量大小。菊糖用水合氯醛液装片不加热立即观察。2.透化后观察:为了使中药组织切片或粉末的细胞、组织能观察清楚,需用水合氯醛液装片加热透化,以使收缩的细胞壁恢复原状并溶解除去细胞中含有的色素、油脂、多糖等物质与气泡。三、由粉末中药制成的中成药的鉴定中成药,是指以中药材为原料,在中医药理论指导下,按规定处方或标准制成一定剂型的现成药物。对于以中药粉末或部分中药粉末组成的丸、散、锭、丹、胶及片剂等,可以根据组成中药的细胞、组织、内含物或其它特征,应用显微鉴别方法予以鉴别;中成药显微鉴别法是一种常规的、专属性较强、快速、简便、准确的方法。中成药显微鉴别的制片,一般与单个粉末中药相同,即用甘油醋酸试液或蒸馏水装片观察淀粉粒;用水合氯醛液装片不加热观察菊糖,加热透化后观察细胞、组织特征。制片时,取样方法:如为散剂,可用刀尖或牙签挑取少量粉末;如为蜜丸,可将药丸切开,从切面中央挑取少量装片,或将蜜丸切碎,加水搅拌,离心,倾去水液,如此反复数次以洗净蜜糖,取沉淀装片;如为水泛丸或片、锭,可刮取全切面取样,或用乳钵将整个丸、片研碎取样;如为以朱砂包衣的丸、丹,也可将丸衣和丸心分别装片观察。不论采用什么方法取样,均需注意取样的代表性,并应观察足够数量的标本片(一般不少于5片)。第三中药性状鉴别一、概述性状鉴别:又称宏观鉴别法或经验鉴别法,主要是利用人体的感觉器官,通过看、摸、嗅、尝等方法,去观察完整的中药及饮片的形状、大小、色泽、表面特征、质地、折断现象、断面特征以及气、味等去鉴定中药的真伪。每种中药在性状上均有其特别之处,或观其形,或辨其色,或尝其味,或闻其气,或感其质,对于动物类、矿物类和树脂类等生中药还常利用火烧、水试等方法鉴别其真伪。此外,由于生中药气味的浓淡常与其所含化学成分的高低有关,故性状鉴别有时也能粗略地评价生中药的品质优劣。(1)“看”,就是观察中药的形状、大小、色泽、表面和断面特征等,并以一些简单的词语来形容。(2)“摸”,就是用手触摸生中药,以判断其质地及折断现象。(3)“嗅”,是直接嗅闻完整的生中药,或于剥碎、搓揉、折断时所能闻到的气感。(4)“尝”,是用舌尖接触生中药表面,或取少量入口咀嚼能感觉到的味感,包括甘、酸、苦、辣、咸、涩、淡7味。舌头的不同部位对不同味道的味感灵敏度是不同的,舌尖对甜的、舌根对苦的、两前侧对酸的、两后侧对咸的较为敏感,口尝时应注意让不同味感的药液充分与上述部位接触。二、鉴别内容:(1)形状:中药的形状一般较固定,如:人参、甘草和黄芪呈园柱形;黄芩和三七呈圆锥形;何首乌和麦冬呈纺锤形;半夏呈类球形;天南星呈扁球形;肉桂和厚朴卷筒状、黄柏、秦皮呈板状等。野山参具“芦长碗密枣核芋,紧皮细纹珍珠须”;党参具“狮子盘头”;味连形如“鸡爪”;海马可用“马头蛇尾瓦楞身”来描述。(2)大小:中药长短、粗细和厚薄等,与质量有关。(3)色泽:中药的形状一般较固定,且与质量有关。如:玄参、乌梅、紫草、黄连、青黛、白芷、金银花、黑白丑朱砂等。观察时最好在自然光下进行。中药的颜色通常是复合色调,如:甘草表面红棕色,红参表面棕红色,麦冬表面黄白色等,以后一种颜色为主。(4)表面特征:粗糙、光滑、皮孔、须根痕、支根痕、节、茎痕、狮子盘头、蚯蚓头、芦头、芦碗、瘤状突起、疣状突起、纵皱纹、沟、横纹等。如金毛狗脊表面密生金黄色毛茸;白头翁根头部密生白色的茸毛;羌活环节紧密似蚕;味连表面具“过桥杆”等。(5)质地:硬软、轻重、韧脆、折断难易情况等,与中药的组织结构和大小(直径、厚薄)有关。如:甘草质硬,可折断;黄芪、葛根和桑白皮质韧,不易折断;关木通、萝芙木和苦参质硬,不易折断;南沙参和香加皮质脆,易折断;当归、党参和麦冬柔润;茯苓体重沉于水底、猪苓体轻浮于水面等。(6)断面特征:(与组织结构有关)①折断面:用手折断药材时的现象和。常见的折断面现象有:平坦(人参、党参、牡丹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