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实验四：地衣门、苔藓门实验四：地衣门、苔藓门实验四：地衣门、苔藓门【实验用品】1、材料：三种不同类型的地衣标本、叶状地衣装片标本；地钱、葫芦藓的新鲜标本和装片标本；其他藓类新鲜标本。2、器材和仪器：显微镜、多媒体、投影仪、解剖镜、培养皿、载玻片、盖玻片、烧杯、滴管、解剖器材、吸水纸、擦镜纸、纱布、蒸馏水。【目的要求】1、观察识别三种不同类型的地衣的形态特征。2、观察、了解苔藓植物主要代表植物的形态和构造，掌握苔藓植物的特征、生活史，及其在植物界的演化地位。地衣是藻类和真菌共生的复合体。由于菌、藻长期紧密地结合在一起，无论在形态上、结构上、生理上和遗传上都形成一个单独的固定的有机体。参与地衣共生的藻类，主要包括绿藻和蓝藻，以及个别黄藻与褐藻。常见的属是绿藻中的共球藻属，桔色藻属，小球藻属和胶球藻属。构成地衣的真菌，大多是蓝细菌中的念珠蓝细菌属，伪枝蓝细菌属和真枝蓝细菌属。实验四：地衣门、苔藓门【方法步骤】一、地衣1、壳状地衣地衣体是彩色深浅多种多样的壳状物。菌丝与基质紧密相连，因此原植体紧贴于基物上，很难采下。多生长于岩石上。2、叶状地衣地衣体呈叶片状，四周有瓣状裂片。常由叶片下部生出一些假根或脐，所以原植体固着于基物上，易于采取。3、枝状地衣地衣体树枝状，直立或下垂，仅基部附着于基质上。（一）不同类型地衣标本的外形比较实验四：地衣门、苔藓门但这三种类型的区别不是绝对的，仍有很多地衣是过度型或中间类型，如鳞片状、粉末状。壳状地衣图4-1地衣叶状地衣枝状地衣枝状地衣图4-1三种类型地衣实验四：地衣门、苔藓门用镊子取少许地衣，置于载玻片水滴中，并用解剖针轻轻将材料分开、加盖玻片，用显微镜观察。在视野中你能看到组成地衣的真菌菌丝和藻类细胞吗？取叶状地衣装片标本，置显微镜下观察，可见由上而下分为三层：（1）上层由紧密交织的菌丝组成。（2）中层由菌丝和藻类细胞组成，注意属藻细胞是均匀分布还是分散在菌丝中？（3）下层菌丝紧密交织，并有成束菌丝形成的假根。能否区分出明显的藻胞层？【实验步骤】实验四：地衣门、苔藓门上皮层和下皮层均由致密的菌丝构成；藻胞层（图中绿色层）在上皮层和髓层之间，由藻细胞聚集的部分；髓层介于藻胞层和下皮层之间，由一些疏松的菌丝和藻细胞构成。图4-2叶状异层地衣横切实验四：地衣门、苔藓门显微镜下同层地衣的藻细胞均匀分布在髓层中，不存在藻胞层；异层地衣有藻细胞层，髓层介于藻细胞层与下皮层之间，由一些疏松的菌丝和藻细胞构成，所以相对同层地衣的髓层，异层地衣的髓层显得疏松。图4-3异层地衣与同层地衣（二）同层地衣与异层地衣的区别：实验四：地衣门、苔藓门（一）地钱配子体地钱配子体为绿色扁平二叉分枝的叶状体。上面表皮有斜方形网纹，网纹中央有一白点。下面有多数假根及紫褐色鳞片。叶状体颇厚，为多层细胞所组成。其前端凹入处有顶端细胞，是地钱的生长点部分。二、地钱属实验四：地衣门、苔藓门（二）有性生殖地钱是雌雄异株植物。当有性生殖的时候，在雄株植物体的中肋上生出雄生殖托，雄生殖托圆盘状，具有长柄。在雌株的中肋上，雌生殖托伞形，下垂8-10条指状芒线。图4-地钱的雄株和雄生殖托图4-地钱的雌株和雌生殖托实验四：地衣门、苔藓门有的叶状体在其背面分叉处，生有小环状的胞芽杯。