工业药物分析 第5章 化学药物分析8-维生素类

第五类维生素类药物的分析维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的微量营养物质。人体不能合成维生素。VitA、D2、D3、E、K1等脂溶性水溶性VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺VitMVitPP-H维生素A醇-COCH3维生素A醋酸酯-COC15H31维生素A棕榈酸酯R:第一节维生素A的分析为一个具有共轭多烯侧链的环己烯（一）结构与性质一、具有UV吸收存在多种立体异构化合物VitA2VitA3易发生脱氢、脱水、聚合反应聚合反应鲸醇（二）性质1溶解性不溶于水易溶于有机溶剂和植物油等2不稳定性共轭多烯侧链易被氧化酸醛环氧化物、氧化剂紫外线、VitAVitAVitA]O[O2△或有金属离子存在时氧化↑环氧化物VitA醛VitA酸4与三氯化锑发生呈色反应紫红蓝色3SbClVitACHCl33紫外吸收特性325-328的范围有最大吸收（一）三氯化锑反应（Carr-price反应）条件：无水，无醇。紫红蓝色3SbClVitACHCl3鉴别二、-RCOOSbCl5+CH2蓝色逐渐变紫红+CH2-RCOOSbCl5方法取维生素A油溶液1d，加氯仿10ml，振摇溶解，取出两滴，加氯仿2ml，与25%三氯化梯氯仿液0.5ml反应，成兰色，渐成紫红。（BP（2000）VitAVitAHCl去水△无水乙醇λmax为326nm一个吸收峰UV法（二）λmax为350～390nm三个吸收峰去水VitA（VitA3）CH2↓VitA讨论维生素A有五个共扼双键，无水乙醇溶液在326nm处有最大吸收，盐酸催化加热脱水，成5个双键，故，波长红移，同时在350-390之间出现3个吸收峰。NSCH3CH2CH2OHNNH3CNH2CH2+氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)第二节维生素B1HClCl-（二）性质1溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性2硫色素反应：噻唑环在碱性介质中开环，在与嘧啶环环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光的硫色素。蓝色荧光硫色素正丁醇OOH3盐酸液的246nm波长处测定吸收度，吸收系数为421。UV共轭双键λmax=246nm4碱性嘧啶环——伯氨噻唑环——季铵1、可与酸成盐2、与生物碱沉淀剂沉淀。3、含量测定——非水碱量法荧光消失蓝色荧光硫色素正丁醇）（环合HCNFeKOHNaOHVitB6321]O[OH二、鉴别试验（一）硫色素反应，ChPCH2NNH3CNH2CH3NNaSC2H4OHONNH3CNH2HClNSCH3C2H4OHCH2NaOHNNH3CNNNaSCH3C2H4OH-H2O硫色素SCH3C2H4OHNNH3CNNH环合NNH3CNNSCH3C2H4OHH2＋2H方法取本品约5mg，加氢氧化钠与正丁醇2.5ml，强烈振摇。放置分层，上面醇层显强烈兰色荧光。加酸消失，再加碱又重现。专属性反应。二紫外光谱法维生素B1片的测定，取20片称定。严细。称取细粉适量，相当于25mg，置100ml量瓶中，取5ml，在定溶于100ml，246nm测。标准吸光系数421。注意所使用的溶剂。第三节维生素C654321OOHHOOCOHHCH2OHL－抗坏血酸（一）结构为L-抗坏血酸，在化学结构上和醣类似。有4种光学异构体，L右旋活性最强。具有二稀醇的结构，具有内酯环，具有两个手性碳（C4，C5），性质活泼。（二）性质1溶解性易溶于水水溶液呈酸性OOHHOOCOHHCH2OH1234562酸性C3－OH的酸性较强。pKa=4.17，C2－OH的酸性较弱pKa=11.57。故表现为一元酸的性质。能与碳酸氢钠成钠盐。O二烯醇结构二酮基结构3强还原性二烯醇结构的还原性极强。OHOHCCOOCCCH2OHOOOOCOHHCH2OHCHHOCHOHCOCOCOONaHH+OH-有活性有活性无活性OHOOCOHHCH2OHHO[O]OOHHOOCOHHCH2OH1234564光学活性L(+)－抗坏血酸活性最强手性C（C4、C5）**nmnmmaxOHmaxH5紫外特征（银镜）黑AgAgNOVitC二、鉴别反应（一）与AgNO3反应(ChP2000)具有强还原性]：取本品0.2g,加水10ml溶解，取5ml，加硝酸银0.5ml，成--（二）、与2，6-二氯靛酚反应无色二氯靛酚，VitC62氧化型玫瑰红色H还原型蓝色OHOHˉ(ChP2000)NClHOClONClHOClOHH（玫瑰色）（无色）取本品0.2g,加水10ml溶解，取5ml，加2，6-二氯靛酚2d，成--IIVitCH去氢抗坏血酸2指示剂淀粉指示液四、含量测定（一）碘量法1原理OOCOHHOOCH2OHHI2+OHOOCOHHCH2OHHOH+I取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O62、方法）（ml/mg...nMCT806821317610IIVitCH去氢抗坏血酸2（1）酸性环境d.HCl（2）新沸冷H2O减慢VitC被O2氧化速度4、讨论（3）立即滴定赶走水中O2减少O2的干扰（4）附加剂干扰的排除片剂——滑石粉——过滤注射剂——抗氧剂——丙酮甲醛Na2SO3NaHSO3Na2S2O3Na2S2O5一缩二亚硫酸CHHOOaS3aSO+H2NHON2252HONHCOS3a33COCHCH33CHCHCNaSO3OH33CHCHCNaSO3OH苯并－二氢吡喃醇第四节维生素E的分析AnalysisofVitaminEOHOCHCOOH结构与性质一、苯环+二氢吡喃环+饱和烃链1、易溶于有机溶剂，不溶于水2、UV3、酯键易水解]O[orOHHVitE醌型化合物生育酚△]O[HNO3VitE生育红生育酚75℃15′（一）硝酸反应橙红色鉴别二、三氯化铁－联吡啶反应红色生育醌对生育酚联吡啶2FeKOHFeVitE3△[O]（二）=41.0～45.5%cmE11λmax=284nmλmin=254nm0.01%无水乙醇中UV法（三）维生素EUV图薄层板硅胶G展开剂环己烷-乙醚（4：1）显色剂硫酸（105℃5′）VitERf=0.7TLC法（四）（五）其他方法：GCIR酸度和游离生育酚硫酸铈滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黄→灰紫）生育醌对生育酚3422CeCe利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈检查三、原理（一）试剂（二）本节小结1、VitA：掌握三氯化锑鉴别反应的原理、2、VitB1：掌握硫色素反应（鉴别及含量测定）的原理。3、VitC：掌握其结构特征（还原性）、碘量法含量测定的原理及操作注意事项4、VitE：掌握硝酸反应的原理。