胞芽杯内生有许多胞芽，成熟时胞芽由柄处脱落，散发于土中，萌发成新的植物体。（三）营养生殖芽孢杯芽孢图4-4地钱胞芽杯实验四：地衣门、苔藓门1、观察地钱雌株的新鲜标本地钱的雌器托由托柄、托盘两部分组成。托盘由若干芒线组成，颈卵器生于芒线之间。取地钱雌器托纵切装片标本置显微镜观察。可见其托柄顶端的两条芒线之间的基部，倒悬着一列颈卵器。颈卵器的壁有一层细胞构成，颈部细长，内有一串小细胞，叫颈沟细胞；腹部膨大，内有一个卵细胞，卵细胞上还有一个细胞，叫腹沟细胞。取孢子体的装片标本，置显微镜观察。其孢子体可分三部分：（1）基足埋于颈卵器基部的组织中。（2）蒴柄较短，一端与基足相连，另一端与孢蒴相连。（3）孢蒴孢子体的主要部分，外面为单层细胞构成的壁所包被，内有孢子和弹丝。【实验步骤】实验四：地衣门、苔藓门2、观察地钱雄株的新鲜标本取雄器托纵切片，置显微镜观察，可见雄托盘上有许多小孔腔，每个孔腔内有一个精子器。精子器呈椭圆形，具短柄。比较雄器托与雌器托在形态上的差异。3、观察地钱的胞芽杯和胞芽找到地钱叶状体背面中肋上的绿色胞芽杯，用镊子取下一个胞芽杯，置载玻片上，用解剖针挑破杯壁，并抖出胞芽，加上盖玻片，在显微镜下观察，注意胞芽的形态特征。实验四：地衣门、苔藓门图4-6地钱孢子体图4-5地钱配子体切面图实验四：地衣门、苔藓门小型，黄绿色，无光泽，直立，丛集或散列群生有茎、叶的分化。茎短小，基部生有假根。雌雄同株，但雌、雄生殖器官分别生于不同的枝上。图4-7葫芦藓三、葫芦藓属全国广布，生于平原、田地，生于有机质丰富含氮肥较多的湿土。雌雄同株，但雌、雄生殖器官分别生于不同的枝上。实验四：地衣门、苔藓门1、葫芦藓配子体葫芦藓配子体是一种“茎叶体”，植株矮小直立。叶舌形，在基部生有许多毛状假根。取一片叶子作水藏封片，在显微镜下观察在叶的中部有一条明显的中肋，除中肋外其余部分皆为一层细胞厚。【实验步骤】图4-葫芦藓配子体实验四：地衣门、苔藓门2、观察精子器和颈卵器葫芦藓雌雄同体但不同枝。雄枝顶端的叶片即雄苞叶，较宽而且外翻，很多桔黄色的精子器在枝顶中央，好似一朵“小花”。而雌枝开始时较弱，发育较晚，顶端的雌苞叶较窄且紧抱如芽。用解剖针在镜下把雄枝和雌枝顶端的苞叶去掉，可见棒状的精子器和颈卵器。精子器丛生，每个枝端约有数十个，可加一滴水并盖上盖片详细观察精子器的形状和结构。在精子器之间还夹杂着单列细胞的隔丝。其顶端一个细胞膨大成球状。轻压盖片，立即在显微镜下观察，有的精子器的盖细胞被挤开，内部的精子象烟雾一样涌出来，观察精子的形状和运动。并染色观察精子的鞭毛。在雌枝顶端的颈卵器数目较少，一般只有数个，观察颈卵器的颈部和腹部，辨认出颈沟细胞、腹沟细胞和卵细胞，并比较颈卵器发育的不同时期。颈卵器的腹部下面还有多个细胞的短柄。最后取雌枝和雄枝枝端纵切装片，与自己解剖的材料进行观察和对照。实验四：地衣门、苔藓门图4-9葫芦藓雄配子枝纵切图4-10葫芦藓雌配子枝纵切实验四：地衣门、苔藓门取寄生在配子体枝端的孢子体，观察其形态，肉眼所见部分为细长的蒴柄，顶端是歪斜葫芦形的孢蒴，在孢蒴上还带一个勺形的蒴帽，想想是怎样产生的？而孢子体的基足则插入配子体顶端的组织内，外观上看不见。将孢蒴从蒴柄上取下，在解剖镜下用针轻轻拨掉蒴盖，此时可看到环带及其卷落的情形，而且蒴齿也暴露出来。注意蒴齿有多少条？它们的尖端都连在中央一个圆形的薄片上。可以用针拨开外蒴齿观察内蒴齿。比较二者有何异同？最后捅破孢蒴，可看到内部大量的孢子。3、观察葫芦藓孢子体实验四：地衣门、苔藓门图中绿色丝状物即为40倍镜下的葫芦藓原丝体。由绿丝体、轴丝体和假根构成。葫芦藓原丝体由孢子发生而来，可以产生几个芽，每一个芽都能形成一个新的植物体。图4-11葫芦藓原丝体（10×40）实验四：地衣门、苔藓门四、其他苔藓植物的观察1、提灯藓科提灯藓雌雄异株或同株，植物体疏松丛生，呈鲜绿或暗绿色，茎直立或匍匐，基部有假根；叶片多呈卵圆形；中肋单一粗壮，长达叶尖或在稍下处消失，叶片湿时伸展，干时皱缩或螺旋状扭卷；生殖苞顶生，蒴柄细长直立；孢蒴呈卵状圆柱形。实验四：地衣门、苔藓门图4-尖叶提灯藓1.植物体2.叶片（10×4）实验四：地衣门、苔藓门图4-多蒴立孢藓1.植物体2.叶片（10×4）实验四：地衣门、苔藓门五、丛藓科植物体一般直立而密集成丛。色泽暗绿、鲜绿或黄绿色，少有分枝。叶披针形、卵披针形或阔舌形，干燥时卷曲。孢蒴卵形，椭圆形或圆柱形。图4-丛藓科实验四：地衣门、苔藓门蔓藓科银叶真藓凤尾藓科【实验内容】一、装片观察观察所给出的各种地衣的永久装片，注意同层地衣和异层地衣在结构上的区别；观察葫芦藓的精子器和颈卵器及原丝体永久装片，注意精子器和颈卵器的结构，注意二者之间的共同结构和不同之处，注意原丝体的形态及其发生和作用。实验四：地衣门、苔藓门二、新鲜材料的观察与装片制作1、地衣（1）观察壳状地衣的形态。尝试用解剖针轻轻将材料分开、加盖玻片，用显微镜观察，在视野中你能看到组成叶状地衣的真菌菌丝和藻类细胞吗？注意材料一定要用解剖针拨很开，才能看到菌丝和藻类，否则视野内看起来像是一团黑色的杂质。2、地钱（1）地钱外形观察：取地钱配子体，察为绿色扁平的二叉分枝的叶状体。向上的一面为背面，靠近土表的一面为腹面。直接用眼睛观察或用放大镜观察背面，注意菱形或多角形的小区中的气孔；把标本翻过来看腹面，注意观察毛绒绒的假根以及紫色的磷片（磷片不易观察，要仔细查找）实验四：地衣门、苔藓门（2）装片制作：用镊子取下一个胞芽杯，置于载玻片上，用解剖针挑破杯壁，并抖出胞芽，加水盖上盖玻片看，在显微镜下观察。观察胞芽的形态特征。3、葫芦藓取寄生在配子体枝端的孢子体，观察其形态，肉眼所见部分为细长的蒴柄，顶端是歪斜葫芦形的孢蒴，在孢蒴上还带一个勺形的蒴帽，想想是怎样产生的？而孢子体的基足则插入配子体顶端的组织内，外观上看不见。将孢蒴从蒴柄上取下，在解剖镜下用针轻轻拨掉蒴盖，此时可看到环带及其卷落的情形，而且蒴齿也暴露出来。注意蒴齿有多少条？它们的尖端都连在中央一个圆形的薄片上。可以用针拨开外蒴齿观察内蒴齿。比较二者有何异同？最后捅破孢蒴，可看到内部的蒴轴和大量的孢子。实验四：地衣门、苔藓门【注意事项】1、地衣制作装片时注意材料一定要用解剖针拨很开，才能看到菌丝和藻类，否则视野内看起来像是一团黑色的杂质。2.注意观察要仔细认真。【实验报告】1、绘图（1）绘图表示同层地衣和异层地衣的区别。（2）绘出葫芦藓雄枝顶纵切和雌枝纵切显微图，表示颈卵器、精子器、叶、侧丝等结构及着生位置。2、思考题（1）列表区别三种类型地衣的主要形态特征。（2）苔纲和藓纲的主要区别是什么？实验四：地衣门、苔藓门